Gao-第08章-局部麻醉-胺类药物的分析

第八章

对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析11/13/20221pharmaceuticalanalysis-仁济药学11/13/20222pharmaceuticalanalysis理想的局麻药具备条件：①麻醉作用强，吸收快，作用时间长②无明显毒性，安全范围大③选择性作用于神经组织，穿透神经组织能力强④性质稳定⑤作用可复性局部麻醉药11/13/20223pharmaceuticalanalysisα－优卡因β－优卡因一、局部麻醉药的发展普鲁卡因的发现

可卡因（1890）爱康宁托哌可卡因11/13/20224pharmaceuticalanalysis

苯佐卡因阿索方新阿索方普鲁卡因-190411/13/20225pharmaceuticalanalysis③侧链碳链改变，可使麻醉作用延长，稳定性增加。④羧酸酯中的氧被硫置换，脂溶性增大，起效快。徒托卡因二甲卡因硫卡因11/13/20227pharmaceuticalanalysis2.酰胺类

甲哌卡因（卡波卡因）罗哌卡因丙胺卡因三甲卡因布比卡因利多卡因Isogramine生物碱11/13/20228pharmaceuticalanalysis对氨基苯甲酸酯类药物苯佐卡因（benzocaine）11/13/20229pharmaceuticalanalysis盐酸普鲁卡因芳伯氨基酯键,易水解脂烃胺Cl－反应11/13/202210pharmaceuticalanalysis盐酸丁卡因芳仲氨基脂烃胺Cl－反应酯键11/13/202211pharmaceuticalanalysis对乙酰氨基酚酰胺键，易水解杂质对氨基酚潜在芳伯氨基酚羟基酰胺类药物11/13/202212pharmaceuticalanalysis盐酸利多卡因脂烃胺空间位阻Cl－反应酰胺键潜在芳伯氨基11/13/202213pharmaceuticalanalysis结构特点与理化性质：具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基可用重氮化－偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色酯键或酰胺键易水解11/13/202214pharmaceuticalanalysis具脂烃胺侧链，弱碱性可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量重金属离子（如酚羟基）的反应UV、IR11/13/202215pharmaceuticalanalysis第二节鉴别试验（Identification）

重氮化—偶合反应与重金属离子反应水解产物的反应制备衍生物测熔点UV、IR11/13/202216pharmaceuticalanalysis（一）重氮化—偶合反应

（diazotization-couplingmethod）具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基HCl橙黄→↓猩红色11/13/202217pharmaceuticalanalysisHClOH－橙黄猩红~重氮盐偶氮化合物11/13/202218pharmaceuticalanalysis

直接：盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺、对氨基水杨酸钠

间接：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜、利多卡因、布比卡因11/13/202219pharmaceuticalanalysis盐酸普鲁卡因ChP（2000）[鉴别]（1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。

11/13/202220pharmaceuticalanalysis对乙酰氨基酚ChP（2000）[鉴别]（2）取本品约0.1g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性β-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。

11/13/202221pharmaceuticalanalysis水解后重氮化-偶合反应红色HClOH-对氨基酚11/13/202222pharmaceuticalanalysisNa2CO3溶解黄色蓝紫色（三）与重金属离子反应与铜离子反应——芳酰胺11/13/202223pharmaceuticalanalysis盐酸利多卡因，在酸性溶液中与氯化钴试液反应，生成亮绿色的Co盐沉淀盐酸利多卡因的水溶液加硝酸酸化，再加硝酸汞试液煮沸，显黄色；对氨基苯甲酸酯类药物显红色或橙黄色，可与之区别11/13/202224pharmaceuticalanalysis二乙氨基乙醇↑红石蕊试纸变蓝HCl（四）水解产物的反应

11/13/202225pharmaceuticalanalysis盐酸普鲁卡因ChP（2000）[鉴别]（2）取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10％氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。

11/13/202226pharmaceuticalanalysis苯佐卡因ChP（2000）[鉴别]（2）取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。

11/13/202227pharmaceuticalanalysis

（五）制备衍生物测熔点三硝基苯酚衍生物

盐酸利多卡因ChP（2000）三硝基苯酚利多卡因黄色沉淀，熔点为228～232℃，熔融时同时分解。盐酸布比卡因ChP（2000）衍生物熔点为194℃11/13/202228pharmaceuticalanalysis硫氰酸盐衍生物盐酸丁卡因ChP（2000）

其衍生物熔点约为131℃11/13/202229pharmaceuticalanalysis（六）UV

对于R——COX型化合物的吸收光谱当X=-OH或-OR时λmax基本值为230nm，p-NH2+58nm,p-NHCH3+73nm

具有芳环取代有发色团-C=O，助色团-OH、-NHR11/13/202230pharmaceuticalanalysis（七）IR

普鲁卡因普鲁卡因胺

COO(CH2)2NEt2CONH(CH2)2NEt2νC=016921640酯νC-01271、1170、1115—酰胺II吸收带δN-H1645（胺基）1540酰胺III吸收带νC-N—1280

