细胞生物学课件细胞骨架课件

关于细胞生物学课件细胞骨架第1页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五细胞骨架（Cytoskeleton）是真核细胞中的蛋白质纤维网架体系，它对于维持细胞的形状、细胞的运动、细胞内的物质运输、染色体的分离和细胞的分裂起着重要的作用。第2页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第3页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五光镜下显示细胞骨架：红色荧光显示微丝黄色显示微管兰色显示细胞核

第4页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五细胞骨架由以下组分构成微丝（microfilament）微管（microtubule）中间纤维（intemediatefilament）广义的细胞骨架还包括核骨架（nucleoskeleton）核纤层（nuclearlamina）细胞外基质（extracellularmatrix）形成贯穿于细胞核、细胞质、细胞外的一体化网络结构。第5页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五微丝，又叫肌动蛋白纤维，是由肌动蛋白构成的两股螺旋形成的细丝，普遍存在于真核细胞中微管，是由微管蛋白单体构成的基本组件形成的中空的管状结构。普遍存在于真核细胞中中间纤维，又叫中间丝，粗细位于微丝和肌球蛋白粗丝之间，普遍存在于真核细胞中，是三种骨架系统中结构最为复杂的一种第6页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第7页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第一节微丝微丝（microfilament，MF）是由肌动蛋白(actin)组成的直径约7nm的骨架纤维，又称肌动蛋白纤维actinfilament。微丝和它的结合蛋白（associationprotion）以及肌球蛋白（myosin）三者构成化学机械系统，利用化学能产生机械运动。第8页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第9页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五根据等电点的不同可将高等动物细胞内的肌动蛋白分为3类：α分布于各种肌肉细胞中β和γ分布于肌细胞和非肌细胞中。肌动蛋白纤维是由两条线性排列的肌动蛋白链形成的螺旋，状如双线捻成的绳子第10页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五一、微丝的结构和功能1．结构（1）肌动蛋白（actin）*2个结构域，4个亚单位组成ATP（ADP）二价离子构象可改变与微丝的组装与解离有关*极性结构正端（＋）负端（－）结合位点第11页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五*存在形式游离球状肌动蛋白（G-actin)纤维状肌动蛋白(F-actin)第12页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五（2）微丝

结构：由肌动蛋白单体聚合形成双螺旋第13页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第14页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五组装：条件：ATP

盐浓度K+Mg++过程（三个阶段）：成核期

—微丝组装的限速过程生长期

—肌动蛋白在核心两端聚合正端快，负端慢平衡期

—聚合速度与解离速度达到平衡第15页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第16页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第17页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五动态调节：踏车模型（treadmillingmodel）非稳态动力学模型(dynamicinstabilitymodel)ATP是调节的主要因素ATP-肌动蛋白对微丝末端亲和性高ADP-肌动蛋白对微丝末端亲和性低ATP-肌动蛋白浓度与聚合速度成正比第18页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五微丝的任何一端都可以以添加肌动蛋白单体的方式增长，不过由于极性，两端的速度不同，速度快的一端为正端，速度慢的一端为负端，表现为踏车现象。当到达平衡期，肌动蛋白分子添加到肌动蛋白丝上的速度正好等于肌动蛋白分子从肌动蛋白上失去的速度，微丝的净长度没有改变，这种过程称为微丝的踏车行为。第19页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五movie第20页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第21页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五（3）微丝结合蛋白与肌动蛋白纤维结合，调节其性质和功能，影响微丝长度，稳定性和构形。分类：单体隔离蛋白（monomer-sequensteringprotein）交联蛋白（cross-linkprotein）末端阻断蛋白（endblockingprotein）纤维切割蛋白（filament-severingprotein）去聚合蛋白（actinfilamentdepolymerizationprotein）膜结合蛋白（membrane-bindingprotein）第22页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五各种微丝结合蛋白单体隔离蛋白去聚合蛋白膜结合蛋白末端阻断蛋白纤维切割蛋白交联蛋白第23页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第24页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五肌球蛋白（myosin）组成两条重链两条轻链结构特点两个头部与肌动蛋白纤维结合，水解ATP一个尾部装配成粗丝第25页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第26页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第27页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五（4）微丝的功能（1）构成细胞的支架，维持细胞的形态细胞皮质（cellcortex）也叫肌动蛋白皮质（actincortex）

细胞靠近质膜处的一层由微丝和各种微丝结合蛋白构成的网状结构第28页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五*微穗

