2022年医学专题-核型多角体病资料指南

病毒学第一节核型多角体病第二节质型多角体病第三节浓核病第四节病毒(bìngdú)病的发病规律第五节病毒病的防治第一页，共三十六页。病毒(bìngdú)的发现？19世纪末，钱伯伦创制细菌过滤器后，发现了许多毒素和过滤性因子。1892年，苏联学者伊万诺夫斯基证明存在过滤性病毒(bìngdú)（发现患花叶病的烟草叶汁通过过滤器后仍有侵染性）。19世纪末20世纪初，已经找到许多过滤性病毒。1915年，Twort首先发现细菌病毒。1935年，美国生化学家W.M.Stanleg获得了烟草花叶病毒结晶。（第一位）开始了对病毒本质的认识(rènshi)，促进病毒学的发展，而且成为分子生物学发展的里程碑。第二页，共三十六页。超显微(xiǎnwēi)的，可以通过细菌过滤器。病毒粒子只含一种核酸。病毒粒子不能生长，也不能二等分裂。无细胞结构。病毒只能利用宿主细胞的核糖体进行Pr合成。病毒的主要(zhǔyào)特征：第三页，共三十六页。家蚕(jiācán)病毒病的研究历史1149年陈敷所著《农书》中关于家蚕脓病病症(bìngzhèng)“高节”、“脚肿”的描述。1639年徐光启的《农政全书》中，有病蚕“游走而不安箔”的描述。1874年汪日桢《湖蚕述》记有病蚕“高节而足流白水”。1912年Acqua发现了第一个昆虫病毒BmNPV。迄今已发现12目1600余种昆虫，可被16个科的病毒所感染。第四页，共三十六页。家蚕(jiācán)病毒病的种类1核型多角体病由杆状病毒科的家蚕核型多角体病毒（BmNPV）寄生血细胞和体腔内各种(ɡèzhǒnɡ)组织的细胞核，并形成多角体。2质型多角体病由呼肠病毒科的家蚕质型多角体病毒(bìngdú)（BmCPV）寄生中肠圆筒形细胞，并在胞质中形成多角体。复习内容：家蚕幼虫中肠上皮细胞的类型？第五页，共三十六页。家蚕(jiācán)病毒病的种类3浓核病由细小(xìxiǎo)病毒科的家蚕浓核病病毒（BmDNV）寄生中肠圆筒形细胞的细胞核，不形成多角体。4病毒性软化病由小RNA病毒科的家蚕软化病病毒（BmFV）寄生中肠杯形细胞胞质中，不形成(xíngchéng)多角体，但形成(xíngchéng)类似多角体的包涵体（封入体）。第六页，共三十六页。家蚕(jiācán)病毒病的危害情况病毒病是目前蚕茧生产中最为常见、危害(wēihài)最重的一类病害，给蚕茧生产造成的损失约占蚕病造成损失的80%。上述四种病毒病在我国都有不同程度的发生，其危害也因各个蚕区而不同。南方蚕区以中肠型脓病为主；而北方蚕区则以血液型脓病造成的损失最大。浓核病常与CPV并发；病毒性软化病目前已很少发生。因此，本章重点讲解NPV、CPV，并介绍DNV.第七页，共三十六页。第一节核型多角体病

