微生物耐药机制课件

临床微生物学概论(二)

─细菌的耐药机制及其临床意义临床微生物学概论(二)

─细菌的耐药机制及其临床1抗菌药物对细菌的作用机制细菌对抗菌药物的耐药机制细菌耐药性的遗传学基础主要细菌的耐药性变迁及其防治本课内容抗菌药物对细菌的作用机制本课内容2微生物耐药机制课件3微生物耐药机制课件4微生物耐药机制课件5微生物耐药机制课件6微生物耐药机制课件7微生物耐药机制课件8微生物耐药机制课件9微生物耐药机制课件10微生物耐药机制课件11微生物耐药机制课件12微生物耐药机制课件13微生物耐药机制课件14（一）抗菌药物的作用机制阻碍细菌细胞壁合成：导致细菌在低渗透压环境下膨胀破裂死亡，使细菌不能生长繁殖。内酰胺类、糖肽类与细菌细胞膜相互作用：增强细菌细胞膜的通透性、打开膜上的离子通道，破坏其屏障作用，让细菌内部的有用物质漏出菌体或电解质平衡失调而死。多黏菌素与细菌核糖体或其反应底物（如tRNA、mRNA）相互所用：抑制蛋白质的合成，使细菌无法合成存活所必需的结构蛋白和酶。大环内酯类、氨基糖苷类阻碍细菌DNA的复制和转录：阻碍DNA复制将导致细菌细胞分裂繁殖受阻，阻碍DNA转录成mRNA则导致后续的mRNA翻译合成蛋白的过程受阻。喹诺酮类抑制细菌叶酸代谢等。磺胺类（一）抗菌药物的作用机制阻碍细菌细胞壁合成：导致细菌在低渗透15DNA引导的RNA多聚酶链霉素庆大霉素、妥布霉素（氨基糖苷类）阿米卡星蛋白合成（tRNA）莫匹罗星DNARNA503050305030核糖体THFADHFAPABADNA旋转酶（解旋、螺旋）喹诺酮类利福平蛋白合成（50S抑制剂）红霉素氯霉素克林霉素蛋白合成（30S抑制剂）细胞膜多粘菌素氯霉素乙酰转移酶细胞壁合成环丝氨酸万古霉素、替考拉宁杆菌肽青霉素类头孢菌素类拉氧头孢碳青霉烯类叶酸代谢甲氧苄啶磺胺类药周质空间β-内酰胺酶氨基糖苷类钝化酶四环素大观霉素细菌模式图-抗菌药物作用机制DNA引导的RNA多聚酶链霉素DNARNA50305030516（二）细菌主要的耐药机制灭活酶与钝化酶的产生抗生素渗透屏障作用靶位结构改变细菌代谢状态或营养缺陷细菌菌膜形成X外排灭活渗透障碍靶位改变（二）细菌主要的耐药机制灭活酶与钝化酶的产生细菌代谢状态或营17细菌耐药的主要机制灭活酶产生抗生素靶位点改变孔蛋白改变，细胞壁/膜通透性改变细菌耐药的主要机制灭活酶产生抗生素靶位点改变孔蛋白改变，细胞18喹诺酮类药物耐药基因β-内酰胺类药物耐药基因喹诺酮类药物耐药基因β-内酰胺类药物耐药基因19多种抗菌药物耐药主动外排↑抗菌药物D2孔蛋白缺失

MexA-MexB-OprM碳青霉烯酶Abs失活胞内周间隙铜绿假单胞菌对碳青霉烯类的耐药机制多种主动外排↑抗菌药物D2孔蛋白缺失MexA-MexB-20抗生素渗透屏障作用与外排泵抗生素渗透屏障作用与外排泵21靶位结构改变药物细菌靶位万古霉素敏感肠球菌万古霉素耐药肠球菌靶位结构改变药物细菌靶位万古霉素敏感肠球菌万古霉素耐药肠球菌22细菌利用酶系统，把对氨基苯甲酸合成叶酸，维持自身生长需要。磺胺类药物与氨基苯甲酸化学结构相似，当磺胺类药物浓度较高时，可深入细菌体内竞争二氢叶酸合成酶，生成异常的核酸拟似物，使细菌不能生成菌体所必需核酸而死亡。对磺胺类药物产生耐药性的细菌，可通过调整代谢环节，产生大量的对氨基苯甲酸(20-100倍)，抵消磺胺药对酶的竞争，从而使药物失去抑菌作用。细菌代谢状态改变

营养缺陷等竞争力极强细菌利用酶系统，把对氨基苯甲酸合成叶酸，维持自身生长需要。细23内酰胺环Penicillinase灭活酶与钝化酶的产生内酰胺环Penicillinase灭活酶与钝化酶的产生24细菌菌膜形成细菌菌膜形成25耐药机制1.灭活酶和钝化酶的产生β-内酰胺酶氨基糖苷类钝化酶氯霉素酰基转移酶MLS类抗生素钝化酶（Macrolide-LicosamideStreptogramin）耐药机制1.灭活酶和钝化酶的产生26β-内酰胺酶的分类ESBLβ-内酰胺酶(质粒)(染色体)(质粒)(染色体或质粒)AmpCMLOXA丝氨酸酶金属酶A类酶C类酶D类酶B类酶Extended-spectrum-lactamasemetallo-lactamaseβ-内酰胺酶的分类ESBLβ-内酰胺酶(质粒)(染色体)(27底物谱青霉素酶：青霉素类头孢菌素酶广谱酶：包括上述抗菌药，第一和第二头孢菌素超广谱酶：包括上述抗菌药、第三和第四代头孢菌素AmpC酶：包括上述抗菌药、头霉素类碳青霉烯酶：包括上述抗菌药、碳青霉烯类丝氨酸碳青霉烯酶金属碳青霉烯酶遗传学基础质粒酶、染色体酶可诱导性体质酶（固有的）、诱导酶重要β-内酰胺酶及其底物谱底物谱重要β-内酰胺酶及其底物谱28ESBLs的分类

目前已超过200种DatafromLaheyClinic/Studies/ESBLs的分类

目前已超过200种DatafromLa29我国已报道的TEM型和SHV型ESBLsSHV酶城市TEM酶城市SHV-2浙江TEM-1河南SHV-5浙江、四川TEM-10安徽SHV-10四川、TEM-19四川SHV-12安徽、北京、广州、河南、上海、武汉、浙江、TEM-28四川TEM-29四川SHV-18上海TEM-105浙江SHV-28深圳、浙江TEM-116广州SHV-56安徽、北京、广州、湖南、昆明、上海、四川、浙江TEM-128浙江TEM-144福州SHV-59安徽、广州、湖南、昆明、深圳SHV-71广州SHV-89广州我国已报道的TEM型和SHV型ESBLsSHV酶城市TEM30CTX-M型ESBL全球流行图CTX-M型ESBL全球流行图31质粒介导的头孢菌素酶ACT-1,DHA-1,CMY(北京)DHA-1,CIT,ACT-1(上海)DHA-1(浙江)DHA-1,ACT-1(广州)质粒介导的头孢菌素酶ACT-1,DHA-1,CMYDHA-132我国已报道的KPC型碳青酶烯酶发现酶型菌种质粒株数地区作者发表的杂志和年份2006.9KPC-2肺炎克雷伯菌60kb1浙江张幸国中华检验医学杂志2007.7KPC-2弗劳地柠檬酸60kb1浙江张嵘中华检验医学杂志2007.8KPC-2粘质沙雷菌60kb1浙江张嵘中华微生物和免疫学杂志2008.1KPC-2粘质沙雷菌/6山东常霞医学检验与临床2008.4KPC-2肺炎克雷伯菌/5上海沈继录中华检验医学杂志KPC-2弗劳地柠檬酸/11KPC-2粘质沙雷菌/12008.5KPC-2肺炎克雷伯菌56kb12江苏蒯守刚临床检验医学2008.9KPC-2肺炎克雷伯菌60kb10浙江冯雅君浙江医学2010年KPC-2肠杆菌科细菌/30北京杨启文AAC2011年KPC-2肺炎克雷伯菌/109上海陈淑丹AAC2011年KPC-3大肠埃希菌/3上海蒋晓飞EJCMID我国已报道的KPC型碳青酶烯酶发现酶型菌种质粒株数地区作者发33已经发现的KPC型碳青霉烯酶（20种）

