逆转录病毒课件

逆转录病毒石家庄市第五医院杨莉逆转录病毒科的病毒因带有以RNA为模板合成DNA的反转录酶而得名逆转录病毒科包括HIV、HTLV-Ⅰ和Ⅱ。第一节人类免疫缺陷病毒HIV与AIDS人类免疫缺陷病毒（humanimmunodeficiencyvirus，HIV

）属于逆转录病毒科慢病毒亚科获得性免疫缺陷综合征（acquiredimmunodeficiencysyndrome，AIDS）艾滋病即为AIDS的音译

HIV的发现西非扎伊尔首都的一家医院1959年的血样中检出HIV。1981年美国报道了首例艾滋病患者。1983年法国巴斯德研究所分离到淋巴结肿大相关病毒（LAT）。1984年美国Gallo等亦从艾滋病人中分离到相似的病毒，称为人类嗜T细胞病毒III型(HTLV-III)。1986年国际病毒分类委员会将其统一命名为HIV。

中国AIDS的流行情况自1985年中国发现首例病历后，截至到2009年年底，现有艾滋病病毒感染者和病人约74万，其中艾滋病人约10.5万。人群感染率平均为0.05％（0.04％－0.06％）。目前中国AIDS的流行趋势处于世界第14位，在亚洲排名第二位。HIV的感染者每年以40%的速度在增加，中国处于AIDS暴发流行的前沿。HIV的生物学特性电镜下的HIV

外膜核结构：核心—棒状或截头圆锥状核衣壳—20面体立体对称包膜—脂蛋白+刺突结构

外层:脂双层包膜

内层:p17内膜蛋白

核心:致密柱状核心

HIV病毒RNA逆转录酶、整合酶、蛋白酶等核衣壳蛋白p7衣壳蛋白p24

gp120：包膜表面刺突gp41：跨膜蛋白

+2、基因组结构

HIV基因组：由两条拷贝的单股正链RNA通过氢键结合而形成的二聚体。

HIV主要通过gp120与宿主细胞膜表面的相应受体CD4结合进入细胞。

吸附CD4抗原辅助受体CD4+细胞HIVgp120结合CD4/辅助受体装配成核衣壳病毒RNARNA：DNA

双链DNA双链DNA整合到宿主细胞基因组中形成前病毒RNAmRNA子代病毒的基因组子代病毒蛋白以出芽的方式释放病毒RNARNA：DNA

双链DNAHIV的释放HIV的生活周期

HIV有两型，分别为HIV-1和HIV-2。两者的结构和致病性相似。世界范围的AIDS主要由HIV-1所致，约占95%。HIV-2主要局限于西部非洲。4、分型HIV对理化因素的抵抗力不强，56℃加热30分钟或用0.5%次氯酸纳、0.1%漂白粉、70%乙醇、0.3%过氧化氢、1%戊二醛等消毒剂处理10分钟均能灭活病毒。室温（20℃-22℃）可存活7天

5、抵抗力

HIV仅感染表面有CD4受体的细胞。实验室中常用正常人T细胞分离病毒。感染病毒的细胞出现CPE。动物模型可用HIV感染恒河猴和黑猩猩。6.培养特性1.传染源其外周血、精液、阴道分泌物、乳汁、唾液、脑脊液、骨髓等标本中均可分离到病毒。a）HIV无症状携带者b）艾滋病患者

2）血液传播：医源性吸毒者2.传播途径

3）母婴传播：胎盘产道哺乳

1）性传播：STD之一同性恋异性恋3、HIV的致病特点和机理HIV感染和致病的主要特点是能选择性地侵犯表达CD4分子的细胞，引起以CD4+

细胞缺陷和功能障碍为中心的严重免疫缺陷。CD4+

细胞主要是Th细胞，也包括单核-巨噬细胞、树突状细胞、神经胶质细胞、皮肤的朗格汉斯细胞及肠道粘膜的杯状、柱状上皮细胞等少量表达CD4分子的细胞。

（1）HIV直接或间接损伤CD4+细胞；（2）HIV抑制抗原呈递细胞的功能；（3）HIV诱导的自身免疫应答及细胞凋亡；（4）HIV超抗原成分的致病作用；（5）HIV的播散；HIV的主要致病机制：

①病毒在细胞内增殖干扰细胞的正常代谢；②子代病毒出芽释放导致细胞被破坏；细胞融合被感染的CD4+

细胞gp120阳性未感染的CD4+细胞gp120阴性③融合形成多核巨细胞，其寿命明显缩短；gp120CD4细胞毒性

T细胞④特异性细胞毒效应HIV抑制抗原呈递细胞功能

HIV感染单核/巨噬细胞，可损伤其趋化、粘附、杀伤和抗原提呈能力；

受染的树突细胞抗原提呈功能下降并可将病毒传播给CD4+T细胞HIV诱导的自身免疫应答

HIVgp120和MHC-Ⅱ类分子均能与CD4分子的相同区域结合，提示这两种分子可能存在共同决定簇，因此针对HIVgp120的特异性抗体能与MHC-Ⅱ类分子发生交叉反应，破坏免疫活性细胞。HIV诱导细胞凋亡；凋亡小体受染CD4+细胞HIV超抗原成分的致病作用

HIV基因编码产物有超抗原样作用，其致病机制为：①作为T细胞的强活化剂，过度激活T细胞，最终导致T细胞无能反应或细胞死亡；②激活多克隆B细胞，造成B细胞功能紊乱。

