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PAGEPAGE6植物组织培养作业1、什么是植物组织培养?答:植物组织培养,又称植物克隆,是指通过无菌操作分离植物体的一部分(接种到培养基上,在人工控制的条件下()进行培养,使其产生完整植株的过程。2、什么是"外植体"?答:外植体泛指第一次接种所使用的植物组织、器官等一切材料。如,顶芽、茎段、叶片等。3?5植株培养:对完整植株材料的培养,包括扦插苗培养和种子苗培养。实培养、种子培养。组织培养(各种组织、愈伤组织):养、薄壁组织培养、输导组织培养。非融合培养。细胞培养()养、微室培养。4、植物组织培养有哪些特点?答:植物组织培养的特点:培养条件可以人为控制生长周期短,繁殖率高管理方便,利于工厂化生产和自动化控制5、你认为植物组织培养技术在当前的农业生产上有什么价值?为什么?答:植物组织培养技术在当前农业生产上的价值及原因:快速繁殖种苗用组织培养的方法进行快速繁殖是生产上最有潜力的应用,包括花卉观赏植物、蔬菜、果树、大田作物及其他经济作物。快繁技术不受季节等条件的限制,生长周期短,而且能使不能或很难繁殖的植物进行增殖。无病毒苗的培养组织培养无病毒苗的方法已在很多作物的常规生产上得到应用,如马铃薯,甘薯,草莓,苹果,香石竹,菊花等,而且已有不少地区建立了无病毒苗的生产中心,这对于无病毒苗的培养、鉴定、繁殖、保存、利用和研究,形成了一个规范的系统程序,从而达到了保持园艺植物的优良种性和经济性状的目的。在育种上的应用植物组织培养技术为育种提供了许多手段和方法,使育种工作在新的条件下更有效的进行。主要以下几点应用:①倍性育种,缩短育种年限,杂种优势明显;②克服远缘杂交的不亲合性和不孕性(胚培养);③保存种质。4)人工种子①人工种子结构完整,体积小,便于贮藏与运输,可直接播种和机械化操作。②不受季节和环境限制,胚状体数量多、繁殖快、利于工厂化生产。③利于繁殖周期长、自交不亲和、珍贵稀有的一些植物,也可大量繁殖无病毒材料。④可在人工种子中加入抗生素、菌肥、农药等成分,提高种子活力和品质。⑤体细胞胚由无性繁殖体系产生,可以估定杂种优势。5)工厂化育苗工厂化育苗的特点是繁殖快,整齐、一致,无病虫害,周期短,周年生产,性状稳定,并且在生产上有如下作用:①有利于繁殖系数低、杂合材料的快速繁殖;出的表现型优异植株的优良遗传性;④组织培养育苗的无毒化生产,还可减少病害传总之,随着组织培养这一技术的发展及各种培养方法的广泛应用,使这一技术在遗传育种、品种繁育等方面表现出了巨大的潜力,特别是生物工程和工厂化育苗实施以后,它将以新兴产业的面目在技术革命中发挥重大作用。6?分实验室及其作用如下:洗涤室(准备室),器具的洗涤、干燥、消毒配置室,进行药品的配置、保存、分装灭菌室,培养基及使用器具的消毒与灭菌,放置拖鞋、工作服、工作帽接种室,进行材料的接种,内置超净工作台或接种箱培养室,将接种的材料进行无菌培养生长的场所7?pH?PH,5〜6.55.8PH的组成而不同。pH0.2〜0.8,pH,0.5pHpH>6.0<5.0好。81),胞和原生质体培养,专为培养烟草细胞而设计的。B5植物,尤其木本植物组培可选择,专为培养大豆根细胞而设计的。White2计。2N6水稻等禾谷类作物花药培养而设计。
KNQ和NH4 SC4含量高,适合花药培养,专为KM-8P广泛用于原生质体培养,包括融合的培养,专为原生质体培养而设计。9、培养基的成分主要包括有哪些?答:培养基的成分主要包括:水、无机盐、有机物、植物激素、培养体的支持材料、其它辅助性物质。10、培养基中常用的植物激素有哪些?各有何作用?答:培养基中常用的植物激素及其作用:生长素类:IAAIBA24-D,NAA等。(10.510.8mg/L)就可促进生长,其次是茎和芽。细胞分裂素类:这类激素是腺嘌呤的衍生物,包括 6-BA(6-苄基腺嘌)、Kt(kinetin)Zt(zeatin)等。其作用:①诱导芽的分化促进侧芽萌发生长。细胞分裂素与生长素相互作用,当组织内细胞分裂素/生长素的比值高时,诱导愈伤组织或器官分化出不定芽;②促进细胞分裂与扩大。细胞分裂素多用于诱导不定芽的分化、茎、苗的增殖;③抑制根的分化。避免在生根培养时使用。20GA。其作用:促茎伸长,促胚发育成植株;打破休眠。4)脱落酸:ABA其作用:抑制细胞分裂和神长、促进脱落和衰老、促进休眠和提高抗逆能力,促进气孔关闭;影响开花;影响性分化等。11、外植体的选择需注意哪些问题?什么季节取材最好?答:1)外植体的选择需注意的问题:不同的植物、器官和组织其形态发生能力很不相同。