循环肿瘤细胞临床应用及技术讲解课件

循环肿瘤细胞(CTCs)的临床应用CirculatingTumorCells益善医学检验所益善生物技术股份公司程振治疗手段手术观察±辅助治疗全身治疗问题相同TNM分期不同预后潜在微转移灶维持or调整肿瘤基因变化实时样本障碍挑战精准预后判断复发转移预警及早疗效评价实时样本获得肿瘤治疗的问题与挑战原发肿瘤局部寡转移广泛转移我们需要找到一种更能准确代表肿瘤的标志，实时监测，全面有效的获取肿瘤信息！常规诊断手段提示肿瘤信息技术应用不足影像学解剖学信息代谢信息肿瘤大小与肿瘤的恶性程度与侵润转移能力不完全一致，信息获取存在滞后性，因辐射等原因不能作为实时监测手段血清学肿瘤标志物信息间接反应肿瘤治疗状态，不能直接提供肿瘤进展信息，与生理病理相关性差，特异性不足病理学生物学信息直接反应肿瘤细胞学和分子生物学特性，但因取材困难，不能作为实时监测手段临床需要更实时、更特异的肿瘤监测手段CancerRes.2003;63:3805-11.BreastCancerRes.2009;11:R46.AmJPathol.2011;178:989-96.循环肿瘤细胞（CTCs）1869年AustMedJ，Ashworth最早在转移性癌症患者血液中观察到；存在于外周循环的各类肿瘤细胞统称；来自原发灶、转移灶或不明部位。大多数CTCs在外周血循环中会发生凋亡，只有少数CTCs才能够形成转移CancerLetters.2007,253:180–204.CTCs与肿瘤转移CTCs的特点稀少

约1个CTC/109

（10亿）个血细胞，1个CTC/106-7个白细胞。型别差异

CTCs可以是间质型、上皮型、上皮间质混合型、成团的CTC(CTM)CTCs-新型“液体活检”BreastCancer：NEnglJMed351:781-791,2004ProstateCancer:LancetOncol10:233-239,2009ColorectalCancer:JClinOncol26:3213-3221,2008CTCs临床应用一：评估预后治疗前一个周期后NEnglJMed2004;351:781-91.10对于原发性肺癌患者，CTCs计数在有远处转移的肺癌患者中有显著升高，相关性优于CEA。CTCs临床应用二：评估复发转移ClinCancerRes2009;15(22)45-male-ESCC（食管鳞状细胞癌）12w，CT-骨和皮下转移104w，PET-CT显示复发CTC可动态监测肿瘤复发转移风险，及早发出肿瘤转移复发预警，结合血清标志物，能更准确预测疾病进展。WorldJGastroenterol.2015,21(25):7921-8.CTCs临床应用二：动态监测复发转移CTCs临床应用三：CTCs计数与疗效监测化疗后CTC数量减少患者的临床疗效好于CTCs数量增加的患者化疗前后CTC的数量变化反映临床疗效化疗前化疗后JClinOncol.2011

Apr20;29(12):1556-63.

JClinOncol2008;26:3213-3221.前列腺癌中CTCs检测的疗效评估价值优于PSACTCs检测的临床应用循环肿瘤微栓子(CTM)HuiLetal.,PLosone,2013.

循环肿瘤微栓子又称循环肿瘤细胞团，一般由3个及以上肿瘤细胞组成。CTM与预后评估J

ClinOncol.2012;30:525-32.CTCs检测的临床应用CTCs分型—更精确地评估疗效YuMetal.,Science,2013,339:580-584.CTCs表型转换与病情进展相关YuMetal.,Science,2013,339:580-584.CTC指导实时个体化治疗CTCs用于检测EGFR突变NEnglJMed2008;359:366-77.sensitivity:96%,specificity:100%CTCs用于检测肺癌ALK重排JClinOncol2013;31:2273-81.

9位患者，原发灶为HER2扩增阴性，疾病进展之后检测CTC发现HER2扩增阳性，对其中4位采取含赫赛汀治疗方案，3位患者疾病缓解。CTCs检测追踪乳腺癌患者HER2扩增状态PNAS.2004;101:9393-8.小结个体化治疗时代肿瘤实时监测的实现

需要突破性技术对CTCs进行分离、分型和分析，将肿瘤状态实时监测和肿瘤个体化治疗有机结合。对肿瘤复发、转移、疗效评估的预测影响

CTCs的作为肿瘤转移的种子，有望综合反映肿瘤的实时动态，通过跟踪血液中CTCs数量和型别的变化，监测肿瘤动态、评估治疗效果。对实时个体化治疗的影响

CTCs的分子分析，有望综合反映肿瘤分子病理学背景，实时提供肿瘤分子信息，推进肿瘤实时的个体化治疗。怎样的CTCs检测技术能够满足需求？免疫捕获法借助上皮细胞标志物EPCAM的表达进行CTC直接捕获；EpCAM的表达存在差异，常导致检测假阴性；会漏检更容易在外周血中存活的EMTCTC和CTM；捕获CTC时，已损坏细胞，不适于蛋白、基因等后续分析。经典的一代CTC检测技术原理先分离后鉴定，采用上皮+间质标志物进行鉴定，不同表型的CTC均能检出。

技术原理分离鉴定

二代检测技术参数CTCs截留率﹥80%；特异性﹥90%；灵敏度

=1个/5ml

：高度自动化的识别扫描系统6层扫描，15分钟完成一次读片以8片为一个单位，自动进片自动识别，人工判读，8个样本自动处理10个荧光通道，可同步满足内部质控和科研目标CanPatrolTM—CTCs精准分型

：CTC捕获数据CanPatrolTM—CTCs系统深入分析CanPatrolTM_CTCs全基因组测序CanPatrolTM_基因突变检测CanPatrolTM_基因扩增检测