HIV的播散

HIV在单核/巨噬细胞内低度增殖，并将病毒播散至其它组织。

HIV引起以CD4+细胞缺陷和功能障碍为中心的严重免疫缺陷。

（1）细胞免疫功能低下（2）体液免疫功能紊乱（3）侵犯多种组织器官

CD4+T细胞数量减少

迟发型变态反应减弱或消失；T细胞对有丝分裂原、特异性抗原、同种异体抗原的增殖反应低下；由T细胞或NK细胞引起的细胞毒性反应降低健康人外周血中CD4+T细胞数量为1000个/ml，晚期AIDS患者则在100个/ml以下。当CD4+细胞下降到每毫升200个以下时，病毒的滴度迅速升高，机体的免疫应答出现崩溃。体液免疫功能紊乱

在疾病早期由于B细胞的多克隆性激活可出现高免疫球蛋白血症、多种自身抗体产生、CIC形成。随着病情的发展，抗体的产生能力下降。

通过感染单核-巨噬细胞、树突状细胞、神经胶质细胞、皮肤的朗格汉斯细胞及肠道粘膜的杯状、柱状上皮细胞等少量表达CD4分子的细胞，HIV被播散到全身，引起中枢神经系统、肺、肠及其它器官感染致病。侵犯多种组织器官4、HIV感染的临床特点

急性期

无症状期

艾滋病期

此时感染者血清中出现HIV抗原;急性期患者在感染后2-4周出现发热、咽炎、肌肉痛、关节痛、淋巴结肿大、皮肤斑丘疹和粘膜溃疡等自限性症状。

大多数病人临床症状轻微，持续1-3周后缓解

无症状期感染者无明显症状；外周血中HIV抗原含量很低或检测不到;少量病毒在细胞内低水平持续复制，大部分HIV以前病毒的形式整合于宿主细胞的染色体内；持续8至10年，时间长短与感染病毒的数量、型别、感染途径，机体免疫状况的个体差异，营养条件及生活习惯等因素有关。

患者出现发热、盗汗、疲倦、慢性腹泻和持续性淋巴结肿大等症状。艾滋病期

当机体受到某些因素激发，HIV在细胞内大量复制并造成免疫系统进行性损害；

病人CD4+T淋巴细胞计数明显下降，多<200个/mm3，HIV血浆病毒载量明显升高典型的AIDS有三大临床表现：

①机会感染②恶性肿瘤的发生③神经系统异常不加干预，2年内死亡机会感染是AIDS患者死亡的重要原因之一；涉及细菌、病毒、真菌和寄生虫等病原体，以卡氏肺囊虫、白色念珠菌、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、肝炎病毒、隐球菌、鼠弓形体等常见。卡氏肺囊虫在肺的外部产生隆起性钙化，形状象粗糙的肾脏在AIDS患者中念珠菌属感染是很常见的,象鹅口疮（上图）尽管不危及生命但十分讨厌.播散性感染是少见的,左图为念珠菌性肺炎，其类似于细菌性支气管肺炎.恶性肿瘤的发生

如kaposi肉瘤和B细胞淋巴瘤等恶性肿瘤。艾滋病病人与卡波氏肉瘤上腭

下腭神经系统异常

约有1/3的AIDS患者出现中枢神经系统疾病，如艾滋病痴呆综合征，表现为记忆衰退、精神淡漠、性格改变、头痛、癫痫、痴呆等症状。5、机体对病毒的免疫力

感染过程中机体可以产生多种抗体和细胞免疫，但不足以清除病毒。微生物学检验一、HIV病毒成分检测1、HIV-1P24抗原检测

一般用ELISA双抗体夹心法病毒感染的急性期出现，潜伏期常为阴性，病情发展至艾滋病症状出现时又可检出。

用于“窗口期”及HIV-1抗体阳性母亲所生婴儿早期的辅助鉴别诊断。用于HIV-1抗体检测结果不确定或HIV-1抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性，但HIV-1抗体确认阴性的辅助诊断。2、HIV核酸检测敏感度20～50copy/ml

包括定性检测和定量检测，可用于HIV感染的辅助诊断、病程监控、指导治疗方案及疗效判定、预测疾病进展。检测方法：反转录PCR实验（RT-PCR)

核酸序列扩增实验（NASBA)

分支DNA杂交试验（bDNA）检测阴性，不排除HIV感染检测阳性，为诊断HIV感染的辅助指标二、病毒分离培养因分离需要在P3实验室进行，实验条件及技术要求较高，目前多用于科学研究三、抗体检测筛查试验：ELISA是快速检测HIV抗体的标准方法。确认试验：目前免疫印记实验最常用四、CD4+T淋巴细胞检测

目前检测CD4+T淋巴细胞数的标准方法为应用流式细胞仪技术检测，可得出CD4+T淋巴细胞的绝对值及占淋巴细胞的百分率。防治原则（1）预防HIV感染综合措施（2）疫苗的研究（3）抗病毒治疗

①建立HIV感染的监测网络系统。②加强宣传教育，普及预防知识，打击卖淫、

嫖娼、贩毒及抵制吸毒等；③加强血源和移植器官的筛选与管理；④加强国境检疫等。

（1）预防HIV感染的综合措施

尚未获得理想的疫苗，在疫苗研究中遇到的最大难题仍然是HIV包膜的高度变异性，目前的研究主要有以下几方面：基因工程疫苗人工合成疫苗重组活疫苗

HIV突变株疫苗

由于HIV病毒株快速变异，使获得具有广泛保护性的疫苗研制变得十分困难。（2）疫苗的研制

一个病人体内病毒氨基酸序列的变化为

1-6%，变化最大的蛋白