齐鲁医学糖类、蛋白质、脂肪的鉴定

实验

生物组织中糖类脂肪和蛋白质鉴定糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第1页!思考题：1、糖类、脂肪、蛋白质鉴定的实验原理2、常见的还原糖有哪些？取材的要求3、斐林试剂的组成，使用时的注意事项4、双缩脲试剂的组成，使用时注意事项5、斐林试剂和双缩脲试剂的比较6、脂肪鉴定中酒精的用法和作用7、脂肪鉴定中能否直接观察颜色？借助什么来观察？8、如何鉴定淀粉，颜色反应如何糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第2页!1.实验原理：化学试剂+有机化合物→特定的颜色(1)还原糖+斐林试剂水浴加热砖红色沉淀(2)脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ→红色(3)蛋白质+双缩脲试剂→紫色糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第3页!1.点拨：还原糖+斐林试剂

砖红色沉淀

可溶性还原糖与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O沉淀。（放在盛有50-65℃温水的大烧杯）水浴加热颜色变化：浅蓝色棕色砖红色糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第4页!注意事项：（1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果》梨》白萝卜。

思考：西瓜、甘蔗、甜菜可以吗？为什么？（2）试剂：斐林试剂(等量混合、现配现用)

甲液：0.1g/mL的NaOH溶液

乙液：0.05g/ml的CuSO4溶液糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第5页!双缩脲试剂组成：A液：0.1g/mL的NaOH溶液B液：0.01g/mL的CuSO4溶液使用注意事项：先加A液1mL于样液中，再加B液4滴于样液中（1）蛋白质+双缩脲试剂→紫色

糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第6页!斐林试剂

双缩脲试剂

甲液乙液A液B液成分

鉴定物质

添加顺序方法反应条件反应现象

5.比较斐林试剂和双缩脲试剂0.1g/mLNaOH同甲液0.01g/mLCuSO40.05g/mLCuSO4还原性糖蛋白质等量混合后再加入先加A液1mL，摇匀，再加B液4滴50-65℃水浴加热砖红色沉淀紫色络合物不需加热，摇匀糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第7页!3.脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ→红色糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第8页!8、如何鉴定淀粉，颜色反应如何糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第9页!1.鉴定生物组织中可溶性还原糖的试剂A．斐林试剂B．双缩脲试剂C．苏丹Ⅲ染液D．苏丹Ⅳ染液2.能与斐林试剂反应产生砖红色沉淀的是A．淀粉B．果糖C．蔗糖D．纤维素3.下列哪个实验用到显微镜（）A可溶性还原糖的鉴定B．蛋白质的鉴定C．脂肪的鉴定D．淀粉的鉴定ACB糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第10页!6.还原糖的实验中，加入斐林试剂时必须要A．先加入斐林试剂甲液，后加入乙液B．先加入斐林试剂乙液，后加入甲液C．将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后再加D．以上A、B、C三种操作方法都正确7.鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂正确做法是A．先加A液，混合后再加B液摇匀观察B．先加B液，混合后再加A液摇匀观察C．A、B液混合后加入，摇匀后观察D．A、B液同时加入样液，摇匀后观察CA糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第11页!斐林试剂

双缩脲试剂

甲液乙液A液B液成分

鉴定物质

添加顺序方法反应条件反应现象5.比较斐林试剂和双缩脲试剂0.1g/mL的NaOH溶液0.1g/mL的NaOH溶液0.01g/mLCuSO4溶液0.05g/mL的CuSO4溶液还原性糖蛋白质甲液和乙液等量混合均匀后再加入先加双缩脲试剂A液1mL，摇匀，再加双缩脲试剂B液4滴50-65℃水浴加热砖红色沉淀紫色络合物不需加热，摇匀即可糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第12页!2、常见的还原糖有哪些？取材的要求还原糖：可被氧化充当还原剂的糖。(常见的有：葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖)

注意：蔗糖不是还原糖3、斐林试剂的组成，使用时注意事项斐林试剂：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液使用注意事项：等量混合，现配现用（

NaOH+CuSO4）糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第13页!1步骤：样液制备:（取材5g，加入石英砂和

5ml水）(1)取样液2ml于试管中(2)加入新配制的斐林试剂1ml（甲液和乙液等量混合均匀后再加入）盛有50-65℃温水的大烧杯）

(3)水浴加热2min左右(（4）观察颜色变化（浅蓝色→棕色→砖红色）糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第14页!4、双缩脲试剂组成，使用时注意事项糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第15页!2步骤：（1）试管中加样液2mL（2）加双缩脲试剂A液1mL（造成碱性环

境），摇匀（3）加双缩脲试剂B液4滴，摇匀（4）观察颜色变化（紫色）

注：①样液浓度不宜过高，以免实验后黏住试管壁，洗不干净。②B液不能过量，多余的B液会与A液反应成蓝色，而掩盖生成的紫色。糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第16页!6、脂肪鉴定中酒精的用法和作用7、脂肪鉴定中能否直接观察颜色？借助什么来观察？糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第17页!（2）步骤材料的选取：含脂肪量高的组织，如花生的子叶。①取材：取一粒浸泡过的花生种子，去掉种皮②切片③制片：（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央④染色：滴2～3滴苏丹Ⅲ染液，染色3min，用吸水纸吸去染液，再滴体积分数50%的酒精洗去浮色，再用吸水纸吸去多余的酒精（苏丹Ⅲ易溶于酒精中，避免影响实验结果），滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片⑤镜检观察：光学显微镜对光→低倍镜寻找着色圆形小颗粒→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第18页!

用试管取2mL待测组织样液，向试管内滴加1～2滴碘液，观察颜色变化。4、淀粉+碘→蓝色加1~2滴碘液糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第19页!4.用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液颜色的变化过程为（）A．无色一砖红色（沉淀）B．浅蓝色一砖红色（沉淀）C．浅蓝色一蓝色一砖红色（沉淀）D．浅蓝色一棕色一砖红色（沉淀）5.下列物质中，能被苏丹IV染液染成红色的是（）A马铃薯块茎B．浸软的蓖麻种子C．蛋清液D．苹果DB糖类、蛋白质、脂肪的鉴定共22页，您现在浏览的是第20页!即：还原糖中的醛基（–CHO）被Cu(OH)2氧化，Cu(OH)2被还原成砖红色的Cu2O沉淀还原糖的鉴定原理：还原糖+斐林试