在组培中,选择合适的,最易表达全能性的部位,是决定组培系成功建立的前提之一。在选择植物外植体进行组织培养时,还要考虑待培养材料的来源是否保证,是否容成苗;同时要考虑到该外植体,特别是经过脱分化产生的愈伤组织,是否会引起不良变异,丧失原品种的优良性状。2)对大多数植物而言,应在生长开始的季节采样较好,若在生长末期或已进入休眠期时取样,则外植体可能对诱导反应迟钝或无反应。在母株生长旺盛的季节取材料,不仅成活率高而且增殖率也大。如,马铃薯在 12月和4月所取的外植2-35-11月间所取的材料,则很少能够再生。12、在组织培养过程中,常用的灭菌方法有哪些?答:常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类1)物理方法灭菌:①湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)一培养基灭菌④过滤灭菌(不耐热的物质)⑤紫外线一空间灭菌2)化学方法灭菌:①.熏蒸灭菌②擦涂灭菌一物体表面灭菌③消毒剂灭菌一用于植物材料表面灭菌13、何谓外植体褐变?产生褐变的主要原因?如何防止减轻褐变现象的发生?答:1)外植体褐变,是指在接种后,其表面开始褐变,有时甚至会使整个培养基褐变的现象。2)产生褐变的主要原因:①植物品种:研究表明,由于多酚氧化酶活性上的差异,不同品种间的褐变现象是不同的。因此,在培养过程中应该有所选择,对不同的品种分别进行处理。②生理状态:由于外植体的生理状态不同,在接种后褐变程度也有所不同。一般来说,幼嫩的组织在接种后褐变程度不明显,而老熟的组织在接种后褐变程度较为严重。③培养基成分:浓度过高的无机盐会使某些观赏植物的褐变程度增加,此外,细胞分裂素的水平过高也会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性,从而使褐变现象加深。④培养条件不当:如果光照过强、温度过高、培养时间过长等,均可使多酚氧化酶的活性提高,从而加速被培养的外植体的褐变程度。3)防止、减轻褐变现象发生的措施:象明显减轻。减轻材料的褐变现象。0.1%0.512-24h7-l0d后,褐变现象便会得到控制或大为减轻。14答:1)试管苗的特点:形态解剖方面根:①无根毛。②根与苗的输导组织不相连。叶:①叶的角质和蜡质层不发达,容易蒸腾失水。②无表皮毛,保水和反光能力差。③叶细胞结构疏松。④叶气孔突出,张大。生理功能方面
⑤叶存在排水孔。①根的生理功能:低,吸水能力弱。②叶片表面极易散失水分。③气孔不能关闭④叶光和能力较低,C02固定能力差2)移栽前要注意:移栽要抓三个关键:①水分的平衡(不要失水过多)②温度和光照(不能太高)③光和能力逐步形成或加强提高移栽成活率的技术措施①移栽前的工作:试管苗驯化处理,措施是对外界要增加湿度、减弱光照;对试管内要通透气体、增施二氧化碳肥料、逐步降低空气湿度等;对栽培驯化基质要进行菌。移栽前可将培养物不开口移到自然光照下锻炼 2-3d,让试管苗接受强光的照射,使其长得壮实起来,然后再开口练苗 1-2d,经受较低湿度的处理,以适应将来自然湿度的条件。6X6cm-10x10cm料钵,也可用育苗盘。15、为什么说植物器官培养是组织培养的一个最重要的方面?广。器官培养是研究器官生长、营养代谢、生理生化、组织分化和形态建成的最好材料和方法;而且器官培养在生产实践上具有重要的应用价值。所以说植物器官培养是组织培养的一个最重要的方面。16、植物脱毒培养的意义是什么?答:植物脱毒培养的意义:去除病毒危害,提咼作物品质与产量6070花卉、蔬菜和果树等得到广泛的应用。减少环境污染,有利于保护环境栽培去病毒植物可减少药剂的使用17、简述植物茎尖脱毒和热处理脱毒的原理与方法答:1)植物茎尖脱毒原理:感染病毒植株的体内病毒的分布不均匀,病毒的数量随植株部位及年龄而异,越靠近茎顶端区域的病毒的感染程度越低,生长点 (分生组织0.1-1.0mm区)则几乎不含或含病毒很少。茎尖培养脱毒,由于其脱毒效果好,后代稳定,所以是目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径。方法:外植体培养,包括①茎尖:顶端分生组织及其下方 1—3个幼叶原构成。②茎的顶端分生组织:茎的最幼龄叶原基上方的一部分,最大直径约100um,最大长度约250um热处理脱毒方法:①温汤浸渍处理:50C10min至数小时。()35~40C38C35C
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