Klebsiellapneumoniaecarbapenemase(KPC)KPC型年份国家细菌KPC型年份国家细菌KPC-11996美国肺炎克雷伯菌KPC-3

2003美国阴沟肠杆菌KPC-21998美国肺炎克雷伯菌KPC-42004苏格兰肠杆菌属KPC-21998美国肠炎沙门菌KPC-52008波多黎各肺炎克雷伯菌

2004中国肺炎克雷伯菌KPC-62008波多黎各肺炎克雷伯菌

2005法国肺炎克雷伯菌KPC-72008美国肺炎克雷伯菌

2005哥伦比亚肺炎克雷伯菌KPC-82008波多黎各肺炎克雷伯菌

2005以色列大肠埃希菌KPC-92009以色列大肠埃希菌

2006哥伦比亚铜绿假单胞菌KPC-102010波多黎各鲍曼不动杆菌

2006哥伦比亚弗劳地柠檬酸杆菌KPC-112010美国肺炎克雷伯菌已经发现的KPC型碳青霉烯酶（20种）

Klebsiella34微生物耐药机制课件35VIM-2VIM-3VIM-6VIM-7VIM-1VIM-4VIM-5VIM-9VIM-10VIM-8P.aeruginosaUSAP.aeruginosaAcinetobacterspp.EnterobacteriaceaeEUROPEFAREASTSOUTHAMERICAP.aeruginosaTAIWANP.aeruginosaEnterobacteriaceaeGREECE,ITALYSWEDEN,POLANDEnterobacteriaceaeP.aeruginosaTURKEYP.putidaSINGAPOREP.aeruginosaSOUTHAMERICAP.aeruginosaUKP.aeruginosaITALYVIM-11aAcquiredMetallo-b-Lactamases:VIM-TypeEnzymesVIM-11bP.aeruginosa

ArgentinaVIM-13VIM-12EnterobacteriaceaeGreeceP.aeruginosa

Spain目前为止发现41种VIM型金属酶VIM-2VIM-3VIM-6VIM-7VIM-1VIM-436OXA型碳青霉烯酶Paterson2008;Higgins2009and2013;Kim2010苏格兰(1985)西班牙(1997)法国(2003)阿根廷(1994)63%88%OXA-143巴西(2004)OXA-182韩国(2007)89%93%OXA-235美国,

墨西哥(2005)56%55%目前为止发现418种OXA型碳青霉烯酶OXA型碳青霉烯酶Paterson2008;Higgin37氨基糖苷钝化酶氨基糖苷钝化酶可对氨基糖苷分子的活性基团进行修饰而使之失去抗菌活性不同的氨基糖苷钝化酶可钝化同一种氨基糖苷类；而同一种氨基糖苷钝化酶又可钝化不同的氨基糖苷类氨基糖苷钝化酶氨基糖苷钝化酶可对氨基糖苷分子的活性基团进行修38氨基糖苷类钝化酶乙酰转移酶(Aminoglycosideacetyltransferases,AAC)

AAC（2’）AAC（6’）AAC（3）核苷转移酶(Aminoglycosidenucleotidyltransferases,ANT或ADD

ANT（4’）ANT（3’）ANT（2’）ANT（6’）磷酸转移酶(Aminoglycosidephotransferases,AHP)

APH（3’）APH（3”）APH（5”）革兰阳性菌（双重功能酶）AAC（6’）+APH（2’’）氨基糖苷类钝化酶乙酰转移酶(Aminoglycosidea39耐药机制抗生素渗透障碍：细胞壁障碍或细胞膜通透性的改变，抗生素无法进入细胞内达到作用靶位而发挥作用。细胞壁：类脂双层，脂多糖（LPS），阻碍疏水性抗菌药物进入菌体。细胞外膜孔蛋白(Outermembraneporinchannels)：OmpF，OmpA，OmpC孔蛋白丢失或减少，阻碍亲水性抗菌药物进入菌体。细胞内膜多药外排泵(Activeefflux)：产生新的能量依赖性转运系统。MexA-MexB-OprM。耐药机制抗生素渗透障碍：细胞壁障碍或细胞膜通透性的改变，抗生40碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的外膜孔蛋白泳道1和6为敏感菌株碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的外膜孔蛋白泳道1和6为敏感菌株41耐药机制靶位结构改变(Alterationoftarget)靶位酶：二氢叶酸合成酶靶位生理功能：细菌形态和活力靶位结构：氟喹酮类DNA旋转酶举例：

MRSA:

含mecA基因，编码PBP2aPBP：PenicillinBindingProtein

AlteredPBP;AbnormalbindingofantibioticAlterationofPBPTarget耐药机制靶位结构改变(Alterationoftarge42耐药机制4.其他细菌代谢状态的改变：对氨基苯甲酸产量（PABA）营养缺陷、L型细菌（无细胞壁）、芽胞细菌菌膜的形成抗菌药物不能透过整个菌膜菌膜对抗菌药物的敏感性降低菌膜内的细菌具有独特的生物学特征耐药机制4.其他43细菌的特殊状态芽胞（Spore）某些细菌在一定环境条件下，在菌体内形成一个圆形或卵圆形小体。是细菌的休眠方式。多数芽胞形成是在营养缺乏时抵抗力强，对热、干燥、消毒剂等有强大的抵抗力。一般方法不易将其杀死，可耐100℃沸水煮沸数小时。最可靠的方法是高压蒸汽灭菌。以芽胞是否被杀死作为判断灭菌效果的指标。如炭疽芽胞杆菌破伤风梭菌细菌的特殊状态芽胞（Spore）44（三）细菌耐药性的遗传学基础染色体介导耐药质粒介导的耐药（三）细菌耐药性的遗传学基础染色体介导耐药45耐药菌的出现及流行—选择性压力抗菌药物均具有选择耐药细菌的能力，其广泛使用可导致选择性压力增加。耐药菌的出现及流行—选择性压力抗菌药物均具有选择耐药细菌的能46耐药菌株的出现新的耐药细菌突变XX敏感细菌耐药细菌耐药基因转移耐药菌株的出现新的耐药细菌突变XX敏感细菌耐药细菌耐药基因转471.染色体介导的耐药性耐药基因位于染色体，随细菌分裂传至后代发生频率低：10-5～10-9通常只对1、2种类似药物耐药产生或消失和药物存在无关耐药菌生长分裂变慢，竞争力变弱居次要地位1.染色体介导的耐药性耐药基因位于染色体，随细菌分裂传至后代482.质粒介导的耐药性染色体外的DNA耐药质粒：接合型和非接合型质粒转移方式：接合型：接合转移非接合型：转化，转导等方式发生频率：10-2～10-8临床意义：可造成耐药菌的爆发流行。居主要地位2.质粒介导的耐药性染色体外的DNA49接合（Conjugation）方式：通过耐药菌性菌毛和敏感菌菌体直接沟通，由耐药菌将耐药质粒边复制边转移给敏感菌。细菌：革兰阴性菌，特别是肠道细菌。种间，属间，牲畜与人。接合（Conjugation）方式：通过耐药菌性菌毛和敏感菌50接合（Conjugation）F+ConjugationHfrConjugationR-PlasmidConjugation接合（Conjugation）F+ConjugationH51耐药基因的传播a.质粒的转移接合

