2023届广西南宁市外国语学校高三第三次测评生物试卷（含答案解析）

2023学年高考生物模拟试卷考生请注意：1．答题前请将考场、试室号、座位号、考生号、姓名写在试卷密封线内，不得在试卷上作任何标记。2．第一部分选择题每小题选出答案后，需将答案写在试卷指定的括号内，第二部分非选择题答案写在试卷题目指定的位置上。3．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．质子泵在泵出H+时造成膜两侧的质子浓度差为阴离子的跨膜运输提供了驱动力。下图为某植物根细胞通过质子泵吸收H2PO4-和NO3-的示意图，下列说法正确的是（）A．运输H2PO4-和NO3-的载体蛋白的空间结构相同B．抑制细胞呼吸不会影响H2PO4-和NO3-的跨膜运输C．质子泵同时具有酶的功能和载体蛋白的功能D．图中离子的运输方式和根细胞吸收水的方式相同2．下列有关生物学知识的叙述中，正确的有几项（）①生物膜系统包括叶绿体类囊体薄膜，也包括视网膜、口腔粘膜等②染色体结构变异一定发生了片段断裂③用适宜浓度的生长素处理未授粉的番茄雌蕊柱头，得到无子番茄果实细胞中染色体数目比受精卵染色体数目多一倍④神经纤维处于静息状态时，由于膜主要对K+有通透性，造成K+外流，使膜外K+浓度高于膜内⑤减数第二次分裂过程中，染色体不再复制，但每条染色体的着丝点会一分为二⑥位于常染色体的一对同源染色体上相同位置的基因控制同一种性状A．两项 B．三项 C．四项 D．五项3．下列生物学实验中，需要用到染色剂和显微镜的实验是（）①观察DNA和RNA在细胞中的分布②观察叶肉细胞中的叶绿体③观察口腔上皮细胞中的线粒体④观察根尖分生组织细胞的有丝分裂⑤探究紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞的吸水和失水A．①②③⑤ B．①③④ C．②④⑤ D．②③④⑤4．下列关于蛋白质或肽链的叙述，错误的是（）A．肽链间差异的原因之一是肽链的空间结构不同B．用双缩脲试剂检测蛋白质或多肽的结果呈紫色C．多条肽链组成蛋白质分子时可通过“S-S-”相连D．蛋白质表现特有的生物活性要有正确的三维结构5．在大肠杆菌的培养与分离实验中，下列相关操作正确的是（）A．在LB固体培养基配制过程中，为防止杂菌污染，需要利用无菌水进行配制B．实验中所需的棉花应使用脱脂棉，因为脱脂棉不易吸水，可以防止杂菌污染C．灭菌后，通常将实验用具放入40~50℃烘箱中烘干，以除去灭菌时的水分D．倒平板应在无菌超净台进行，将培养基倒入培养皿后先置于水平桌面上，再晃动6．下图所示的家系中，5、8号均患有甲病。7号怀孕期间进行羊水染色体核型分析，发现9号患有Turner综合征（染色体组成为45，X）。在不发生其他突变及不考虑其他基因的情况下，有关叙述错误的是（）A．第Ⅱ代6、7号基因型相同的概率为5/9B．第Ⅲ代9号患甲病的概率为1/6C．9号患Turner综合征与祖父母、外祖父母均无关D．进行羊水检测可在一定程度上预防遗传病的发生二、综合题：本大题共4小题7．（9分）杂交水稻具有重要的经济价值。我国科研人员对杂交稻的无融合生殖（不发生雌、雄配子的细胞核融合而产生种子的一种无性繁殖过程）进行了研究。（1）水稻的杂交种在生活力、抗逆性、适应性和产量等方面优于双亲，但由于杂种后代会发生_______，无法保持其杂种优势，因此需要每年制种用于生产。（2）有两个基因控制水稻无融合生殖过程：含基因A的植株形成雌配子时，减数第一次分裂异常，导致雌配子染色体数目加倍；含基因P的植株产生的雌配子不经过受精作用，直接发育成个体。雄配子的发育不受基因A、P的影响。人们曾用图1所示杂交方案，获得无融合生殖的个体。①若Ⅱ自交，所结种子的胚的基因型为_________。