（microspike）内含肌动蛋白纤维细胞表面伸展出的细而坚硬的突起，可快速形成和回缩，可作为探针使细胞感受环境，更长的微穗成为丝状伪足（filopodium）神经细胞、成纤维细胞片状伪足（lamellipodium）成纤维细胞第29页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五lamellipodia1lamellipodia2第30页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五微绒毛（microvilli）是质膜顶端表面的指状形突起。分布：存在于许多动物细胞表面的指状结构，在上皮细胞中特别丰富，可增加细胞表面积。小肠吸收上皮细胞最多结构组成微丝微丝形成的微丝束构成了微绒毛骨架微丝结合蛋白调节长度保持形状第31页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第32页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五绒毛蛋白毛缘蛋白肌球蛋白Ⅰ钙调蛋白第33页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五应力纤维（stressfiber）也叫张力纤维，是真核细胞中广泛存在的由微丝束构成的较为稳定的纤维状结构，位于细胞内紧邻质膜下方内含肌动蛋白纤维和肌球蛋白纤维有收缩功能，但不产生运动维持细胞的扁平铺展和特异形状并赋予细胞韧性和强度第34页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五培养的上皮细胞中的应力纤维（微丝红色、微管绿色）第35页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五（2）参与细胞分裂细胞分裂中形成收缩环（内含肌动蛋白纤维和肌球蛋白纤维）有丝分裂末期，两个即将分离的子细胞内产生收缩环，收缩环由平行排列的微丝和myosinII组成。随着收缩环的收缩，两个子细胞的胞质分离，在细胞松驰素存在的情况下，不能形成胞质分裂环，因此形成双核细胞。第36页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第37页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五（3）参与肌肉收缩肌纤维肌原纤维粗、细肌丝肌球蛋白肌动蛋白原肌球蛋白肌钙蛋白第38页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五肌纤维TEM照片Z盘第39页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第40页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五肌肉收缩图解（myosin）第41页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第42页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五（4）参与细胞运动胞质环流变形运动吞噬变皱膜运动第43页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五细胞的变形运动分为四步：①：微丝纤维生长，使细胞表面突出，形成片足(lamellipodium)；②在片足与基质接触的位置形成粘着斑；③在myosin的作用下微丝纤维滑动，使细胞主体前移；④解除细胞后方的粘和点。如此不断循环，细胞向前移动。阿米巴原虫、白细胞、成纤维细胞都能以这种方式运动。第44页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五movie第45页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五（5）参与细胞内物质运输（6）参与细胞内信号转导Rho-GTPase第46页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五3.药物对微丝的作用细胞松弛素B(cytochalasinB)

真菌-生物碱微丝+端结合鬼笔环肽(phalloidin)

毒蘑菇（Amanita）-毒素与聚合的微丝结合抑制肌动蛋白纤维的解聚第47页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第48页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五二、微管的结构与功能1.结构（1）微管蛋白（tubulin）α管蛋白β管蛋白γ微管蛋白-微管组织中心（MTOC）（2）微管（tubule）单微管（13）二联微管（13+10）（纤毛、鞭毛）三联微管（13+10+10）（基体、中心粒）异二聚体→原丝→微管（极性结构）内径：15nm第49页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第50页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五GTPGTP--〉GDP第51页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第52页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五1313+1013+10+10第53页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五分布真核细胞中普遍存在（脊椎动物脑组织）主要位于细胞质中，控制着膜性细胞器的定位和胞内物质运输细胞特殊结构纤毛、鞭毛、基体、中心体、纺锤体第54页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五A组装成核期（nucleationphase）-延迟期（lagphase）管蛋白聚合成短的寡聚体（核心）

片状微管聚合期（polymerizationphase）-延长期（elongationphase）聚合速度大于解聚速度稳定期（steadyphase）：聚合速度等于解聚速度（游离管蛋白达到临界浓度）第55页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第56页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第57页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第58页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五B组装的动态调节踏车模型非稳态动力学模型（dynamicinstability）GTP是调节微管体内外组装的主要物质GTP-管蛋白对微管末端的亲和力大GDP-管蛋白对微管末端的亲和力小管蛋白浓度第59页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第60页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第61页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五C微管组织中心（MTOC）微管的聚合从特异性的核心形成位点开始，这些核心形成位点主要是中心体和纤毛的基体，称为微管组织中心功能：帮助大多数细胞微管装配过程中成核中心体（centrosome）是动物细胞中决定微管形成的一种细胞器组成：中心粒（centriole）中心粒旁物质（pericetriolarmaterial）位置：间期：细胞核附近有丝分裂期：位于纺锤体的两极第62页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第63页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五（3）微管结合蛋白与微管结合，调节微管活性的一类蛋白。稳定微管调节微管特异性调节微管与细胞其他成分的作用MAP-1MAP-2tauMAP-4第64页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五2.微管功能（1）维持细胞的形态神经元细胞的轴突RBC双凹盘形（2）参与细胞的运动纤毛、鞭毛—二联管清除细胞表面异物输卵维持细胞自身运动基体、中心粒—三联管第65页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五A纤毛（cilia）、鞭毛（flagella）组成：质膜顶部轴丝