Conjugationb.噬菌体转导

Transductionc.游离DNA转化Transformationd.转座

Transposition耐药基因的传播a.质粒的转移接合

Conjugatio52三.主要细菌的耐药性变迁及其防治细菌耐药性的现状和变迁耐药性的防治三.主要细菌的耐药性变迁及其防治细菌耐药性的现状和变迁53细菌与抗菌药物的斗争历程抗菌药物细菌窄谱β内酰胺酶青霉素广谱β内酰胺酶广谱头孢菌素ESBL超广谱头孢菌素AmpC酶酶抑制剂复方合剂ESBL+AmpC酶碳青霉烯类药物碳青霉烯酶？细菌与抗菌药物的斗争历程抗菌药物细菌窄谱β内酰胺酶青霉素广谱54病原菌的变迁医院中革兰阳性菌增多一些少见病原菌增多－不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌等真菌增多－念珠菌、曲霉、组织胞浆菌等出现新的病原菌和耐药菌－CA-MRSA、肺孢菌、艰难梭菌(毒力增强)CA-ESBL、CA-KPC病原菌的变迁医院中革兰阳性菌增多55革兰阳性菌的变迁主要表现为金葡菌(尤其是MRSA)耐药株感染的发生率增多凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)感染增多青霉素不敏感肺炎链球菌（PISP、PRSP）的出现和增多万古霉素耐药肠球菌（VRE）的出现和增多耐青霉素和耐头孢菌素类草绿色链球菌的出现和增多革兰阳性菌的变迁主要表现为金葡菌(尤其是MRSA)耐药株感染56细菌耐药性变迁—革兰阳性菌金葡菌MRSAVISA、hVISAVRSACA-MRSA青霉素不敏感肺炎链球菌PISPPRSP耐万古肠球菌VRE临床重要的耐药细菌细菌耐药性变迁—革兰阳性菌金葡菌临床重要的耐药细菌57甲氧西林耐药葡萄球菌MRSA：甲氧西林耐药金葡菌Methicillin–resistantStaphylococcusaureus含mecA基因，编码PBP2aMSSA:甲氧西林敏感金葡菌Methicillin–susceptibleStaphylococcusaureus不含mecA基因，没有PBP2aMRCNS:甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌Methicillin-resistantcoagulasenegativeStaphylococcusMSCNS:甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌Methicillin-susceptiblecoagulasenegativeStaphylococcus甲氧西林耐药葡萄球菌MRSA：甲氧西林耐药金葡菌58甲氧西林耐药葡萄球菌HA-MRSA:healthcareassociatedMRSA医院感染获得性MRSA耐药性强、毒力弱CA-MRSA：社区感染获得性MRSAcommunity-AssociatedMRSA耐药性弱、毒力强甲氧西林耐药葡萄球菌HA-MRSA:59微生物耐药机制课件60超级细菌（Superbugs）

≈PDRMRSA、VRE、VISA、VRSA碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌碳青霉烯耐药其它肠杆菌科细菌（是指对其有效治疗药物几乎均耐药的细菌）主要超级细菌菌种：超级细菌（Superbugs）≈PDRMRSA、VRE61上海地区甲氧西林耐药葡萄球菌的检出率上海地区甲氧西林耐药葡萄球菌的检出率62万古霉素不敏感金黄色葡萄球菌VISA：万古霉素低度耐药MRSAvancomycin-intermediateStaphylococcusaureus

hVISA：异质性万古霉素低度耐药MRSA

heterogeneousVancomycin-intermediateStaphylococcusaureusVISAVRSA：万古霉素耐药MRSA

Vancomycin-resistantStaphylococcusaureus

万古霉素不敏感金黄色葡萄球菌VISA：万古霉素低度耐药MRS63历年美国报道的12例VRSA病案州年份年令标本来源诊断基础疾病1密西根200240足溃疡和导管尖足底软组织感染糖尿病,透析2PA200270足溃疡骨髓炎肥胖症3纽约200463肾引流管内尿液没有感染多发性硬化,肾结石4密西根200578脚趾伤坏疽糖尿病,维管束病5密西根200558脂膜切除术后外科部位伤口感染外科感染肥胖症6密西根200548跖溃疡骨髓炎心律失常,慢性溃疡7密西根200643三头肌创伤引起坏死的筋膜炎糖尿病,透析、慢性溃疡8密西根200748脚趾伤骨髓炎糖尿病,肥胖症,慢性溃疡9密西根200754脚切除术后的外科部位的伤口感染骨髓炎糖尿病,肝性脑病10密西根200953足底伤口足底软组织感染糖尿病,肥胖症，狼疮,类风湿性关节炎11德克萨斯201064Wounddrainage人工关节感染糖尿病,晚期肾疾病（肾功能衰竭），透析12德克萨斯201083阴道拭子阴道排出物慢性难治性尿路感染,慢性尿路感染,膀胱肠瘘除3号病案外，所有11株VRSA均为伤口标本分离物，且11例VRSA感染患者均被诊断为外科疾患**具有复杂的基础疾病，提示自身免疫能力低下历年美国报道的12例VRSA病案州年份年令标本来源诊断基础疾64肺炎链球菌的耐药性青霉素敏感肺炎链球菌：PSSPPenicillin-susceptibleS.pneumoniae青霉素MIC≤0.06ug/ml青霉素中介肺炎链球菌：PISPPenicillin-intermediateS.pneumoniae青霉素MIC0.125-1ug/ml青霉素耐药肺炎链球菌：PRSPPenicillin-resistantS.pneumoniae