若Ⅲ自交，所结种子的胚的染色体组数为_______。②理论上，Ⅳ作为母本能使子代__________。（3）由于上述无融合生殖技术还存在不足，我国科研人员尝试利用CRISPR/Cas基因编辑技术敲除杂种水稻的4个相关基因，实现了杂种的无融合生殖（如图2所示）。①CRISPR/Cas基因编辑技术中使用的Cas核酸酶可以实现对DNA分子的定点切割，该酶切断的化学键是________。a.氢键b.肽键c.磷酸二酯键d.高能磷酸键②请在上边的框内绘制未敲除基因的杂种水稻自交繁殖所产生子代的染色体组成。_____③据图分析，科研人员利用基因编辑技术敲除的4个基因在实现无融合生殖过程中的作用是_______。（4）无融合技术应用于作物育种，可以使杂种通过无性繁殖得以保持杂种优势，但也会导致________多样性降低，应对杂草入侵或病毒侵害的能力降低，因而也藏有生态隐患。（5）有人说“科学技术是一把双刃剑，应当审慎地使用基因编辑技术。”请你谈谈基因编辑技术可能带来的影响。_____8．（10分）植物细胞工程包括植物组织培养和植物体细胞杂交等技术，植物组织培养是克隆植物的一种方法。请回答相关问题：（1）植物组织培养依据的生物学原理是________________。在一定的营养和激素等条件下，植物细胞可以脱分化形成__________，将其转接到含有生长素、________等激素的培养基上，就可以诱导其再分化成胚状体或丛芽。（2）在植物的组织培养过程中，培养细胞一直处于不断____________的状态，容易受到培养条件和外界压力的影向而发生___________。所以在植物组织培养过程中需要将培养细胞放在植物生长和繁殖的最适条件下，否则在光学显微镜下可观察到发生___________变异的细胞，进而使植株出现遗传不稳定或不育的现象。（3）科学家利用植物组织培养技术与基因工程技术结合的方法培育出抗虫棉。但由于抗虫基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，有时候会出现一些意想不到的结果。因此，需检测抗虫棉的抗虫特性，除进行__________水平的检测外，还需要进行_______水平的检测。9．（10分）艾滋病药物能治疗新型冠状病毒肺炎吗?国家卫健委新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第七版）中提供了用于一般治疗的抗病毒药物，其中洛匹那韦/利托那韦是原本用于艾滋病治疗的药物。为什么治疗艾滋病的药物能治疗新型冠状病毒引起的肺炎?HIV病毒和新型冠状病毒都具有包膜，包膜上有侵染宿主细胞所必需的蛋白质，其中，新型冠状病毒包膜上的S蛋白能识别并结合呼吸道上皮细胞表面的受体血管紧张素转化酶2（ACE2），HIV病毒包膜上的gp120在宿主细地T细胞表面的受体则是CO4蛋白。HIV病毒和新型冠状病毒的遗传物质均为RNA，但两种病毒进入宿主细胞后所经历的生化历程不尽相同。HIV病毒侵入宿主细胞后经过逆转录—整合—转录—翻译—装配的过程，最终出芽释放。其中，翻译时会先表达出一个多聚蛋白，该多聚蛋白在一种HIV蛋白酶的催化下被剪切成多个有功能的蛋白质。而新型冠状病毒侵入宿主细胞后，其RNA可以直接作为模板进行翻译，翻译时产生的多聚蛋白也需要在其自身蛋白酶的催化下进行剪切以形成RNA复制酶等有功能的蛋白质。随后，新型冠状病毒RNA在RNA复制酶的催化下进行复制，与转录、翻译所得的其他成分装配后释放。洛匹那韦/利托那韦的作用对象正是这种HIV蛋白酶。它们与HIV蛋白酶的活性中心结合进而抑制其活性。冠状病毒切割多聚蛋白的主要蛋白酶是3CLPro，研究者通过分子动力学模拟的方法发现洛匹那韦/利托那韦能与SARS病毒的3CLPro活性中心结合。