邻二氮菲分光光度法测定铁含量课件

2014年12月邻二氮菲分光光度法

测定铁含量2014年12月邻二氮菲分光光度法

测定铁含量实验目的通过本实验了解分光光度法的基本原理和基本方法。2.掌握邻二氮菲吸光光度法测定铁的方法。3.学习吸光光度法测定铁吸收曲线和标准曲线的绘制方法。4.了解分光光度计的构造、性能及使用方法。实验目的通过本实验了解分光光度法的基本原理和基本方法。一、分光光度法分光光度法(spectrophotometry):根据物质的分子对光的选择性吸收而建立起来的分析方法，是应用分光光度计测量溶液在某一波长下的吸光度以确定溶液中被测物质含量的分析方法。一、分光光度法分光光度法(spectroph透光率（Transmittance）一、分光光度法I0ItIaI0=Ia+

It

透光率入射光透射光T的取值范围：0.0%~100.0%全部吸收：0.0%全部透射：100%结论：溶液的透光率越大，表示它对光的吸收越小；反之，透光度越小，对光吸收越大。透光率（Transmittance）一、分光光度法I0ItI吸光度吸光度（Absorbance）一、分光光度法实验证明：溶液吸光度，与溶液浓度、液层厚度和入射光波长等因素有关。I0ItIa入射光透射光吸光度吸光度（Absorbance）一、分光光度法实验证明：物质的吸收光谱一、分光光度法同一种物质对不同波长的光的吸收程度不同，吸光度最大处对应的波长为最大吸收波长λmax。不同浓度的同一物质，其吸收曲线性质相似λmax不变。而对于不同物质它们的吸收曲线形状和λmax不同。吸收曲线可以提供物质结构信息，作为物质定性分析的依据。以波长λ为横坐标，吸光度A为纵坐标作图，可得吸收光谱(吸收曲线)物质的吸收光谱一、分光光度法同一种物质对不同波长的光的吸收程二、

Lambert-Beer定律根据Lambert-Beer定律数学表达式：A=εbcb—液层厚度（光程长度，cm）c—是溶液的物质的量浓度ε—是摩尔吸光系数（单位为L·mol-1·cm-1），与入射光波长及物质本性有关若溶液组成量度以质量浓度(g·L-1)表示，数学表达式还可以表示为：A=abc，式中a为吸光系数（单位为L·g-1·cm-1）。二、Lambert-Beer定律根据Lambert-Bee在分光光度法中，当条件一定时，吸光系数（ε、a）均为常数，此时溶液的吸光度（A）与有色物质的浓度成正比。三、

比较法求未知品浓度同一实验中所使用的比色杯厚度b相等，相同的被测物，其a亦相同，将两式相除得：在分光光度法中，当条件一定时，吸光系数（ε、a）均为四、标准曲线法求未知品浓度A标

=abc标Y=k·XA标(Y)c标(X)A未c未四、标准曲线法求未知品浓度A标=abc标Y=k·五、分光光度计使用方法五、分光光度计使用方法五、分光光度计使用方法五、分光光度计使用方法722s可见分光光度计预热20分钟以上。（接通电源-左侧面长方形按钮为开关，开启进行预热）机器调零：开盖调零模式，按以下步骤操作：将样品池盖子打开-（面板上）“模式”按键调到透射比-“0%”按键（透射率为零）-关上盖子按“100%”按键（透射率100%），调零工作结束。

如果没有进行测试，样品池盖子一定处于开盖状态！！五、分光光度计使用方法722s可见分光光度计预热20分钟以上。（接通电源-左侧面长测试样品步骤：（整个过程样品池盖关闭）空白样品调零：1号溶液为空白样品（1号溶液透光率为100%），利用拉杆（轻轻调节拉杆即可）使光路对准空白样品进行调零，“模式”按键调到透射比-“100%”按键（光全部退通过1号溶液，相当于将背景吸光度扣除掉）