青霉素MIC≥2ug/ml青霉素不敏感肺炎链球菌：PNSPPenicillin-nonsusceptibleS.pneumoniae包括PISP和PRSP肺炎链球菌的耐药性青霉素敏感肺炎链球菌：PSSP65肠球菌的耐药性HLARE：高水平氨基糖苷类耐药肠球菌high-levelaminoglycosideresistane氨苄西林和氨基糖苷类的联合治疗无效VRE：万古霉素耐药的肠球菌vancomycin-resistantenterococci基因型：vanA、vanB、vanC、vanD、vanE对万古霉素具有不同的耐药程度肠球菌的耐药性HLARE：高水平氨基糖苷类耐药肠球菌66革兰阴性菌的主要变迁肠杆菌科细菌产ESBLs，AmpC，碳青霉烯酶(KPC)等大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌检出率增加大肠埃希菌对氟喹诺酮类的耐药率上升快：＞50%不动杆菌属、铜绿假单胞菌中的MDR、XDR和PDR菌株增多流感嗜血杆菌：产生-内酰胺酶嗜麦芽窄食单胞菌、黄杆菌固有耐药株对碳青霉烯类的耐药性检出率增加革兰阴性菌的主要变迁肠杆菌科细菌67几个重要的名字解释MDR：Multi-drugresistant多重耐药对3种或以上化学结构不同的抗菌药物均耐药XDR：Extensively-drugresistant广泛耐药对仅除黏菌素或替加环素外的其他药物全部耐药PDR：Pan-drugresistant全耐药对所有抗菌药物均耐药几个重要的名字解释MDR：Multi-drugresist68微生物耐药机制课件69主要肠杆菌科细菌对碳青霉烯类的耐药性年份大肠埃希菌肺炎克雷伯菌肠杆菌属株数IMP-RMER-R株数IMP-RMER-R株数IMP-RMER-R200538601.11.4207832.97988.53.5200653851.40.827493.42.711058.72.2200763790.70.929962.42.912315.42.5200863841.30.933103.83.714165.22.8200978851.7145064.84.716844.93.4201090881.61.449959.19.019615.24.820111171711.263009.59.725194.24.52012176730.9184538.810.830313.53.72013167941.03.01212110.013.538164.36.4主要肠杆菌科细菌对碳青霉烯类的耐药性年份大肠埃希菌肺炎克雷伯70670株碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌对

抗菌药物的耐药率（CHINET2010）抗菌药R%S%抗菌药R%S%厄他培南1000哌拉西林/他唑91.82.5亚胺培南76.414.6哌拉西林1000美罗培南78.414.5氨苄西林/舒巴96.60.7头孢吡肟83.29.5氨苄西林1000头孢他啶94.13.5阿米卡星52.644.8头孢噻肟1000庆大霉素76.719.4头孢哌酮/舒巴84.73.5环丙沙星79.413.3头孢呋辛1000复方磺胺72.124.3头孢唑啉1000米诺环素37.542.9肺炎克雷伯菌占64.2%；病房依次为：ICU(36.3%)、神经外科(10%)670株碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌对

抗菌药物的耐药率（CH71CRE被列为“紧急威胁”CRE被列为“紧急威胁”72临床重要耐药细菌的检测临床重要耐药细菌的检测73耐甲氧西林葡萄球菌的检测苯唑西林：1g/片金葡菌11-12mm凝固酶阴性葡萄球菌≤17mm4%NaCl-6g/ml苯唑西林盐平板培养条件：35℃，24-48小时结果：＞1个菌落生长，判定为甲氧西林耐药（MR）菌株头孢西丁：30g/片金葡菌≤22mm凝固酶阴性葡萄球菌≤24mm分子生物学方法：PCR扩增mecA基因耐甲氧西林葡萄球菌的检测苯唑西林：1g/片74耐甲氧西林葡萄球菌的检测苯唑西林和头孢西丁检测苯唑西林盐平板检测耐甲氧西林葡萄球菌的检测苯唑西林和头孢西丁检测苯唑西林盐平板75临床意义细菌mecA基因抗菌药物MSSA(甲氧西林敏感金葡菌)除青霉素外大多敏感MRSA(甲氧西林耐药金葡菌)大多耐药（万古霉素除外）MRSA及MRCNS感染：选用万古霉素或替考拉宁。磷霉素、复方磺胺甲噁唑、利福平等可根据情况与糖肽类药联合使用临床意义细菌mecA基因抗菌药物MSSA除青霉素外MRSA76MSSA(1495株)与MRSA(1916株)的耐药率（%）

(CHINET2008)MSSA(1495株)与MRSA(1916株)的耐药率（%）77克林霉素诱导耐药性的检测（D-试验）结果报告阴性敏感：该菌不表现为体外诱导型克林霉素耐药。阳性耐药：该菌表现为体外诱导型克林霉素耐药，用克林霉素治疗可能无效。克林霉素诱导耐药性的检测（D-试验）结果报告阴性敏感：该菌不78HLARE肠球菌的检测HLARE120g/片庆大霉素K-B法药敏抑菌圈直径S≥10mmI=7-9mm(用稀释法确证)R=6mm临床意义HLARE菌株采用氨苄西林和氨基糖苷类抗生素的联合治疗无效

HLARE肠球菌的检测HLARE79耐万古霉素肠球菌检测万古霉素纸片扩散法含量：30g/片结果：透射光，抑菌圈内出现薄雾状或任何其他生长或抑菌圈≤14mm均表示耐药抑菌圈15-16mm为中度敏感，MIC抑菌圈≥17mm判定为敏感万古霉素耐药确证试验含6g/ml万古霉素的MH平板1-10l0.5MacFarlandStandard菌悬液35℃，24小时，≥1个菌落生长即判定为耐药分子生物学方法：VanA、VanB、VanC等基因耐万古霉素肠球菌检测万古霉素纸片扩散法80临床意义特征VanAVanBVanCVanDVanEVanGVanLVanM万古64->5004->5002-3264-1281612-168>256替考16->5000.5-20.5-24-640.50.50.50.75-256表达诱导诱导体质诱导诱导//诱导位置质粒/染色体质粒/染色体染色体染色体染色体染色体/质粒/染色体常见菌粪肠、屎肠粪肠和屎肠鹑鸡、铅黄屎肠粪肠粪肠粪肠屎肠临床意义特征VanAVanBVanCVanDVanEVanG81万古霉素依赖粪肠球菌（Vancomycin－dependentEnterococcusfaecalis，VDE)。长期、大量使用包括万古霉素、替考拉宁、氨基糖肽类等抗生素，由于抗生素的压力，肠球菌必须依赖万古霉素才能生长。万古霉素依赖粪肠球菌（Vancomycin－dependen82汪复：中国抗感染化疗杂志2005：5（1）：1－3耐药肠球菌感染耐万古霉素肠球菌属感染：新开发品种如利奈唑胺、奎奴普丁/达福普汀等，但后者对粪肠球菌无作用。根据药敏结果联合用药（磷霉素、利福平、氟喹诺酮类、米诺环素等）。磷霉素联合呋喃妥因可能对尿路感染有效汪复：中国抗感染化疗杂志2005：5（1）：1－3耐药肠球菌83耐青霉素肺炎链球菌的检测苯唑西林：1g/片抑菌圈直径≥20mm为青霉素敏感株（MIC≤2g/ml）抑菌圈直径≤19mm可能为青霉素耐药、中敏或敏感株，必须进行青霉素MIC测定。青霉素敏感、中敏和耐药肺炎链球菌在儿童中的检出率(上海地区1996-2008)耐青霉素肺炎链球菌的检测苯唑西林：1g/片青霉素敏感、中敏84临床意义PSSP青霉素、阿莫西林等β-内酰胺类高度敏感对红霉素、克林霉素、氯霉素耐药率较高PISP+PRSP青霉素耐药，部分菌株对头孢曲松等第三代头孢菌素耐药；但对万古霉素、和碳青霉烯类等均呈敏感；对红霉素、克林霉素、氯霉素耐药率更高临床意义PSSP青霉素、阿莫西林等β-内酰胺类高度敏感青霉素85产超广谱内酰胺酶菌株的检测ESBL：Extended-spectrumβ-lactamases筛选试验：ESBL头孢泊肟：10g/片≤22mm头孢他啶：30g/片≤22mm头孢噻肟：30g/片≤27mm头孢曲松：30g/片≤25mm氨曲南：30g/片≤27mm任一以上药物进行筛选，出现上述结果疑为ESBL产生株。产超广谱内酰胺酶菌株的检测ESBL：Extended-sp86超广谱β-内酰胺酶阳性确证试验