而SARS病毒和新型冠状病毒的3CLPro蛋白氨基酸序列一致性达96%。此前洛匹那韦/利托那韦在SARS治疗中也表现出一定的有效性，但在新型冠状病毒肺炎中使用洛匹那韦/利托那韦仍需谨慎乐观，其疗效和疗效仍需更多的实验研究和临床数据支持。（1）请写出构成新型冠状病毒遗传物质基本单位的中文名称_______________________。（2）据文中信息，两种病毒宿主细胞不同的原因是________________________。（3）据文中信息，洛匹那韦/利托那韦可能用于治疗新型冠状病毒的原因是什么？用这两种药物治疗新型冠状病毒的局限性体现在哪？______________________________________。（4）治疗艾滋病还有其他几种药物，如AZT和雷特格韦，它们作用的对象分别是HIV的逆转录酶和整合酶，请问AZT和雷特格韦能否用于治疗新型冠状病毒肺炎，请做出判断并阐述理由________________________________。（5）根据文中信息，新型冠状病毒治疗药物还有哪些其他可能的研发思路?请写出一种。_____________________________________10．（10分）蜘蛛丝是自然界中机械性能最好的天然蛋白纤维，其强度高于制作防弹衣的凯夫拉纤维，有广泛的应用前景，但如何大量获取蜘蛛丝纤维的问题一直未解决。近期，中国科学家利用基因工程技术成功的在家蚕丝腺细胞中大量表达蜘蛛丝蛋白。（1）在转基因过程中，若利用图所示质粒构建基因表达载体，需要用_____________酶来切割目的基因，该切割方法的优点是_____________________________________________(答出一点即可)。（2）为获取大量的蜘蛛丝基因，常采用_______________技术对该基因进行扩增。扩增蜘蛛丝基因前，需根据目的基因的核苷酸序列设计__________种引物。进行扩增时需先加热至90～95℃，加入引物后冷却至55~60℃，以上调控温度操作的目的是____________________。（3）载体中的启动子是____________酶的识别结合位点，以便于驱动遗传信息的表达过程；而载体本身的扩增，需借助于载体上的_________________；载体上的标记基因的作用是_____________________________。（4）研究人员发现若将蛛丝蛋白31号位的色氨酸替换为酪氨酸，蛛丝韧性可提高50％，这项成果用到的生物工程技术为____________________________。11．（15分）抚州梦湖景区是集防洪排涝、休闲娱乐、旅游商业和景观绿化为一体的大型综合性水利工程。梦湖里长有芦苇、水毛茛等植物，湖的周边各类灌木和草地上穿插着香樟、石楠、桂花、银杏等植物。近些年房地产开发力度较大，周边居民增多，部分生活污水流入了湖泊。（1）梦湖景区可称为一个生态系统，生态系统是指_________________________。（2）流经梦湖生态系统的总能量是_________________________________。（3）梦湖与凤岗河一道形成一湾清水，在城中环绕，营造了“清波荡漾拂人醉，一城人家半城碧”的美妙景色，令人流连忘返，这体现了生物多样性的________价值。湖中鳙鱼体色有差异，体现了生物多样性中的______________多样性。（4）图为该生态系统的能量金字塔图，其中A、B、C、D、E分别代表不同营养级的生物。图中具有捕食和竞争关系的生物是_____________。在自然界中，一般情况下生物B的种群数量比生物E的多，从生态系统的能量流动特点分析，原因是______________。