核型多角体病也称血液型脓病，农民(nóngmín)常称之为脓病或脓肿。一病原

家蚕核型多角体病毒（BombyxmoriNuclearPolyhedrosisVirusNPV）。存在形式有两种：NPV与NPB（多角体）。（一）NPV属杆状病毒科，核型多角体病毒属，病毒粒子杆状，330×80nm；dsDNA;Tm为87.5℃；第八页，共三十六页。NPV病毒(bìngdú)粒子的超微结构NPV膜髓核（dsDNA）囊膜胶粘层衣壳核衣壳一个(yīɡè)囊膜内只含一个核衣壳一个囊膜内包含两个(liǎnɡɡè)以上核衣壳模式图单粒包埋型（SEV）与多粒包埋型（MEV）寄生部位血体壁气管上皮脑脂肪卵巢皮膜丝腺精巢皮膜SEV（%）97~9872~8963MEV（%）2~311~2837环境温度：25℃~28℃多形成SEV，33℃~35℃多形成MEV。第九页，共三十六页。（二）NPB（多角体）1构成(gòuchéng)多角体多角体蛋白(dànbái)3%~5%病毒(bìngdú)粒子核糖核酸聚合酶0.3%Si；微量Fe、Mg与宿主细胞Pr和病毒Pr均不同，分子量29000，由245个AA残基组成。2理化特性多为整齐六角形十八面体（偶有四方、三角或不正形）；2~6μm（平均3.2）；光镜下易观察到；淡绿色，折光性强；比水重；不溶于水及有机溶剂；对浓酸不稳定；易溶于碱性溶液；苏丹Ⅲ不能使其着色。第十页，共三十六页。扫描电镜照片NPB的形态(xíngtài)光镜照片N.bNPB第十一页，共三十六页。NPB形态(xíngtài)第十二页，共三十六页。NPB形态受下列因素(yīnsù)影响1寄生部位：血细胞、气管上皮、体壁上皮、脂肪体中均六角形。而丝腺腺细胞中则巨型三角形。多角体且较其他组织大2倍左右。睾丸(ɡāowán)、精室内膜上寄生则四方形。2宿主：BmNPV接种二化螟后：1代六角形，7代后四方形，再将四角形NPB反接种于B.m.，则：第一代少量六角形，第四代达70%~80%，第六代全部为六角形。第十三页，共三十六页。3与环境（温度）有关：BmNPV接种(jiēzhòng)蛹体。接种(jiēzhòng)后——28℃24hr后，再经35℃则产生四角形NPB28℃下48~96hr后,再经35℃则产生六角形。35℃下24~48hr后,再经28℃则产生六角形。35℃下72~96hr后,再经28℃则产生四角形。NPB形态(xíngtài)受下列因素影响第十四页，共三十六页。3NPB的稳定性处理浓度温度℃失活时间(shíjiān)(min)日光4020h干热10045

湿热1003

甲醛2%2515漂白粉0.3%253石灰浆1%253石灰水清25>24h盐酸比重1.025253第十五页，共三十六页。二病症(bìngzhèng)1典型病症（共同(gòngtóng)症状）第十六页，共三十六页。2不同时期(shíqī)发病

不眠蚕：在蚕的催眠期间，蚕群体大部分快入眠时，NPV病蚕体壁紧张发亮，呈乳白色，行动活泼(huópo)，不能入眠，终于体皮破裂，流脓而死。

起节蚕：在起蚕时发病。病蚕生长停滞，体色乳白而不见转青。体壁松弛多皱，体躯缩小(suōxiǎo)。前节的节间膜向后套叠，终于出现典型的病征而死。

高节蚕：又称“竹节蚕”。源于病蚕各环节节间膜或环节后半部（靠近节间膜处）隆起，就象竹节。多在4、5龄蚕盛食期发病。第十七页，共三十六页。2不同时期(shíqī)发病

脓蚕：多发生于5龄后期至上簇前。环节肿胀拱起，呈算盘珠状，体壁紧张发亮，体色乳白，病重时，爬行缓慢，终因腹足失去把持力，从蚕匾或蔟中坠下，流脓(liúnónɡ)而死。发病迟者死于蔟中或结薄皮茧而死亡，生产上比较常见。