头孢他定/克拉维酸

头孢噻肟

头孢他定

头孢噻肟/克拉维酸

10mm26mm阳性的表型确证试验的最小抑菌浓度=5mm或者头孢噻肟（或头孢他定）/克拉维酸比单独的头孢噻肟（或头孢他定）的抑菌圈直径要更大些（仅一对需要被证明是阳性的）

超广谱β-内酰胺酶阳性确证试验头孢他定/克拉维酸头孢噻肟87临床意义ESBLs菌株主要为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，其他的肠杆菌科细菌和非法酵菌中亦可存在可水解各种广谱β-内酰胺类抗生素包括第三代的头孢他啶、头孢噻肟、头孢曲松以及头孢吡肟和氨曲南等含氧亚氨基侧链的头孢菌素多数可被酶抑制剂如克拉维酸、舒巴坦、三唑巴坦所抑制对亚胺培南、美罗培南等碳青霉烯类高度敏感，对头霉素类、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/三唑巴坦等酶抑制剂复方制剂多数仍呈敏感对具非β-内酰胺结构的抗菌药物如氨基糖苷类、氟喹酮类等的耐药率亦较非产酶株高临床意义ESBLs菌株主要为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，其他的88产与非产ESBLs大肠埃希菌对抗菌药的耐药率（%）抗菌药物耐药率抗菌药物耐药率产ESBL(8214株)非产ESBL(6991株)产ESBL(8214株)非产ESBL(6991株)阿米卡星5.71.8头孢哌酮/舒巴坦8.33.4庆大霉素56.536.6头孢西丁19.711.7哌拉西林96.846.9亚胺培南0.81.0哌拉西林/他唑巴坦4.62.9美罗培南3.52.8头孢唑林99.437.9厄他培南1.31.4头孢呋辛98.627.0环丙沙星71.440.9头孢噻肟98.821.2复方磺胺甲噁唑66.047.2头孢他啶45.110.2磷霉素10.13.1头孢吡肟34.66.4呋喃妥因6.04.5产与非产ESBLs大肠埃希菌对抗菌药的耐药率（%）抗菌药物耐89

AmpCESBL水解头孢西丁

+-水解头孢曲松等三代头孢菌素

+

+酶抑制剂抑制（克拉维酸、他唑巴坦）-

+邻氯西林抑制+-

AmpC酶和ESBL酶的特点AmpC酶的检测AmpCESBL水解头孢西丁+-水解头孢曲松等三代头孢菌90微生物耐药机制课件91临床意义产AmpC酶菌株主要发生在肠杆菌属、普罗威登菌属、摩根菌属、沙雷菌属和假单胞菌属细菌中对头霉素类、第三代头孢菌素和酶抑制剂复方制剂耐药，并可同时对氟喹酮类和氨基糖苷类耐药对第四代头孢菌素头孢吡肟和碳青霉烯类敏感如为ESBLs+AmpC酶菌株第四代头孢菌素头孢吡肟亦耐药临床意义产AmpC酶菌株主要发生在肠杆菌属、普罗威登菌属、摩92碳青霉烯酶分类代表酶常见细菌ClassAKPC,SME,IMI,NMC,GES肠杆菌科细菌(铜绿假单胞菌中少见)ClassB(metallo-b-lactamse)NDM-1,IMP,VIM,GIM,SPM铜绿假单胞菌肠杆菌科细菌不动杆菌属ClassDOXA不动杆菌属碳青霉烯酶分类代表酶常见细菌ClassAKPC,SME93产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的药物敏感性抗菌药物解释抗菌药物解释阿米卡星R头孢吡肟R庆大霉素R头孢哌酮/舒巴坦R氨苄西林R头孢西丁R氨苄西林/舒巴坦R亚胺培南R哌拉西林R美罗培南R哌拉西林/他唑巴坦R厄他培南R头孢唑啉R环丙沙星R头孢呋辛R复方磺胺甲噁唑R头孢噻肟R亚胺培南(Etest)>32mg/ml头孢他啶R美罗培南(Etest)>32mg/ml产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的药物敏感性抗菌药物解释抗菌9416794株大肠埃希菌对抗菌药的耐药率（%）耐药率较低，＜10%16794株大肠埃希菌对抗菌药的耐药率（%）耐药率较低，＜19512121株克雷伯菌属对抗菌药的耐药率（%）耐药率较低，＜20%12121株克雷伯菌属对抗菌药的耐药率（%）耐药率较低，＜2968257株铜绿假单胞菌对抗菌药的耐药率（%）耐药率较低，＜20%8257株铜绿假单胞菌对抗菌药的耐药率（%）耐药率较低，＜29710120株不动杆菌属(鲍曼不动89.2%)细菌对抗菌药的耐药率（%）10120株不动杆菌属(鲍曼不动89.2%)细菌对抗菌药的耐982013年各医院临床分离的广泛耐药株数医院铜绿假单胞菌鲍曼不动杆菌XDR株数／总株数（％）XDR株数／总株数（％）华山医院25/6204.0107/51320.6瑞金医院10/3812.664/51612.4协和医院10/8191.2206/71428.8同济医院93/9589.7456/92249.5广州一附院3/5860.50/5340.0北京医院15/3823.969/25227.4儿科医院0/2770.05/3071.6儿童医院0/1230.0104/23544.3甘肃人民医院0/2150.082/20340.4新疆医大一附院1/7110.10/7180.0安徽医大一附院1/4010.20/4250.0昆明医大一附院1/2380.429/3657.9浙江邵逸夫医院0/4170.00/4940.0中国医大一附院4/4120.083/59713.9天津医大总院0/9750.0116/11799.8四川大学华西医院0/7420.00/10500.0合计163/82572.01321/902414.62012109/72711.51380/782717.62013年各医院临床分离的广泛耐药株数医院铜绿假单胞菌鲍曼不992013年各医院临床分离的广泛耐药株数医院肺炎克雷伯菌肠杆菌科细菌*XDR株数／总株数（％）XDR株数／总株数（％）华山医院60/7008.664/18523.5瑞金医院24/7043.425/24671.0协和医院2/8300.24/31430.1同济医院3/9840.38/31350.3广州一附院1/3800.32/14240.1北京医院19/2348.120/8702.3儿科医院5/5490.96/29740.2儿童医院25/2789.035/11853.0甘肃人民医院0/4280.01/17520.1新疆医大一附院0/10230.00/31510.0安徽医大一附院11/5382.015/20840.7昆明医大一附院95/59615.9113/20885.4