注意：只要波长λ有变动，就要进行1号空白样品调零操作

调零结束后，进入吸光度模式，就可以将样品调到与光路对应位置进行吸光度测试。读取吸光度数值、记录。

注意：一定要耐心等待约1分钟左右，读数稳定后才可按动按键进行0%或100%调节操作！！五、分光光度计使用方法测试样品步骤：（整个过程样品池盖关闭）五、分光光度计使用方法邻二氮菲（邻菲罗啉）是目前分光光度法测定铁含量的较好试剂，在pH=3~9的溶液中，试剂与Fe2+生成稳定的橙红色配合物该显色反应中铁必须是亚铁状态，因此，在显色前要加入还原剂，如盐酸羟胺，反应如下：2Fe3++2NH2OH·HCl+2H2O=2Fe2++N2↑+4H3O++2Cl-六、显色剂邻二氮菲（邻菲罗啉）是目前分光光度法测定铁含量的较好试剂，在表5-1标准溶液和待测溶液配制实验序号1（空白）234567标准Fe2+溶液/mL00.200.400.600.801.0010.00（水样）盐酸羟胺/mL0.500.500.500.500.500.500.50邻二氮菲/mL1.001.001.001.001.001.001.00醋酸钠溶液/mL2.502.502.502.502.502.502.50V总（稀释）/mL25.0025.0025.0025.0025.0025.0025.00c稀释（Fe2+）/mmol·L-1表5-2吸收光谱的测定λ/nm450460470480490500510520530540550560Aλmax/nm用4号样品找到具有最大吸光度的波长后，可在其左右5nm处，再测一下。七、实验步骤表5-1标准溶液和待测溶液配制实验序号1（空白）23456选择最大吸收光波长λmax为入射光波长，以调节1号溶液透射比100%后，测出2-7号溶液的吸光度：六、实验步骤表5-3标准溶液和待测溶液的吸光度数据记录容量瓶编号1（空白）234567（水样）c稀释（Fe2+）/mmol·L-10.00？？吸光度A0.00根据标准曲线读出浓度数值选择最大吸收光波长λmax为入射光波长，以调节1号溶液透射比七、数据记录与结果分析（1）绘制吸收光谱并确定λmax：根据表5-2所记录的数据，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标在坐标纸上绘制吸收光谱，从而找出测量用的最大吸收波长λmax。吸收光谱：（附图）（2）绘制标准曲线：根据表5-1所记录的数据，以标准Fe2+离子的浓度（μmol·L-1）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标绘制浓度对吸光度的标准曲线。标准曲线：（附图）直线七、数据记录与结果分析（1）绘制吸收光谱并确定λmax：根据（3）待测溶液中Fe3+（或Fe2+）离子浓度的确定：根据所测的待测溶液的吸光度，利用比较法和标准曲线法分别计算出原未知溶液Fe3+（或Fe2+）浓度（mg·L-1）。标准曲线：（附图）

1）标准曲线法：标准曲线上直接读出Fe2+的含量为＿＿＿（mg·L-1）；原水样中铁离子含量为＿＿＿＿＿＿（mg·L-1）。2）比较法：所选取Fe2+标准溶液的吸光度＿＿＿＿＿＿；水样的吸光度＿＿＿＿＿＿＿＿＿；原水样中铁离子含量为＿＿＿＿＿＿（mg·L-1）。七、数据记录与结果分析（3）待测溶液中Fe3+（或Fe2+）离子浓度的确定：根据所注意吸量管上“吹或快”字注意吸量管上“吹或快”字邻二氮菲分光光度法测定铁含量课件2014年12月邻二氮菲分光光度法

测定铁含量2014年12月邻二氮菲分光光度法

测定铁含量实验目的通过本实验了解分光光度法的基本原理和基本方法。2.掌握邻二氮菲吸光光度法测定铁的方法。3.学习吸光光度法测定铁吸收曲线和标准曲线的绘制方法。4.了解分光光度计的构造、性能及使用方法。实验目的通过本实验了解分光光度法的基本原理和基本方法。一、分光光度法分光光度法(spectrophotometry):根据物质的分子对光的选择性吸收而建立起来的分析方法，是应用分光光度计测量溶液在某一波长下的吸光度以确定溶液中被测物质含量的分析方法。一、分光光度法分光光度法(spectroph透光率（Transmittance）一、分光光度法I0ItIaI0=Ia+

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透光率入射光透射光T的取值范围：0.0%~100.0%全部吸收：0.0%全部透射：100%结论：溶液的透光率越大，表示它对光的吸收越小；反之，透光度越小，对光吸收越大。透光率（Transmittance）一、分光光度法I0ItI吸光度吸光度（Absorbance）一、分光光度法实验证明：溶液吸光度，与溶液浓度、液层厚度和入射光波长等因素有关。I0ItIa入射光透射光吸光度吸光度（Absorbance）一、分光光度法实验证明：物质的吸收光谱一、分光光度法同一种物质对不同波长的光的吸收程度不同，吸光度最大处对应的波长为最大吸收波长λmax。不同浓度的同一物质，其吸收曲线性质相似λmax不变。而对于不同物质它们的吸收曲线形状和λmax不同。吸收曲线可以提供物质结构信息，作为物质定性分析的依据。以波长λ为横坐标，吸光度A为纵坐标作图，可得吸收光谱(吸收曲线)物质的吸收光谱一、分光光度法同一种物质对不同波长的光的吸收程二、