斑蚕：在生产(shēngchǎn)上较少见，与蚕品种有关，现行品种少发生。发生时出现对称性的病斑，如黑褐色的焦脚、黑色气门及大的斑块等。

蛹期病症：在5龄后期、熟蚕、初蛹期感染可造成蛹期发病。病蛹体色暗褐或乳白，体壁易破，一经震动即流出浓汁而死，造成茧层污染，即内印茧或死茏茧。第十八页，共三十六页。2不同时期(shíqī)发病高节狂躁爬行第十九页，共三十六页。2不同时期(shíqī)发病腹足基部乳白(rǔbái)气门(qìmén)周围水渍状病斑第二十页，共三十六页。2不同时期(shíqī)发病第二十一页，共三十六页。2不同时期(shíqī)发病第二十二页，共三十六页。2不同时期(shíqī)发病第二十三页，共三十六页。三病变(bìngbiàn)NPV及其包涵体是在寄主细胞核内增殖和形成的，因而受感染的细胞核便发生一系列的病变过程。随着多角体的不断增多，使细胞核逐渐膨胀，随后细胞亦膨大破裂，这样(zhèyàng)多角体、病毒及细胞碎片就游离于血液中。

血细胞、气管上皮、脂肪(zhīfáng)组织及真皮细胞易形成多角体。在生殖腺和神经细胞中只能形成少量多角体，而蜕皮脱、唾腺和马氏管等则很难形成，在丝腺中除前部丝腺不能形成多角体，中、后部丝腺细胞核均能形成大量多角体。目前已发现NPV可在中肠圆筒形细胞中增殖,但不能形成多角体.第二十四页，共三十六页。病变第二十五页，共三十六页。病变第二十六页，共三十六页。四致病机理(jīlǐ)1感染(gǎnrǎn)入侵NPB蚕食(cánshí)下放出NPV污染桑叶碱液溶解肠腔灭活排出RFP围食膜中肠上皮细胞复制胞核定位血液NPV创伤NPV细胞间隙血细胞核定位第二十七页，共三十六页。2病毒(bìngdú)复制dsDNAdsDNAStRNArRNA病毒(bìngdú)Pr衣壳PrNPBPrssDNAmRNA胞质NPVNPB细胞核细胞质E3装配(zhuāngpèi)4释放第二十八页，共三十六页。5病毒(bìngdú)增殖NPV的增殖(zēngzhí)曲线隐潜期缓慢(huǎnmàn)增殖期高速增殖期稳定增殖期第二十九页，共三十六页。五发病(fābìng)特点1本病以食下传染为主（NPB），也可经伤口感染（NPV）。2主要传染源为病蚕血液（脓汁）。3本病主要发生在3龄~老熟（蛹期），尤以5龄中期~老熟前后最为严重。4本病属于亚急性传染病，小蚕感染后经3~4天发病死亡，大蚕经4~6天发病；外温高时，病程加快。第三十页，共三十六页。5病蚕体壁破裂流脓之前，蚕座二次感染的可能性较小。6由于NPB对自然环境有强的抵抗力，故该病除具有水平传播外，尚具有较强的垂直传播能力。7恶劣的环境条件及一些理化因素刺激可诱发本病。8不同蚕品种对本病抗性不同。第三十一页，共三十六页。六诊断1肉眼(ròuyǎn)鉴别第三十二页，共三十六页。2显微(xiǎnwēi)镜检查此病在发病初期，外观病症往往(wǎngwǎng)不明显，但发育迟缓，有时迟眠。取可疑蚕剪断尾角或腹足，滴一滴血液于载玻片上，加盖片与400~600倍显微镜下观察。如有折光性较强，大小较整齐的六角形多角体，即可确诊(quèzhěn)。如病蚕处于感染中期，可观察血细胞核内有无折光性强、大小不等的颗粒，据此确诊。镜检时，脂肪球与多角体的区别方法：（1）SudanⅢ染色法；（2）有机溶剂溶解法；六诊断第三十三页，共三十六页。2显微镜检查(jiǎnchá)3PCR检测(jiǎncè)与血清学方法以已知的抗体检查蚕体内是否存在相对应的抗原(kàngyuán)，从而做出蚕是否被某种病毒感染。第三十四页，共三十六