2023学年模拟测试卷参考答案（含详细解析）一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、C【答案解析】

由图可知，质子泵在泵出H+时需要消耗能量，为主动运输，而同时利用膜两侧的质子浓度差为阴离子的跨膜运输提供了驱动力，说明质子泵吸收H2PO4-和NO3-所需要的能量来自膜两侧的质子浓度差，为主动运输的方式。【题目详解】A、运输H2PO4-和NO3-的载体蛋白种类不相同，所以二者的空间结构存在差异，A错误；B、质子泵在泵出H+时需要消耗ATP，而质子泵吸收H2PO4-和NO3-所需要的能量来自膜两侧的质子浓度差，所以抑制细胞呼吸会影响H+运输，使膜两侧的质子浓度差变小，进而影响H2PO4-和NO3-的跨膜运输，B错误；C、质子泵能够水解ATP，具有ATP水解酶的功能，同时也可以运输H+，具有载体蛋白的功能，C正确；D、题图中离子的运输方式为主动运输，而水的运输方式为自由扩散，两种运输方式不同，D错误。故选C。【答案点睛】本题主要考查物质的跨膜运输，意在考查考生能理解题意，判断不同物质的运输方式。2、B【答案解析】

1、生物膜系统主要由细胞膜、细胞器膜和核膜组成。2、染色体结构变异包括缺失、重复、倒位、易位。3、适宜浓度的生长素处理未授粉的番茄雌蕊柱头，遗传物质没有发生改变，属于不可遗传变异。【题目详解】①生物膜系统主要包括细胞膜、细胞器膜、核膜，不包括视网膜、口腔粘膜等，①错误；②染色体结构变异包括缺失、重复、倒位、易位，都发生了片段断裂，②正确；③用适宜浓度的生长素处理未授粉的番茄雌蕊柱头，遗传物质没有发生改变，得到无子番茄果实细胞中染色体数目与受精卵染色体数目相同，③错误；④神经纤维处于静息状态时，由于膜主要对K+有通透性，造成K+外流，但膜内K+浓度仍高于膜外，④错误；⑤减数第二次分裂过程中，染色体不再复制，但在后期每条染色体的着丝点会一分为二，⑤正确；⑥位于常染色体的一对同源染色体上相同位置的基因属于相同基因或等位基因，控制同一种性状，⑥正确。综上②⑤⑥共三项正确，B正确，ACD错误，故选B。3、B【答案解析】

本题是高中教材实验中，实验工具和是否需要染色的考查，先回忆相关实验的实验原理，然后结合选项分析解答。【题目详解】①DNA和RNA本身没有颜色，不容易观察，要用甲基绿和吡罗红染液进行染色，同时需要用显微镜观察细胞，①正确；②叶绿体本身含有颜色，不需要染色，②错误；③观察细胞中的线粒体需要用健那绿染色，同时需要用显微镜观察，③正确；④观察根尖分生组织细胞的有丝分裂需要用碱性染料对染色体染色，同时需要用显微镜观察，④正确；⑤紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞有色素，不需要进行染色，⑤错误。综上正确的选项有①③④，故选B。4、A【答案解析】

不同的多肽，它们的差别在于组成它们的氨基酸的种类、数量和排列顺序的不同，20种氨基酸任意组成的多肽种类实在是数不胜数，假定20种氨基酸任意组成一个含100个氨基酸分子的多肽，就将有20100种多肽，即便每种多肽各有一个分子，其质量总和便可与地球质量相比。蛋白质分子可由一条或几条多肽链组成，每一种蛋白质都有其独特的空间结构，正确的三维结构是蛋白质表现其特有的生物学活性所必需的，蛋白质分子的空间结构有多种，蛋白质分子的空间结构并不稳定，会随温度的升高发生改变，并且空间结构一旦发生不可逆的改变，便会失去生物学活性，这种现象就是蛋白质的热变性。【题目详解】A、不同的多肽，它们的差别在于组成它们的氨基酸的种类、数量和排列顺序的不同，A错误；B、用双缩脲试剂能与蛋白质或多肽发生紫色反应，B正确；C、多条肽链组成蛋白质分子往往可通过R基之间形成的“S-S-”相连，C正确；D、由分析可知，正确的三维结构是蛋白质表现特有的生物活性所必须的，D正确。故选A。5、D【答案解析】

大肠杆菌培养过程中应保持无菌，所有操作都应注意无菌操作。【题目详解】A、LB培养基配置完成后需要灭菌，因此在配置过程中无需用无菌水，A错误；B、脱脂棉易吸水，容易引起杂菌污染，实验中所需棉花不应使用脱脂棉，B错误；C、灭菌后，通常将实验用具放入60-80℃烘干箱中烘干，C错误；D、倒平板应在无菌超净台进行，倒完平板应先置于水平桌面上，再晃动，D正确。故选D。【答案点睛】本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生识记培养基的成分以及制备方法，识记无菌技术的主要内容，同时要求考生具有一定的实验技能。6、B【答案解析】