Lambert-Beer定律根据Lambert-Beer定律数学表达式：A=εbcb—液层厚度（光程长度，cm）c—是溶液的物质的量浓度ε—是摩尔吸光系数（单位为L·mol-1·cm-1），与入射光波长及物质本性有关若溶液组成量度以质量浓度(g·L-1)表示，数学表达式还可以表示为：A=abc，式中a为吸光系数（单位为L·g-1·cm-1）。二、Lambert-Beer定律根据Lambert-Bee在分光光度法中，当条件一定时，吸光系数（ε、a）均为常数，此时溶液的吸光度（A）与有色物质的浓度成正比。三、

比较法求未知品浓度同一实验中所使用的比色杯厚度b相等，相同的被测物，其a亦相同，将两式相除得：在分光光度法中，当条件一定时，吸光系数（ε、a）均为四、标准曲线法求未知品浓度A标

=abc标Y=k·XA标(Y)c标(X)A未c未四、标准曲线法求未知品浓度A标=abc标Y=k·五、分光光度计使用方法五、分光光度计使用方法五、分光光度计使用方法五、分光光度计使用方法722s可见分光光度计预热20分钟以上。（接通电源-左侧面长方形按钮为开关，开启进行预热）机器调零：开盖调零模式，按以下步骤操作：将样品池盖子打开-（面板上）“模式”按键调到透射比-“0%”按键（透射率为零）-关上盖子按“100%”按键（透射率100%），调零工作结束。

如果没有进行测试，样品池盖子一定处于开盖状态！！五、分光光度计使用方法722s可见分光光度计预热20分钟以上。（接通电源-左侧面长测试样品步骤：（整个过程样品池盖关闭）空白样品调零：1号溶液为空白样品（1号溶液透光率为100%），利用拉杆（轻轻调节拉杆即可）使光路对准空白样品进行调零，“模式”按键调到透射比-“100%”按键（光全部退通过1号溶液，相当于将背景吸光度扣除掉）

注意：只要波长λ有变动，就要进行1号空白样品调零操作

调零结束后，进入吸光度模式，就可以将样品调到与光路对应位置进行吸光度测试。读取吸光度数值、记录。

注意：一定要耐心等待约1分钟左右，读数稳定后才可按动按键进行0%或100%调节操作！！五、分光光度计使用方法测试样品步骤：（整个过程样品池盖关闭）五、分光光度计使用方法邻二氮菲（邻菲罗啉）是目前分光光度法测定铁含量的较好试剂，在pH=3~9的溶液中，试剂与Fe2+生成稳定的橙红色配合物该显色反应中铁必须是亚铁状态，因此，在显色前要加入还原剂，如盐酸羟胺，反应如下：2Fe3++2NH2OH·HCl+2H2O=2Fe2++N2↑+4H3O++2Cl-六、显色剂邻二氮菲（邻菲罗啉）是目前分光光度法测定铁含量的较好试剂，在表5-1标准溶液和待测溶液配制实验序号1（空白）234567标准Fe2+溶液/mL00.200.400.600.801.0010.00（水样）盐酸羟胺/mL0.500.500.500.500.500.500.50邻二氮菲/mL1.001.001.001.001.001.001.00醋酸钠溶液/mL2.502.502.502.502.502.502.50V总（稀释）/mL25.0025.0025.0025.0025.0025.0025.00c稀释（Fe2+）/mmol·L-1表5-2吸收光谱的测定λ/nm450460470480490500510520530540550560Aλmax/nm用4号样品找到具有最大吸光度的波长后，可在其左右5nm处，再测一下。七、实验步骤表5-1标准溶液和待测溶液配制实验序号1（空白）23456选择最大吸收光波长λmax为入射光波长，以调节1号溶液透射比100%后，测出2-7号溶液的吸光度：六、实验步骤表5-3标准溶液和待测溶液的吸光度数据记录容量瓶编号1（空白）