浙江邵逸夫医院5/5840.98/21340.4中国医大一附院0/5550.01/16730.1天津医大总院0/13690.0/40380.0四川大学华西医院0/13010.0/39270.0合计250/110532.3302/378970.82012373/87724.2395/312771.32013年各医院临床分离的广泛耐药株数医院肺炎克雷伯菌肠杆菌100109株碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的敏感性

ShudanChenetal.AAC,2011,p.2493109株碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的敏感性

Shud101Carbapenemases:theVersatileb-LactamasesCarbapenemases:theVersatile102

1033-氨基苯硼酸抑制试验（300g/片）

检测KPC型碳青霉烯酶EDTA协同试验

（292g/片）

检测金属酶3-氨基苯硼酸抑制试验（300g/片）

检测KPC型碳青霉10482株CRE菌株的耐药机制及其MIC范围耐药机制菌株（株）MIC范围(μg/mL)*ETPMEMIMP碳青霉烯酶+ESBLs+膜蛋白异常514->2561->2561->256碳青霉烯酶+ESBLs1164->25664->25616-128ESBL表达+膜蛋白异常*81-1281-1280.25-64碳青霉烯酶+ESBLs+AmpC+膜蛋白异常*64-1282->2568->256膜蛋白异常44-640.25-81-16碳青霉烯酶+膜蛋白异常11286432ESBL表达1422注：膜蛋白异常指膜蛋白缺失或下调表达。ETP：厄他培南；MEM：美罗培南；IMP：亚胺培南。FupinHU,etalJournalofMedicalMicrobiology2012,61:13282株CRE菌株的耐药机制及其MIC范围耐药机制菌株（株）M105产KPC酶菌株的流行传播美、英、法、以色列和巴西等相继报道产KPC-2或KPC-3酶肠杆菌科细菌引起的医院感染暴发流行。2004年美国全国性的耐药监测结果表明，24%的肺炎克雷伯菌携带KPC-2或KPC-3型碳青霉烯酶基因。其中88%的产KPC酶菌株具有相同的基因谱型。1999-2005年MYSTIC监测结果显示，产KPC-2酶菌株已从最初的单一种属细菌扩展至6种不同种属的肠杆菌科细菌。产KPC酶菌株的流行传播美、英、法、以色列和巴西等相继报道产106产KPC酶菌株的流行传播NeilWoodford报道2008年自一女性患者分离出一株产KPC-3酶的肺炎克雷伯菌结果证实该菌与以色列医院分离的一株产碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌具有相同的PFGE指纹图谱。病史调查结果发现，该患者之前曾在这家以色列医院进行治疗，病人在不同国家之间的流动促进了该类菌株流行传播区域的多样化。英国学者Daniel发现一株铜绿假单胞菌所产的KPC-5酶，是从KPC-2型和KPC-4型碳青霉烯酶进化而来，提示产KPC酶菌株的种类正积极地扩散至其他种属的细菌。JAC,2008,62:1261-1264.AAC.2009,53:557-562产KPC酶菌株的流行传播NeilWoodford报道200107利奈唑胺耐药菌株染色体DNA经SmaI酶切后的PFGE电泳图所有临床株的PFGE谱型完全一致，且与分离自杭州地区的cfr基因阳性对照株也相同利奈唑胺耐药菌株染色体DNA经SmaI酶切后的PFGE电泳图108以色列及美国产KPC酶肺炎克雷伯菌的PFGE结果以色列及美国产KPC酶肺炎克雷伯菌的PFGE结果109希腊产KPC-2酶肺炎克雷伯菌引起的暴发流行ICU病房分离的50株产酶菌株中，82%的菌株为同一克隆菌株。同一克隆菌株CID2010;50:364–73希腊产KPC-2酶肺炎克雷伯菌引起的暴发流行ICU病房分离的11025株产KPC-2型酶的弗劳地柠檬酸杆菌其中15株为同一谱型华山医院产KPC-2型碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌

12株产KPC-2型酶的产气肠杆菌其中7株为同一谱型25株产KPC-2型酶的弗劳地柠檬酸杆菌华山医院产KPC-2111含KPC酶质粒在不同细菌间的播散AAC,2009;53(8):3365含KPC酶质粒在不同细菌间的播散AAC,2009;53(112含KPC质粒的结构AAC,2014,Epub含KPC质粒的结构AAC,2014,Epub113加强院感监测刻不容缓CRE菌株筛选：美国CDC推荐的方法加强院感监测刻不容缓CRE菌株筛选：美国CDC推荐的方法114肛拭子和湿化瓶分离的菌株为同一克隆菌株PFGE同源性分析结果1、肛拭子标本分离株2、湿化瓶水分离株肛拭子和湿化瓶分离的菌株为同一克隆菌株PFGE同源性分析结果115对神经外科病房的环境标本及工作人员采样84.2%（16/19）的标本分离出碳青霉烯类药物耐药的革兰阴性杆菌或甲氧西林耐药葡萄球菌。结果：CRE菌株筛选标本细菌ETPIMPMEM神经外科护士1的手肺杆666神经外科13床台面、左右床位杆肺杆666神经外科25床左边床位杆、输液泵的屏幕肺杆666神经外科26床的柜子台面肺杆686神经外科护士2的手肺杆62822神经外科13床的氧气湿化瓶中的水鲍曼71922神经外科25床湿化瓶中的水产气162225对神经外科病房的环境标本及工作人员采样结果：CRE菌株筛选标116CRE菌株感染或定植的危险因素：严重的基础疾病；氟喹诺酮类药物的应用；广谱头孢菌素的应用；接受碳青霉烯类药物的治疗；留驻重症监护病房时间长；分离CRE前患者至少接受1种以上广谱抗菌药的治疗产KPC型酶肺炎克雷伯菌感染亦为导致住院患者死亡的独立危险因素HusseinK.,etal,InfectControlHospEpidemiol.2009;30:666–671LeanneB.,etal,InfectControlHospEpidemiol.2009;30:1180–1185.CRE菌株感染或定植的危险因素：严重的基础疾病；Hussei117床位更换更换1次：31(43.1%)更换2次：21(29.2%)更换3次：12(16.7%)更换4次：5(6.9%)更换5次：2(2.8%)更换7次：1(1.4%)

危险因素：床位更换和插管留置具统计学意义床位更换无更换：14(70.0%)更换1次：6(30.0%)CRE菌株P=0.000CSE菌株床位更换危险因素：床位更换和插管留置具统计学意义床位更换CR118产KPC酶肺炎克雷伯菌所致感染死亡率高Jeon等报告由产KPC3肺炎克雷伯菌引起的14名患者中有8名死亡，死亡率达57.1％（8/14,57.1％）Marchaim等报告产与非产KPC-2型碳青霉烯酶菌株引起感染的病死率分别为33.3%（11/33）和9.1%（3/33），产酶株感染的病死率远高于非产酶菌株（P=0.038）Patel等的研究结果显示，碳青霉烯抗生素耐药肺炎克雷伯菌感染的病死率比敏感株感染者高3倍。Souli等研究发现，ICU病房产KPC-2型酶肺炎克雷伯菌感染患者的病死率高于非ICU患者，两者分别为58.8%、37.5%。JeonMH.,etal,DiagnMicrobiolInfectDis,2008;62:402–406MarvhaimD.,etal,Antimicrob.AgentsChemother.2008,52(4):1413-1418SouliM.,etal,ClinInfectDis,2010;50:364–373.产KPC酶肺炎克雷伯菌所致感染死亡率高Jeon等报告由产K1192.耐药性的防治措施合理使用抗菌药物严格执行消毒隔离制度加强药政管理新抗菌药物的寻找和研制，针对耐药发生的机制，抗菌药物的结构开发新药。2.耐药性的防治措施合理使用抗菌药物120某医院2007年对中央空调出风口采样某医院2007年对中央空调出风口采样121手上的细菌手上的细菌1222012年，浙江温州某学校出现群体性腹泻事件。怀疑是饮水机细菌总数严重超标所致。温州市疾病预防控制中心对某托幼机构消毒仅半个月的饮水机进行了细菌数抽检5份冷水样本中有3份菌落总数超标，其中最‘脏’的水样竟超标339倍。而5份热水水样则全部达标。2012年，浙江温州某学校出现群体性腹泻事件。怀疑是饮水机细123产NDM-1菌株的携带率高10273位患者的粪便中，14.8%分离到产NDM-1的细菌