—微管及相关蛋白微管：9组二联管+中央微管（9+2）相关蛋白：动力蛋白

连接蛋白

辐射丝基体—纤毛组织中心（9组三联管）第66页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第67页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五鞭毛的结构第68页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五

运动产生：由微管滑动引起化学能转变为机械能（动力蛋白）滑动转变为弯曲运动（辐射丝，连接蛋白）第69页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第70页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五B中心粒（centriole）和基体（basalbody）组成：9组三联管9+0第71页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五中心粒：成对存在，互相垂直间期：形成微管，构成细胞骨架系统的主要纤维系统，一方面参与物质运输另一方面维持细胞形状分裂期：形成纺锤体的两极，指导有丝分裂进行第72页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五基体是纤毛器的基本结构基体与中心粒具同源性，结构、功能可以互换第73页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五中心体：中心粒周围无定形物质

间期：组织胞质微管形成分裂期：组织形成纺锤体

微管组织中心

（MTOC）第74页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五中心体结构模型第75页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第76页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第77页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第78页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第79页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五（3）参与细胞内物质运输及细胞器的迁移微管依赖性马达蛋白（motorprotein）驱动蛋白（kinesin）动力蛋白（dynein）第80页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五驱动蛋白Kinesin结构：是由两条轻链和两条重链构成的四聚体，外观具有两个球形的头（具有ATP酶活性）、一个螺旋状的杆和两个扇子状的尾。功能：通过结合和水解ATP，导致颈部发生构象改变，使两个头部交替与微管结合，从而沿微管“行走”，将“尾部”结合的“货物”（运输泡或细胞器）转运到其它地方。大多数能向着微管（+）极运输小泡。第81页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第82页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五动力蛋白Dynein结构：分子量巨大（接近1.5Md）由两条相同的重链和一些种类繁多的轻链以及结合蛋白构成鞭毛二联微管外臂的动力蛋白具有三个重链功能：在细胞分裂中推动染色体的分离驱动鞭毛的运动向着微管（-）极运输小泡第83页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第84页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五Movie

movie（organelle）第85页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第86页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第87页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五（4）调节细胞分裂微管是构成有丝分裂器的主要成分动粒微管染色体排于赤道板纺锤体极微管

染色体移向两极（5）参与细胞内信号转导

3.药物对微管的作用秋水仙素—阻止聚合紫杉醇—促进聚合第88页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五三、中间纤维的结构和功能1.概述形状：类似编织绳存在部位细胞核膜下—核纤层细胞中—围绕核形成篮筐样结构特性：稳定第89页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第90页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第91页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五2.分类根据亚单位特性分为六大类

*角质蛋白

*核纤层蛋白

第92页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五3.中间纤维蛋白结构头部区—氨基端尾部区—羧基端

杆状区—310aa中心区（螺旋区）形成聚合体的关键部位第93页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五第94页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五4.中间纤维的组装组装：两个单体形成双股超螺旋—二聚体两个二聚体形成四聚体—原纤丝两个四聚体交错排列—原纤维四个原纤维互相缠绕—中间纤维第95页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五单体

超螺旋（平行对齐）

原纤丝（反向平行）原纤维中间纤维第96页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五动态调节通过特殊氨基酸残基（Ser，Thr）的磷酸化完成第97页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五5.功能（1）为细胞提供机械支持第98页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五（2）维持细胞和组织的完整性细胞完整性：核纤层核外周组织完整性：细胞-细胞细胞-基质（3）参与DNA复制（4）与细胞分化及生存有关第99页，共102页，2022年，5月20日，23点29分，星期五微丝

单体：肌动蛋白

组装：成核期

—三聚体（限速期）

生长期

—聚合﹥解聚

平衡期

—聚合=解聚

结合蛋白：肌球蛋白头部

尾部

功能：维持细胞形态微绒毛(肌动蛋白）

微穗

(肌动蛋白）

应力纤维

(肌动蛋