全国临床检验操作规程

全国临床检验操作规程〔3版〕精液检查一．标本收集32>7天，3周。37天。1h内送到检验科。用清洁枯燥广口塑料或玻璃小瓶收集精液，不宜承受避孕套内的精液。某些塑料容器具有杀精子作用，但是否适宜应事先做试验。应将射精精液全部送检。传送时温度应在20~40℃。容器必需注明患者姓名和〔或〕识别名〔标本号或条码，标本采集日期和时间。和全部体液一样，精液也必需依据潜在生物危害物质处理，由于精液内可能含有肝炎病毒、人类免疫缺陷〔病毒〕和疱疹病毒等。二．一般性状检查一般性状检查包括记录精液量、颜色、透亮度、粘稠度和是否液化。外观正常精液呈灰白色或乳白色，不透亮。棕色或红色提示出血。黄色可能服用某种药物。精子浓度低时精液略显透亮。固，30min60min考虑为特别，应记录这种状况。正常精液可含有不液化的胶冻状颗粒。量用刻度量筒或移液管测定。正常一次全部2~5ml之一。Pasteur滴管吸正常精液呈水样，形成不连续小滴。黏稠度特别时，形成丝状或线状液滴〔长度大于2c。也可使用玻璃棒或注射器测定黏稠度。酸碱度 用周密试带检查。正常人 pH为7.2~8.07.8。三．精子存活率精子存活率〔motility〕用活精子比例来反映。伊红染色法【试剂】5g/LY染色液：伊红Y0.5g，加生理盐水100ml。【操作】在载玻片上加颖精液和伊红溶液各1滴，混匀后，加上盖玻片，30s后在高倍镜下观看，活精子不着色。死精子染成红色。200个精子，计算未着色〔活精子〕的百分率。伊红-苯胺黑染色法【试剂】〔1〕10g/LY染色液：伊红1g，加蒸馏水100ml。〔2〕100g/L10g，加蒸100ml。【操作】取小试管，加颖精液和伊红溶液各1滴，混匀。30s3滴，混匀。30s-伊红-苯胺1滴，制成涂片，待干。油镜下观看，活精子为白色，死精子染成红色，背景呈黑色，计数200个精子，计算未着色活精子的百分率。精子低渗膨胀试验〔HOS〕【试剂】0.735g1.351g，加蒸100ml。分装，-20℃冷冻保存，使用前解冻，并充分混匀。【操作】1ml膨胀液，375min。0.1ml37℃30min。在相差显微镜下观看精子，膨胀精子为尾部外形发生变化的精子，即活精子。计数200个精子，计算膨胀精子的百分率。【参考区间】30~60min70%以上精子应为活60%以上精子消灭尾部膨胀。【附注】如室温低于10℃时，应将标本先放入375~10min后镜检。某些标本试验前就有尾部卷曲的精子，HOSHOS试验结果百分率就等于测定值减去未处理标本中尾部卷曲精子百分率。HOS也是精子尾部膜功能试验。四．精子活力WHO推举一种无需简洁设备而能进展简洁精子活力〔activity〕分级的方法。【操作】10μl5个视野，200a级和b级精子，随后在同一视野内计数c级和d级精子。【结果推断】依据下述标准把精子活力分为a、b、c、d四级。a级：快速前向运动：37℃时速度≥25μm/s，20℃时速度≥20μm/s〔25μm大约相当于5个头部的长度，或半个尾部的长度。b级：慢速或者呆滞的前向运动。c级：非前向运动〔5m/。d级：不动。【参考区间】正常精液采集后60mina+b级精子达50%以上。五．精子计数【试剂】精子稀释液：碳酸氢钠5g，40%甲醛溶液1ml，100ml，待完全溶解过滤后使用。【操作】0.38ml，吸液化精20μl，参与稀释液内摇匀。Neubauer血细胞计数池内，静置1~2min，待精子下沉后，以精子头部作为基准进展计数。1025个中方格内的精子数。10~40个，应计数10个中方格内的精子数。405个中方格内的精子数。【结果推断】精子数= 计数结果 *25* 1 * 20 * 103/ml计数中方格数 计数池高度= 计数结果 * 1 * 5 * 105/ml计数中方格数 计数池高度【参考区间】正常男性≥20*106/ml【附注】3~7天。收集精液标1h内检验，冬季应留意保温。消灭一次特别结果，应隔1周后复查，反复2~3次方能得出比较正确的结果。如低倍镜、高倍镜检查均无精子，应将精液离心沉淀后再涂片检查，如两次均无精子，六．精子形态观看【试剂】改进巴氏染色液、Shorr染色液、Diff-Quik快速也可自行配制。【操作】15~20μl，承受压拉涂片法或推片法制片。95%乙醇和乙醚5~15min；Shorr75%1min；Diff-Quik快速染色法用甲15s。作改进巴氏、ShorrDiff-Quik染色，然后在油镜下观看。精子头部顶体染成淡蓝色，顶体后区域染成深蓝色，中段染成淡红色，尾部染成蓝色或淡红色，细胞质小滴位于头部后面或中段四周，巴氏染色染成绿色。【结果推断】头的外形必需是椭圆形，巴氏染色精子头部长4.0~5.0μm，宽2.5~3.5μm，长宽之比应在1.50~1.75，顶体的界限清楚，约占头部的40%~70%<1μm，约为头部长度1.5倍，且在轴线上紧贴头部，细胞质小滴应的，比中段细，非卷曲，其长约为45μm。全部形态学处于临界状态的精子均列为异常。特别精子可有：①头部缺陷：大头、小头、锥形头、梨形头、圆头、无定形头、有空泡头、发卡形尾、尾部断裂、尾部弯曲、尾部宽度不规章、尾部卷曲等。【参考区间】正常人精液中正常形态者≥30%〔特别精子20%20%为不正常。七．精子凝集精子凝集是活动精子以各种方式，如头对〔没有凝集3〔的精子凝集到一起。凝集的存在，提示可能为免疫因素引起不育。八．非精子细胞精液含有的非精子细胞成分，成为“圆细细胞<5*106/ml。1*106/ml精子症。九．其他成分体、脂滴、脱落上皮细胞等。十．临床意义30min后，完全液化。依据精液检查结果，临床上常用于诊断男子不育症及观看输精管结扎术后的效果。正常精子活力一般在a级≥25%。如活力a级<25a级+b级<503．精索静脉曲张症患者精液中常消灭形态不正常的精子。4．血液中有毒性代谢产物、接触铅等污染物、应用大剂量放射线及细胞毒药物等可使精子形态特别。前列腺液检查一．标本收集片上，马上送检。二．检查内容记录液体颜色、是否混有血液、有无脓块等。湿片镜检，高倍镜下观看白细胞、红细胞、卵磷脂小体，其次为上皮细胞、精子、淀粉样体等。革兰染色后检查细菌。三．报告方式卵磷脂小体报告在高倍视野中分布数量。白细胞、红细胞报告方式与