分析题中家系谱图：由于1号正常，5号患甲病，所以可以推定甲病为常染色体隐性遗传病（“无不生有为隐性，父正女病非伴性”）。【题目详解】A、由于5、8号均患甲病而父母均不患病，说明甲病为隐性基因控制，又由于5号为女性，所以甲病为常染色体隐性遗传。如果用A/a基因来表示则第Ⅱ代6、7号基因型是AA或者Aa，二者基因型相同的概率为，A正确；B、由于6、7号基因型都是AA、Aa，所以9号的基因型aa=，患甲病的概率为，B错误；C、由于Turner综合征为染色体异常遗传病，6、7号正常，因此9号染色体异常与1~4号无关，是其父母产生了异常配子所致，C正确；D、进行羊水检测时如发现胎儿有重大疾病，可终止妊娠，在一定程度上预防了遗传病的发生，D正确。故选B。二、综合题：本大题共4小题7、性状分离aP或ap3保持母本基因型c使减数分裂变成有丝分裂（或“不出现基因重组、配子染色体数目加倍”）；受精后，父本来源的染色体消失基因（或“遗传”）有利方面：疾病治疗、作物改良、酶的结构改造提高工业生产效率潜在风险：技术上存在隐患，例如脱靶（误切割）带来的新的未知基因突变；使原有基因组改变，导致基因间相互作用关系的改变。【答案解析】

根据题意分析可知，CRISPR/Cas9系统基因编辑技术是利用该基因表达系统中的引导RNA能识别并结合特定的DNA序列，从而引导Cas9蛋白结合到相应位置并剪切DNA，最终实现对靶基因序列的编辑。【题目详解】（1）表现出优良性状的杂交后代不一定就有杂种优势，如显性杂合子，其自交后代会发生性状分离，无法保持其杂种优势，因此需要每年制种用于生产。（2）由题意知，若Ⅱ自交，含基因P的植株产生的雌配子不经过受精作用，直接发育成个体，aaPp作母本产生的雌配子基因型为aP或ap，直接发育成个体所结种子的胚的基因型为aP或ap。若Ⅲ自交，Aapp作父本，产生雄配子的基因型为Ap、ap，Aapp作母本，由题意知，含基因A的植株形成雌配子时，减数第一次分裂异常，导致雌配子染色体数目加倍，产生雌配子的基因型为Aapp。受精作用后所结种子的胚的染色体组数为3组。Ⅳ作为母本，A保证产生雌配子的基因型为AaPp，P保证雌配子AaPp不经过受精作用，直接发育成个体，使子代保持母本基因型AaPp。（3）Cas核酸酶切断的化学键磷酸二酯键。未敲除基因的杂种水稻自交繁殖所产生子代的染色体组成图示如下：据图分析，科研人员利用基因编辑技术敲除的4个基因在实现无融合生殖过程中的作用是使减数分裂变成有丝分裂（或“不出现基因重组、配子染色体数目加倍”）；受精后，父本来源的染色体消失。（4）无融合技术应用于作物育种，可以使杂种通过无性繁殖得以保持杂种优势，但也会导致基因多样性降低，藏有生态隐患。（5）基因编辑技术的有利方面：疾病治疗、作物改良、酶的结构改造提高工业生产效率。基因编辑技术的潜在风险：技术上存在隐患，例如脱靶（误切割）带来的新的未知基因突变；使原有基因组改变，导致基因间相互作用关系的改变等。【答案点睛】本题以科技前沿技术无融合繁殖技术和基因编辑技术，考查杂交优势、异常减数分裂和基因工程等相关知识，意在考查考生的理解所学知识要点和获取题目信息的能力，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题和探究问题的能力。8、植物细胞的全能性愈伤组织细胞分裂素分生突变染色体结构或数目分子个体生物学【答案解析】

