化学发光免疫技术与时间分辨技术异同点

化学发光免疫技术与时间分辨技术的异同点化学发光免疫技术与时间分辨技术的异同点4/4化学发光免疫技术与时间分辨技术的异同点化学发光免疫技术与时间分辨技术的异同点看法化学发光免疫解析(chemiluminescenceimmunoassay,CLIA),是将拥有高矫捷度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测解析技术。是继放免解析、酶免解析、荧光免疫解析和时间分辨荧光免疫解析此后发展起来的一项最新免疫测定技术。时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）是以镧系元素标志抗原或抗体，并与时间分辨测定技术结合而建立起来的一种新式非放射性微量免疫解析技术，它依照镧系元素螯合物的发光特点，用时间分辨技术测量荧光，同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨，可有效地消除非特异荧光的搅乱，极大地提高了解析矫捷度。原理化学发光免疫解析包含两个部分,即免疫反应系统和化学发光解析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到牢固的基态时,同时发射出光子(hM),利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体)直接标志在抗原(化学发光免疫解析)或抗体(免疫化学发光解析)上,或酶作用于发光底物。鲁米诺(1umino1)、异鲁米诺(isolumino1)及其衍生物、吖啶酯(acIidinimester)衍生物、辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase，HRP)和碱性磷酸酶(alkalinephosphatase，ALP)是目前CLIA中使用最多的四类标志物。时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）基根源理用三价稀土离子及其鳌合剂作为示踪物，代替荧光物质、同位素或酶，标记蛋白质、激素、抗原、抗体、核酸探针等物质，当免疫反应系统发生后，依照稀土离子螯合物的荧光光谱的特点，用时间分辨荧光解析仪测定免疫反应最后产物中荧光强度。依照荧光强度或相对荧光强度比值，来判断反应系统中解析物的浓度，达到定量解析之目的。应用化学发光免疫解析技术（CLIA）各种激素、病毒抗原抗体、肿瘤标志物、感染性疾病、心脏标志物、治疗药物检测等各种抗原、抗体和半抗原时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）应用广泛多肽类：蛋白质、激素（甲状腺激素、甾体类激素）。2.病原体抗原/抗体3.病毒性肝炎标志物4.肿瘤相关抗原5.药物6.核酸优缺点优点化学发光免疫解析法（CLIA）单个样本检测速度快，适合做急诊；矫捷度较高；自动化程度高；时间分辨荧光免疫技术（TRFIA）发射光和激发光有较大的STOKES位移——高特异性长寿命荧光，降低其他物质的荧光搅乱——高矫捷度半衰期长达几十万年，试剂受搅乱小——高牢固性荧光寿命长，易于自动化重复性好标准曲线范围宽结果可靠与其他技术的相对优势：（1）、是现有的免疫检测方法中矫捷度最高的（2）、是现有的免疫检测方法中牢固性最好的（3）、多标志检测是目前所有免疫检测技术中独一无二的缺点化学发光免疫解析法（CLIA）发光过程短本底较高仪器故障率较高试剂牢固性差检测精度不高试剂价格高时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）测量方式复杂仪器成本及保护花销高环境及样品中同元素可以致本底搅乱等种类原理及试剂发光种类化学发光免疫解析用化学发光物质直接标吖啶酯（CLIA）记抗原或抗体组成（acrydinumesters）时间分辨免疫荧光解析是用三价稀土离子及其铕（Eu3+）、铽（Te3+）（TRFIA）*螯合剂作为示踪物及钐（Sm3+）、镝（De3+）化学发光与时间分辨荧光方法学比较化学发光

时间分辨荧光发光效率

1%

95%重复检测不可以重复可无数次重复本底噪声搅乱大零本底矫捷级数10-1510-18标志物大分子化合物原子标志位点1个/抗体可达2