二乙胺盐νN+-H25852645伯胺、酰胺νNH2

3315、32003100～350011/13/202231pharmaceuticalanalysis典型化学键的红外特征吸收峰峰位（cm-1）归属基团或化学键3750-3000羟基氨（胺）基3300-3000苯环烯炔1900-1650羰基1670-1500苯环

1300-1000酯羧酸1000-650苯环

11/13/202232pharmaceuticalanalysis第三节杂质检查（DetectionImpurities

）盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查11/13/202233pharmaceuticalanalysis五、含量测定

（Assay

）亚硝酸钠滴定法非水溶液滴定法紫外分光光度法比色法荧光法HPLC11/13/202234pharmaceuticalanalysis1.原理具芳伯氨基的药物（具游离芳伯氨基的药物和具潜在芳伯氨基的药物）在酸性溶液中与亚硝酸钠定量反应，生成重氮盐，用永停法或外指示剂法指示反应终点

（一）亚硝酸钠滴定法1:211/13/202235pharmaceuticalanalysis具潜在芳伯氨基的药物水解或还原11/13/202236pharmaceuticalanalysis（1）加入适量KBr加速反应

在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：

2.主要测定条件NaNO2+HCl→HNO2+NaClHNO2+HCl→NOCl+H2O11/13/202237pharmaceuticalanalysis11/13/202238pharmaceuticalanalysis（1）K1（2）K2

∵K1≈300K2加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度11/13/202239pharmaceuticalanalysis（2）酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3综合考虑，采用盐酸（过量）11/13/202240pharmaceuticalanalysis①重氮化反应速度加快；②重氮盐在酸性溶液中稳定；③防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果加入过量盐酸：11/13/202241pharmaceuticalanalysis盐酸量也不能过多芳伯胺/盐酸1:2.5-6

(摩尔比)偶氮氨基化合物11/13/202242pharmaceuticalanalysis（3）室温条件下滴定高温下，重氮反应快

10～30℃温度过高，重氮盐分解11/13/202243pharmaceuticalanalysis滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定，将管尖提出液面再缓缓滴定至终点（4）滴定速度：先快后慢快速滴定法11/13/202244pharmaceuticalanalysis（1）永停滴定法ChP（2000）、BP（1998）3.指示终点的方法原理：（电极为铂－铂电极系统）终点前溶液中无亚硝酸，线路无电流通过，电流计指针指零终点时溶液中有微量亚硝酸，电极即起氧化还原反应，线路中遂有电流通过，电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点11/13/202245pharmaceuticalanalysis永停滴定法（附录ⅦA）用作重氮化法的终点指示时，调节R1使加于电极上的电压约为50mV。取供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水40ml与盐酸溶液（1→2）15ml，而后置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂—铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。11/13/202246pharmaceuticalanalysis

KI—淀粉糊剂或试纸2NaNO2+2KI+4HCl→2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O

原理：滴定到达终点后，稍过量的NaNO2在酸性溶液中氧化KI，析出的I2，遇淀粉即显蓝色（2）外指示剂法11/13/202247pharmaceuticalanalysis脂烃胺侧链、芳氨基，具弱碱性

直接在水溶液中滴定有困难，但在非水溶剂中滴定滴定终点突跃明显

（二）非水溶液滴定法原理适用对象：盐酸利多卡因盐酸丁卡因肾上腺素类11/13/202248pharmaceuticalanalysis滴定液高氯酸滴定液溶剂冰醋酸冰醋酸+醋酐醋酐指示剂结晶紫指示液+醋酸汞条件消除HX干扰加入Ac2O——增加碱性，终点突跃明显,

否则改用电位法指示终点

11/13/202249pharmaceuticalanalysis对乙酰氨基酚

在稀碱溶液中，于257nm处有最大吸收，在CH3OH-H2O混合溶剂中λmax244nm其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。

USP多采用标准对照法而ChP则采用吸收系数法715λmax257（三）紫外分光光度法11/13/202250pharmaceuticalanalysis对乙酰氨基酚

USP（24）对照法

标准品溶剂溶解稀释供试品溶剂溶解以溶剂为空白在λmax处测A，计算即得Ax/AR×CR11/13/202251pharmaceuticalanalysis盐酸普鲁卡因注射液ChP（2000）可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸

离子抑制色谱法内标法定量（四）HPLC法11/13/202252pharmaceuticalanalysis*方法与含量计算:对照品溶液(浓度C对)+

内标