产NDM-1菌株的携带率高10273位患者的粪便中，14.8124产KPC型碳青霉烯酶菌株感染的医院感染控制

手卫生和加强环境消毒等医院感染控制措施，可有效降低ICU病房中碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌感染的发生率。干预措施产KPC型碳青霉烯酶菌株感染的医院感染控制手卫生和加强环境125微生物耐药机制课件126环境清洁非常重要环境清洁非常重要127微生物耐药机制课件128本章节主要掌握的内容细菌有哪些主要的耐药机制？其中哪一个机制最具临床意义？耐药基因的传播有哪几种方式？其中以哪种方式最具临床意义？目前临床上耐药性变迁主要表现在哪些方面？举例说明临床上主要有哪些重要的耐药细菌？名词解释：MRSA、MSSA、MRCNS、MSCNS、CA-MRSAVRE、VISA、VRSA、hVISAPSSP、PISP、PRSP、ESBLs、KPC、MDR、XDR、PDR本章节主要掌握的内容细菌有哪些主要的耐药机制？其中哪一个机制129微生物耐药机制课件130抗生素渗透屏障作用与外排泵抗生素渗透屏障作用与外排泵131耐药机制4.其他细菌代谢状态的改变：对氨基苯甲酸产量（PABA）营养缺陷、L型细菌（无细胞壁）、芽胞细菌菌膜的形成抗菌药物不能透过整个菌膜菌膜对抗菌药物的敏感性降低菌膜内的细菌具有独特的生物学特征耐药机制4.其他132甲氧西林耐药葡萄球菌MRSA：甲氧西林耐药金葡菌Methicillin–resistantStaphylococcusaureus含mecA基因，编码PBP2aMSSA:甲氧西林敏感金葡菌Methicillin–susceptibleStaphylococcusaureus不含mecA基因，没有PBP2aMRCNS:甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌Methicillin-resistantcoagulasenegativeStaphylococcusMSCNS:甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌Methicillin-susceptiblecoagulasenegativeStaphylococcus甲氧西林耐药葡萄球菌MRSA：甲氧西林耐药金葡菌133670株碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌对

抗菌药物的耐药率（CHINET2010）抗菌药R%S%抗菌药R%S%厄他培南1000哌拉西林/他唑91.82.5亚胺培南76.414.6哌拉西林1000美罗培南78.414.5氨苄西林/舒巴96.60.7头孢吡肟83.29.5氨苄西林1000头孢他啶94.13.5阿米卡星52.644.8头孢噻肟1000庆大霉素76.719.4头孢哌酮/舒巴84.73.5环丙沙星79.413.3头孢呋辛1000复方磺胺72.124.3头孢唑啉1000米诺环素37.542.9肺炎克雷伯菌占64.2%；病房依次为：ICU(36.3%)、神经外科(10%)670株碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌对

抗菌药物的耐药率（CH134MSSA(1495株)与MRSA(1916株)的耐药率（%）

(CHINET2008)MSSA(1495株)与MRSA(1916株)的耐药率（%）135汪复：中国抗感染化疗杂志2005：5（1）：1－3耐药肠球菌感染耐万古霉素肠球菌属感染：新开发品种如利奈唑胺、奎奴普丁/达福普汀等，但后者对粪肠球菌无作用。根据药敏结果联合用药（磷霉素、利福平、氟喹诺酮类、米诺环素等）。磷霉素联合呋喃妥因可能对尿路感染有效汪复：中国抗感染化疗杂志2005：5（1）：1－3耐药肠球菌1363-氨基苯硼酸抑制试验（300g/片）

检测KPC型碳青霉烯酶EDTA协同试验

（292g/片）

检测金属酶3-氨基苯硼酸抑制试验（300g/片）

检测KPC型碳青霉137产KPC酶菌株的流行传播NeilWoodford报道2008年自一女性患者分离出一株产KPC-3酶的肺炎克雷伯菌结果证实该菌与以色列医院分离的一株产碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌具有相同的PFGE指纹图谱。病史调查结果发现，该患者之前曾在这家以色列医院进行治疗，病人在不同国家之间的流动促进了该类菌株流行传播区域的多样化。英国学者Daniel发现一株铜绿假单胞菌所产的KPC-5酶，是从KPC-2型和KPC-4型碳青霉烯酶进化而来，提示产KPC酶菌株的种类正积极地扩散至其他种属的细菌。JAC,2008,62:1261-1264.AAC.2009,53:557-562产KPC酶菌株的流行传播NeilWoodford报道200138临床微生物学概论(二)

─细菌的耐药机制及其临床意义临床微生物学概论(二)

─细菌的耐药机制及其临床139抗菌药物对细菌的作用机制细菌对抗菌药物的耐药机制细菌耐药性的遗传学基础主要细菌的耐药性变迁及其防治本课内容抗菌药物对细菌的作用机制本课内容140微生物耐药机制课件141微生物耐药机制课件142微生物耐药机制课件143微生物耐药机制课件144微生物耐药机制课件145微生物耐药机制课件146微生物耐药机制课件147微生物耐药机制课件148微生物耐药机制课件149微生物耐药机制课件150微生物耐药机制课件151微生物耐药机制课件152（一）抗菌药物的作用机制阻碍细菌细胞壁合成：导致细菌在低渗透压环境下膨胀破裂死亡，使细菌不能生长繁殖。内酰胺类、糖肽类与细菌细胞膜相互作用：增强细菌细胞膜的通透性、打开膜上的离子通道，破坏其屏障作用，让细菌内部的有用物质漏出菌体或电解质平衡失调而死。多黏菌素与细菌核糖体或其反应底物（如tRNA、mRNA）相互所用：抑制蛋白质的合成，使细菌无法合成存活所必需的结构蛋白和酶。大环内酯类、氨基糖苷类阻碍细菌DNA的复制和转录：阻碍DNA复制将导致细菌细胞分裂繁殖受阻，阻碍DNA转录成mRNA则导致后续的mRNA翻译合成蛋白的过程受阻。喹诺酮类抑制细菌叶酸代谢等。磺胺类（一）抗菌药物的作用机制阻碍细菌细胞壁合成：导致细菌在低渗透153DNA引导的RNA多聚酶链霉素庆大霉素、妥布霉素（氨基糖苷类）阿米卡星蛋白合成（tRNA）莫匹罗星DNARNA503050305030核糖体THFADHFAPABADNA旋转酶（解旋、螺旋）喹诺酮类利福平蛋白合成（50S抑制剂）红霉素氯霉素克林霉素蛋白合成（30S抑制剂）细胞膜多粘菌素氯霉素乙酰转移酶细胞壁合成环丝氨酸万古霉素、替考拉宁杆菌肽青霉素类头孢菌素类拉氧头孢碳青霉烯类叶酸代谢甲氧苄啶磺胺类药周质空间β-内酰胺酶氨基糖苷类钝化酶四环素大观霉素细菌模式图-抗菌药物作用机制DNA引导的RNA多聚酶链霉素DNARNA503050305154（二）细菌主要的耐药机制灭活酶与钝化酶的产生抗生素渗透屏障作用靶位结构改变细菌代谢状态或营养缺陷细菌菌膜形成X外排灭活渗透障碍靶位改变（二）细菌主要的耐药机制灭活酶与钝化酶的产生细菌代谢状态或营155细菌耐药的主要机制灭活酶产生抗生素靶位点改变孔蛋白改变，细胞壁/膜通透性改变细菌耐药的主要机制灭活酶产生抗生素靶位点改变孔蛋白改变，细胞156喹诺酮类药物耐药基因β-内酰胺类药物耐药基因喹诺酮类药物耐药基因β-内酰胺类药物耐药基因157多种抗菌药物耐药主动外排↑抗菌药物D2孔蛋白缺失