植物细胞工程的概念和操作过程是：培养植物细胞（包括原生质体），借助基因工程方法，将外源性物质（DNA）导入受体细胞（包括原生质体）中，或通过细胞融合、显微注射等将不同来源的遗传物质重新组合，再通过对这些转基因细胞或重组细胞进行培养，获得具有特定性状的新植株。植物克隆的技术基础是植物组织培养，植物细胞工程的原理是植物细胞全能性。植物细胞全能性的基本含义是：植物体的每个生活细胞都具有遗传上的全能性，因而都具有发育成完整植株的潜能。【题目详解】（1）植物组织培养依据的生物学原理是植物细胞的全能性。植物组织培养的过程：在一定的营养和激素等条件下，植物细胞可以脱分化形成愈伤组织，将愈伤组织转接到含有生长素和细胞分裂素成分的培养基上，就可以诱导其再分化生成胚状体或丛芽。（2）在植物的组织培养过程中，培养细胞一直处于不断分生的状态，容易受到培养条件和外界压力的影响而发生突变。突变包括基因突变和染色体变异，其中只有染色体数目变异或结构变异可以在光学显微镜下观察到。（3）检测抗虫棉的抗虫特性，除进行分子水平的检测外，还需要进行个体生物学水平的检测。【答案点睛】植物细胞工程的应用非常多，也是常见的考点，本题还讲植物细胞工程和基因工程联系在一起进行考查，学习时应注意章节前后的联系。9、胞嘧啶核糖核苷酸、尿嘧啶核糖核苷酸、鸟嘌呤核糖核苷酸、腺嘌呤核糖核苷酸两种病毒表面的配体蛋白不同，特异性结合的宿主细胞表面受体蛋白也不同，因此侵染的宿主细胞不同原因：抑制新型冠状病毒的3CLPro蛋白酶活性局限性：这两种药物并不是为新型冠状病毒的3CLPro量身定做的抑制剂。在亲和力和特异性上肯定不是最佳不能，因为新型冠状病毒不是逆转录病毒，不具有逆转录酶和整合酶比如，可以抑制病毒与细胞结合，或者抑制胞吞，抑制装配或释放等【答案解析】

1、中心法则的图解：。2、HIV病毒的结构：HIV是RNA病毒，由RNA和蛋白质外壳组成，HIV没有细胞结构，必需寄生在T细胞中才能生存。3、新型冠状病毒侵入宿主细胞后，其RNA可以直接作为模板进行翻译，翻译时产生的多聚蛋白也需要在其自身蛋白酶的催化下进行剪切以形成RNA复制酶等有功能的蛋白质。随后，新型冠状病毒RNA在RNA复制酶的催化下进行复制，与转录、翻译所得的其他成分装配后释放。说明新型冠状病毒为RNA复制病毒。【题目详解】（1）新型冠状病毒的遗传物质为RNA，组成RNA的基本单位是胞嘧啶核糖核苷酸、尿嘧啶核糖核苷酸、鸟嘌呤核糖核苷酸、腺嘌呤核糖核苷酸。（2）由题意可知，两种病毒表面的配体蛋白不同，特异性结合的宿主细胞表面受体蛋白也不同，因此侵染的宿主细胞不同。（3）由题干信息：“洛匹那韦/利托那韦能与SARS病毒的3CLPro活性中心结合。而SARS病毒和新型冠状病毒的3CLPro蛋白氨基酸序列一致性达96%。”可知，洛匹那韦/利托那韦可能通过抑制新型冠状病毒的3CLPro蛋白酶活性治疗新型冠状病毒肺炎。但由于这两种药物并不是为新型冠状病毒的3CLPro量身定做的抑制剂，在亲和力和特异性上肯定不是最佳。（4）由题干信息：“新型冠状病毒侵入宿主细胞后，其RNA可以直接作为模板进行翻译”，不经过逆转录过程，即不存在逆转录酶和整合酶，所以AZT和雷特格韦不能用于治疗新型冠状病毒肺炎。（5）研发新型冠状病毒治疗药物的思路就是想办法不让病毒进入宿主细胞或想办法抑制其在细胞内增殖，比如可以抑制病毒与细胞结合，或者抑制细胞胞吞，抑制其在宿主细胞内的装配或释放等。【答案点睛】本题以“2019-nCoV”为载体，主要考查病毒的特点、遗传信息的传递等相关知识，目的考查学生对基础知识的理解与掌握，能够结合背景材料分析问题，得出结论。10、XbaI和SacI防止目的基因自身环化、防止目的基因反向连接PCR2使DNA解链，然后使引物结合到互补DNA链上RNA聚合酶复制原点重组DNA的鉴别与选择蛋白质工程【答案解析】

1、基因工程的操作步骤包括：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。其中基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤。基因表达载体的构建：①过程：一般用同一种限制酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。②目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。③基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。（1）启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；（2）终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；（3）标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。2、PCR扩增技术：PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：（1）模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备。（2）模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。（3）引物的延伸：DNA模板--引物结合物在Taq酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。【题目详解】（1）识图分析可知，构建基因表达载体时，目的基因需要插入到启动子和终止子之间，图中启动子和终止子之间存在XbaI和SacI的酶切位点，因此需要用XbaI和SacI限制酶切割目的基因，以产生与质粒相同的末端