《生物化学实验》教学大纲

《生物化学实验》教学大纲四．考试方法五．参考教材一．实验目的生物化学是一门实验性学科，其所有知识均来自于实验。本课程着眼于学生学习和掌握生物化学课程的基本理论、基本知识以及实验技能，培养学生具有初步分析问题和解决问题的能力。生物化学实验课通过学习滴定、比色、纸层析、电泳、生化制备等基本实验技术，分析研究糖、脂、蛋白质、核酸、酶、维生素等生化物质及某些代谢过程，培养学生具有初步的科学实验能力及严格的科学作风，同时验证生物化学的某些基本理论知识，加深感性认识，并锻炼初步的综合实验能力。返回顶部二．实验内容实验一 糖的呈色反应及还原糖的检一．实验目的学习鉴定糖类及区分酮糖和醛糖的方法；了解鉴定还原糖的方法及其原理。二．实验内容MolishSeliwanoffBialFehling应。三.实验过程呈色反应Molish反应蒽酮反应SeliwanoffBial还原糖的检验FehlingBenedictBarfoed四.作业与思考7MolishSeliwanoff么问题？举例说明那些糖属于还原糖.实验二 脂类组成对脂类单分子层通透性的影一、实验目的学习制作脂类单分子层和鉴定它的原理及方法，比较不同脂类所形成的脂类单分子层通透性的差异。二、实验内容以脂类单分子层作为模式膜，用甲烯蓝为指示剂，观察不同脂类单分子层通透性的影响。三.实验过程溶液准备四.作业与思考试述生物膜的基本结构与功能内在蛋白质和外在蛋白质.实验三 蛋白质浓度的测定（1）——Folin-酚一、实验目的学习Folin-酚法的原理及方法，制备标准曲线，测定未知样品中蛋白质含量。二、实验内容Folin三.实验过程Folin-酚法标准曲线测定未知样品蛋白质浓度计算四.作业与思考Folin-酚法测定蛋白的原理是什么？Folin-酚测定蛋白含量？作为标准蛋白的牛血清清蛋白或酪蛋白在应用时有何要求？实验四 蛋白质浓度测定（2）——紫外线吸收一、实验目的学习紫外线（UV）吸收法测定蛋白质含量的原理，了解紫外分光光度计的构造原理，掌握它的使用方法。二、实验内容三.实验过程标准曲线的绘制样品测定本法与其它测定蛋白质含量法相比，有哪些优点？若样品中含有干扰测定的杂质，应如何校正实验结果？实验五 氨基酸的分离与鉴定——滤纸层析一、实验目的二、实验内容三.实验过程滤纸的剪裁点样展层定性鉴定定量测定四.作业与思考做好本实验的关键是什么？实验操作过程，为何不能用手接触滤纸？R制的因素有哪些？f实验六 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电一、实验目的了解电泳的一般原理，掌握醋酸纤维素薄膜电泳操作技术，测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。二、实验内容三.实验过程仪器与薄膜的准备点样电泳染色与漂洗透明四.作业与思考根据人血清中血清蛋白各组分等电点，如何估计它们在pH8.6的巴比妥—巴比妥钠电解缓冲液中移动的相对位置简述醋酸纤维素薄膜电泳原理及优点实验七 蛋白质和氨基酸的呈色反应一、实验目的学习常用的鉴定蛋白质氨基酸的方法及其原理；学习几种特定氨基酸的特殊颜色反应及其原理。二、实验内容三.实验过程加样观察四.作业与思考综合分析、对比蛋白质和氨基酸各种鉴定方法的特点和用途？结论？茚三酮反应的阳性结果是否是同一色调？若不是，为什么？实验八 蛋白质的沉淀、变性反一、实验目的了解蛋白质的沉淀反应、变性作用和凝固作用的原理及它们的相互关系；学习盐析和透析等生物化学的操作技术。二、实验内容三.实验过程蛋白质的可逆沉淀反应—蛋白质的盐析作用蛋白质的不可逆沉淀反应重金属沉淀蛋白质有机酸沉淀蛋白质无机酸沉淀蛋白质加热沉淀蛋白质蛋白质可逆沉淀与不可逆沉淀的比较四.作业与思考为什么鸡蛋清蛋白可用作铅中毒或汞中毒的解毒剂？蛋白质分子中的那些集团可以与重金属离子作用而使蛋白质沉淀？有机酸、无机酸作用而使蛋白质沉淀？高浓度的硫酸铵对蛋白质溶解度有何影响，为什么？在蛋白质可逆沉淀反应的实验中，为何要用蛋白质氯化钠溶液？实验九 酵母RNA的提取与地衣酚显色测定一、实验目的RNARNA理及具体方法。二、实验内容RNA三.实验过程RNARNA标准曲线的制作样品的测定RNA四.作业与思考用你所学过的化学知识，分析三种催化剂：FeCl·6HO,CuCl·HO3 2 2 2和CuO,哪种催化剂的催化效果更好？RNA实验十 动物组织DNA的制一、实验目的学习盐溶液法从动物组织中提取脱氧核糖核酸的原理及操作方法。二、实验内容以猪肝为原料用不同浓度的盐溶液提取其中的脱氧核糖核酸。三.实验过程DNADNA标准曲线的制定样品的测定DNA四.作业与思考DNA的降解和断裂。DNA等方面加以比较。实验十一 核酸浓度测定（1）——定磷一、实验目的二、实验内容三.实验过程定磷标准曲线的制定测定总磷量RNA样品的消化、总磷量和回收率测定无机磷的测定测定磷的回收率有何意义？响较大？实验十二 核酸浓度测定（2）——紫外线吸收一、实验目的了解紫外线（UV）吸收法测定核酸浓度的原理，并进一步了解紫外分光光度计的使用方法。二、实验内容三.实验过程标准曲线的绘制四.作业与思考干扰本实验的物质有哪些？设计排除这些干扰物的实验。实验十三 维生素A、B1、B2的定性鉴一、实验目的A、B1、B2二、实验内容维生素A的定性鉴定以及维生素B1、B2的定性鉴定。三.实验过程AB（重氮试剂法）1B（荧光法）1B2四.作业与思考A、BB1 2