MexA-MexB-OprM碳青霉烯酶Abs失活胞内周间隙铜绿假单胞菌对碳青霉烯类的耐药机制多种主动外排↑抗菌药物D2孔蛋白缺失MexA-MexB-158抗生素渗透屏障作用与外排泵抗生素渗透屏障作用与外排泵159靶位结构改变药物细菌靶位万古霉素敏感肠球菌万古霉素耐药肠球菌靶位结构改变药物细菌靶位万古霉素敏感肠球菌万古霉素耐药肠球菌160细菌利用酶系统，把对氨基苯甲酸合成叶酸，维持自身生长需要。磺胺类药物与氨基苯甲酸化学结构相似，当磺胺类药物浓度较高时，可深入细菌体内竞争二氢叶酸合成酶，生成异常的核酸拟似物，使细菌不能生成菌体所必需核酸而死亡。对磺胺类药物产生耐药性的细菌，可通过调整代谢环节，产生大量的对氨基苯甲酸(20-100倍)，抵消磺胺药对酶的竞争，从而使药物失去抑菌作用。细菌代谢状态改变

营养缺陷等竞争力极强细菌利用酶系统，把对氨基苯甲酸合成叶酸，维持自身生长需要。细161内酰胺环Penicillinase灭活酶与钝化酶的产生内酰胺环Penicillinase灭活酶与钝化酶的产生162细菌菌膜形成细菌菌膜形成163耐药机制1.灭活酶和钝化酶的产生β-内酰胺酶氨基糖苷类钝化酶氯霉素酰基转移酶MLS类抗生素钝化酶（Macrolide-LicosamideStreptogramin）耐药机制1.灭活酶和钝化酶的产生164β-内酰胺酶的分类ESBLβ-内酰胺酶(质粒)(染色体)(质粒)(染色体或质粒)AmpCMLOXA丝氨酸酶金属酶A类酶C类酶D类酶B类酶Extended-spectrum-lactamasemetallo-lactamaseβ-内酰胺酶的分类ESBLβ-内酰胺酶(质粒)(染色体)(165底物谱青霉素酶：青霉素类头孢菌素酶广谱酶：包括上述抗菌药，第一和第二头孢菌素超广谱酶：包括上述抗菌药、第三和第四代头孢菌素AmpC酶：包括上述抗菌药、头霉素类碳青霉烯酶：包括上述抗菌药、碳青霉烯类丝氨酸碳青霉烯酶金属碳青霉烯酶遗传学基础质粒酶、染色体酶可诱导性体质酶（固有的）、诱导酶重要β-内酰胺酶及其底物谱底物谱重要β-内酰胺酶及其底物谱166ESBLs的分类

目前已超过200种DatafromLaheyClinic/Studies/ESBLs的分类

目前已超过200种DatafromLa167我国已报道的TEM型和SHV型ESBLsSHV酶城市TEM酶城市SHV-2浙江TEM-1河南SHV-5浙江、四川TEM-10安徽SHV-10四川、TEM-19四川SHV-12安徽、北京、广州、河南、上海、武汉、浙江、TEM-28四川TEM-29四川SHV-18上海TEM-105浙江SHV-28深圳、浙江TEM-116广州SHV-56安徽、北京、广州、湖南、昆明、上海、四川、浙江TEM-128浙江TEM-144福州SHV-59安徽、广州、湖南、昆明、深圳SHV-71广州SHV-89广州我国已报道的TEM型和SHV型ESBLsSHV酶城市TEM168CTX-M型ESBL全球流行图CTX-M型ESBL全球流行图169质粒介导的头孢菌素酶ACT-1,DHA-1,CMY(北京)DHA-1,CIT,ACT-1(上海)DHA-1(浙江)DHA-1,ACT-1(广州)质粒介导的头孢菌素酶ACT-1,DHA-1,CMYDHA-1170我国已报道的KPC型碳青酶烯酶发现酶型菌种质粒株数地区作者发表的杂志和年份2006.9KPC-2肺炎克雷伯菌60kb1浙江张幸国中华检验医学杂志2007.7KPC-2弗劳地柠檬酸60kb1浙江张嵘中华检验医学杂志2007.8KPC-2粘质沙雷菌60kb1浙江张嵘中华微生物和免疫学杂志2008.1KPC-2粘质沙雷菌/6山东常霞医学检验与临床2008.4KPC-2肺炎克雷伯菌/5上海沈继录中华检验医学杂志KPC-2弗劳地柠檬酸/11KPC-2粘质沙雷菌/12008.5KPC-2肺炎克雷伯菌56kb12江苏蒯守刚临床检验医学2008.9KPC-2肺炎克雷伯菌60kb10浙江冯雅君浙江医学2010年KPC-2肠杆菌科细菌/30北京杨启文AAC2011年KPC-2肺炎克雷伯菌/109上海陈淑丹AAC2011年KPC-3大肠埃希菌/3上海蒋晓飞EJCMID我国已报道的KPC型碳青酶烯酶发现酶型菌种质粒株数地区作者发171已经发现的KPC型碳青霉烯酶（20种）

Klebsiellapneumoniaecarbapenemase(KPC)KPC型年份国家细菌KPC型年份国家细菌KPC-11996美国肺炎克雷伯菌KPC-3

2003美国阴沟肠杆菌KPC-21998美国肺炎克雷伯菌KPC-42004苏格兰肠杆菌属KPC-21998美国肠炎沙门菌KPC-52008波多黎各肺炎克雷伯菌

2004中国肺炎克雷伯菌KPC-62008波多黎各肺炎克雷伯菌

2005法国肺炎克雷伯菌KPC-72008美国肺炎克雷伯菌

2005哥伦比亚肺炎克雷伯菌KPC-82008波多黎各肺炎克雷伯菌

2005以色列大肠埃希菌KPC-92009