异养菌测定推选优秀ppt

异养菌测定(cèdìng)第一页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)2培养基的配制方法一牛肉膏3g琼酯15—20g蛋白胨10g氯化钠5g蒸馏水1000ml方法二如有配好的培养基（成分与方法一相同），取30g培养基于1000ml去离子水中。制备：将上述培养基加热溶解(róngjiě)（溶解(róngjiě)后如有沉淀，趁热用四层纱布脱脂棉过滤）趁热用1mol/L的NaOH溶液调PH值至7.5左右，分装到三角瓶中，装液量一般不要超过三角瓶的2/3，依次用脱脂棉、报纸将三角瓶口扎好，于121℃、0.1mPa灭菌20min。

第二页，共27页。盖上上盖，做水平旋转以使样品和培养基充分(chōngfèn)混合。将上述培养基加热溶解(róngjiě)（溶解(róngjiě)后如有沉淀，趁热用四层纱布脱脂棉过滤）趁热用1mol/L的NaOH溶液调PH值至7.将上述培养基加热溶解(róngjiě)（溶解(róngjiě)后如有沉淀，趁热用四层纱布脱脂棉过滤）趁热用1mol/L的NaOH溶液调PH值至7.9/29/20212011/5/27关闭排气阀后，继续加热，这时压力表指针开始上升。加水，取出装料桶，往锅内加水，加至与搁架相同的位置即可。务必待压力降至零，再打开锅盖，否则高压锅内压力突然降低，会导致培养基或其他液体发生复沸腾。截一条5cm左右的报纸条(zhǐtiáo)，将其一端折进约3cm宽使成双层，让移液管的尖端包进双层纸内（移液管与纸条(zhǐtiáo)的夹角成30°为宜），然后选择移液管，使纸条(zhǐtiáo)成螺旋状地包裹在移液管外面，最后将多余的纸条(zhǐtiáo)打个结，以防散开。装料，装入要灭菌的物品，注意(zhùyì)瓶塞不要紧贴桶壁。关闭排气阀后，继续加热，这时压力表指针开始上升。异养菌的测定(cèdìng)第二十五页，共27页。现在移液管上端开口约0.异养菌的测定(cèdìng)9/29/20212011/5/27异养菌的测定(cèdìng)11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)3高温灭菌本实验要在无菌条件下进行，所以除去样品，我们所用到的器皿和试剂，包括(bāokuò)三角瓶、培养皿、移液管、试管、滴管、培养基、生理盐水等都要预先包装并灭菌后使用。灭菌方法有：干热灭菌、加压蒸汽灭菌、气体灭菌、间歇灭菌、过滤灭菌、紫外灯灭菌等，我们现在用的是加压蒸汽灭菌和紫外灯灭菌相结合。第三页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)4灭菌(mièjūn)原理第四页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)5手提式灭菌(mièjūn)锅的结构第五页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)6灭菌(mièjūn)锅的使用方法加水，取出装料桶，往锅内加水，加至与搁架相同的位置即可。装料，装入要灭菌的物品，注意(zhùyì)瓶塞不要紧贴桶壁。加盖，将盖上的金属软管插入装料桶的排气槽中，摆正锅盖，使螺口对齐，采用对角螺丝同时拧的方式拧紧螺丝打开排气阀。排气，打开加热电源，待水沸腾后，蒸汽和空气一起排出从排气孔排出，待空气排净后关闭排气阀。关闭排气阀后，继续加热，这时压力表指针开始上升。升压，关闭排气阀后，压力开始上升。保压，当压力表到0.1Mpa时，开始计时，20min后关闭电源，使压力自然降至零。第六页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)7注意事项使用灭菌锅时，严格按照操作程序进行(jìnxíng)，以免发生事故。务必待压力降至零，再打开锅盖，否则高压锅内压力突然降低，会导致培养基或其他液体发生复沸腾。第七页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)8灭菌(mièjūn)前玻璃器皿的包装1.移液管的包装现在移液管上端开口约0.5cm处塞一段长约1-1.5cm的普通棉花（不要用脱脂棉，易吸水）松紧要合适，目的(mùdì)是防止用洗耳球吸样品时污染样品。第八页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)92.移液管的包扎(bāozā)截一条5cm左右的报纸条(zhǐtiáo)，将其一端折进约3cm宽使成双层，让移液管的尖端包进双层纸内（移液管与纸条(zhǐtiáo)的夹角成30°为宜），然后选择移液管，使纸条(zhǐtiáo)成螺旋状地包裹在移液管外面，最后将多余的纸条(zhǐtiáo)打个结，以防散开。第九页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)10培养皿、三角瓶和试管(shìguǎn)的包装将洗净的培养皿每10套一组叠在一起用报纸包裹，为防止松开，可用棉线绳扎紧。空试管、三角瓶的包扎将洗净的三角瓶或试管口塞上棉塞，外包一层牛皮纸，用棉线绳扎紧瓶口后进行(jìnxíng)加压蒸汽灭菌，在121℃下灭菌20min。第十页，共27页。9/29/20212011/5/27盖上上盖，做水平旋转以使样品和培养基充分(chōngfèn)混合。9/29/20212011/5/279/29/20212011/5/27异养菌的测定(cèdìng)异养菌的测定(cèdìng)灭菌(mièjūn)前玻璃器皿的包装9/29/20212011/5/27异养菌的测定(cèdìng)9/29/20212011/5/27异养菌的测定(cèdìng)11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)11紫外线灭菌(mièjūn)一般(yībān)用于无菌室、无菌箱等灭菌，每次灭菌在20min左右。紫外线只是表面杀菌，不能渗透到内部。注意事项：不能直视汞灯第十一页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)12接种(jiēzhòng)与计数①各取1ml稀释液分别注入无菌培养皿中，每个稀释度做3个重复样；②倒入熔化并冷至45---50℃左右可用手背、鼻尖试不烫为宜，加上述培养基15ml左右，凝固后倒置平板在28—30℃恒温箱内培养3天，取出进行菌落计数。10.1.3计数方法选30—300菌落计数原则若低于30可以按实际数计(shùjì)，然后求出每毫升异养菌的总数。菌数/1ml=培养皿上的菌数平均值×稀释倍数第十二页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)13接种(jiēzhòng)步骤如下：第十三页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)14将上盖打开(dǎkāi)少许第十四页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)15用灭过菌的移液管加入1ml样品(yàngpǐn)每个稀释度，（注意都用新的灭过菌的移液管）。第十五页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)16倒入45～50℃的培养基10～15ml第十六页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)17盖上上盖，做水平旋转以使样品和培养基充分(chōngfèn)混合。第十七页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)18将培养皿倒置，放置28℃～30℃恒温箱中培养三天(sāntiān)，然后计数。第十八页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)19谢谢(xièxie)！！第十九页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)20循环(xúnhuán)水中粘泥测定原理操作(cāozuò)结果处理第二十页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)21原理(yuánlǐ)用一定目数的滤网，过滤一定量的循环水，用过滤得到的生物粘泥的量除以循环水量(shuǐliànɡ)，以mg/m3表示第二十一页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)22操作步骤1、循环水流速(liúsù)的测定第二十二页，共27页。11/24/20222011/5/27异养菌的测定(cèdìng)23第二十三页，共27页。11/24/