最丰富的天然食物。4A、B1

和B的基本原理。2SbCl3A4实验十四 维生素C的定量测一、实验目的2，6—C二、实验内容2，6—C三.实验过程提取标准液的滴定样品滴定计算四.作业与思考C为什么？C实验十五 酶的激活剂、抑制剂及温度对酶的活性的影一、实验目的二、实验内容三.实验过程四.作业与思考激活剂可分哪几类？本实验中的氯化钠、硫酸铜属于哪种类型？抑制剂与变性剂有何不同？试举例说明。酶反应的最适温度是酶反应的物理常数吗？它与哪些因素有关？实验十六 血清谷丙转氨酶的测定（King氏法一、实验目的掌握血清谷丙转氨酶（SGPT）活力测定的方法，学习绘制标准曲线，并学习如何设计实验。二、实验内容King三.实验过程制备标准曲线绘制标准曲线样品及回收率测定结果计算标准曲线测定法标准管测定法四.作业与思考什么叫做转氨基作用？根据所学理论阐明转氨基作用在蛋白质的合成与分解及糖、脂肪代谢中有何重要作用？回收率测定在实际工作中有何用途？实验十七 乳酸脱氢酶活力测一、实验目的LDHLDH二、实验内容利用动物肌肉制备乳酸脱氢酶的组织提取液，用紫外分光光度法测定LDH的活力。三.实验过程制备肌肉匀浆LDH蛋白质含量测定数据处理1.简述用紫外分光光度法测定以NAD+为辅酶的各种脱氢酶测定原理。实验十八聚合酶链式反应（PCR）PCRPCRPCR（琼脂糖凝胶电泳法二、实验内容23SRNADNA106～476bpPCR370bp琼脂糖凝胶电泳的方法对结果进行分析。返回顶部三．实验学时安排（54第一学期实验序号实验名称周次学时类型实验1糖的呈色反应及还原糖的检验3-43验证实验2脂类组成对脂类单分子层通透性的影响5-63验证实验37-83综合实验49-103综合法实验5氨基酸的分离与鉴定——滤纸层析法11-124综合实验6血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳13-144综合实验7蛋白质和氨基酸的呈色反应15-162验证实验8蛋白质的沉淀、变性反应15-162验证实验9RNA17-184验证第二学期实验序号实验名称周次学时类型实验10动物组织DNA的制备3-43综合实验11核酸浓度测定（1）——定磷法5-63综合实验12核酸浓度测定（2）——紫外线吸收法7-83综合实验13维生素A、B1、B2的定性鉴定9-103验证实验14维生素C的定量测定9-104综合实验15酶的激活剂、抑制剂及温度对酶的活性的影响11-124验证实验16血清谷丙转氨酶的测定（