电化学发光原理及仪器课件

Elecsys原理及仪器免疫检测技术的发展电化学发光系统及其原理电化学发光仪器性能特点电化学发光技术的优势电化学发光检测项目免疫检测技术的发展电化学发光系统及其原理电化学发光仪器性能特点电化学发光技术的优势电化学发光检测项目1959年Berson和Yalow建立了放射免疫分析方法（RIA），大大提高了免疫测定的敏感度，这种标记免疫测定开拓了医学检验的新领域。

缺点半衰期短，试剂货架期不长。标记物不断变化，试剂批间、批内变化大，标准曲线不能保存。反应时间长，操作步骤很难自动化。使用放射性核素，对人体有一定的危害性。分析的限度为10mol/ml或10g/ml。在一定时期内曾被采用，正在被逐步取代。放射免疫测定法

1971年Engvall和Perlman建立了固相酶免疫测定方法（ELISA），这种非放射标记免疫测定在临床检验，特别是感染性疾病的诊断中取得了广泛应用。酶免疫测定法缺点试剂制备困难。操作步骤复杂，耗时长。影响因素多，质量控制难以保证。最后测定的是颜色的光密度，其精密度和敏感性不如发光免疫技术。各实验室操作不规范，质量难以保证。有学者认为ELISA技术已逐步走向退化，可能会逐步退出临床实验室。化学发光免疫测定法出现于20世纪90年代初。由于最后测定的是光子的量，不但对检测者无害，其敏感度和精密度均优于RIA，而且试剂较稳定，并可进行全自动分析。

化学发光免疫测定法采用标记催化酶（如辣根过氧化物酶）或化学发光分子（如鲁米诺）的方法，其化学反应一般不稳定，为间断的、闪烁性发光，而且在反应过程中易发生裂变，导致反应结果不稳定。检测时需对结合相与游离相进行分离，操作步骤多。反应原理相对落后。缺点电化学发光免疫技术电化学发光免疫测定法（ECLIA）发展于1996年，它在发光反应中加入了电化学反应，是继放射免疫、酶免疫、化学发光免疫测定之后的新一代标记免疫测定技术，是电化学和免疫测定相结合的产物。世界公认的最先进的临床免疫检测技术Elecsys系列全自动免疫分析仪1996年德国宝灵曼公司推出Elecsys2010系统世界上第一台应用电化学发光技术的全自动免疫分析仪1998年罗氏公司收购宝灵曼公司2001年罗氏推出电化学发光免疫模块E170罗氏是全球唯一应用电化学发光免疫技术制造仪器的厂商2006年罗氏推出电化学发光免疫模块e6012007年罗氏推出电化学发光免疫模块e411电化学发光反应的原理三联吡啶钌和三丙胺在电极表面发生的电化学发光反应

SandwichPrinciple双抗夹心法largemolecularweightantigensaremeasured

directlyproportionalmeasurement,means:lowsignal=lowconcentrationhighsignal=highconcentration

e.g.TSH,CA15-3II–assays双抗夹心法&桥联免疫法

CompetitivePrinciple竞争法smallmolecularweightantigensaremeasured

indirectlyproportionalmeasurement,means:highsignal=lowconcentrationlowsignal=highconcentration

e.g.T4,FolateII–assays竞争法电化学发光免疫系统核心原理电化学发光磁性微粒子固相亲和素-生物素间接包被流动池检测系统简单试剂管理，先进的定标概念直径最小–2.8um表面积大而均一磁性微粒子呈悬浮状态使异相反应变成类均相反应加快反应速度提高反应灵敏度磁性微粒子固相载体的优点专利的链霉亲和素-生物素包被技术由磁铁将结合标记Ag-Ab复合物的磁性微粒（结合相）吸附于电极上，游离相被缓冲液冲走；电极表面的电化学发光的信号检测完成后，磁铁移走并使用系统清洁液冲走电极表面的结合标记Ag-Ab复合物的磁性微粒子；实现了结合相与游离相的全自动分离流动池检测系统简单的试剂管理适用于电化学发光全自动免疫分析仪各种型号Elecsys2010andtheModularE1702维条形码自动输入全部信息试剂联体包成分独立稳定好无需配制，打开即用自动开闭试剂瓶盖，有效地防止挥发等两点定标，节约成本二维条码系统，信息量大先进的两点定标方式·罗氏研发部：建筑在参考标准上的Mastercalibratorcurve：10-12point·每批试剂：Lot-specificmastercalibrationcurve(n=5or6)·客户端：换批号两点定标免疫检测技术的发展电化学发光系统及其原理电化学发光仪器性能特点电化学发光技术的优势电化学发光检测项目真正的连续随机进样18个试剂通道，带有冷藏装置试剂盒自动开/关样本盘30个样本位置，样本架型75个样品位，可随时插入急诊条形码和原始管样本系统，以及主动样本识别功能检测速度：86测试/小时（真实速度）主动的试剂识别功能彩色液晶触摸屏（键盘）具备液面检测，凝块/气泡自动探测功能检测结果数据自动传送 可连接中文数据系统e411分析仪系统规格与参数170测试/小时25个试剂通道,温控在20°C样本架传送式进入利用一次性加样吸头防范样本间交叉污染同时在仪器上1000个吸头和1000个分析杯在运行过程中可以随时添加吸头和分析杯，二维条形码识别系统试剂包装100/200个测试，自动开盖功能最大四个模块组合在一起与全自动生化分析模块（D/P）任意组合E170cobase601170测试/小时25个试剂通道,温控在20°C样本架传送式进入利用一次性加样吸头防范样本间交叉污染同时在仪器上1000个吸头和1000个分析杯在运行过程中可以随时添加吸头和分析杯，二维条形码识别系统试剂包装100/200个测试，自动开盖功能最大2个e模块组合成ee与生化模块（c501）组合成ce，cee，cce全新的cobaselibrary概念及时得到更新信息电子版试剂说明书电子版定标、质控条形码相关通知远程诊断服务

软硬件升级远程帮助平台系统信息分析系统参数备份

样本装载容量多达150个样本立即的急诊样本处理急诊吸样等待时间低于1分钟全自动的质控功能QC-样本可长期在机周期QC定标后自动触发质控自动重做功能RackRotor=重做缓部区重做及反射样本测试不受限制TheCoreUnit快速灵活的样本管理功能快速灵活的样本管理功能免疫检测技术的发展电化学发光系统及其原理电化学发光仪器性能特点电化学发光技术的优势电化学发光检测项目同行业中最先进的分析原理专利的电化学发光分析技术（ECL）

最好的化学发光标记物-三联吡啶钌分子量小，结构简单。可以标记于抗原，抗体，核酸等各种分子量，分子结构的物质。从而具有最齐全的检测菜单。三联吡啶钌为水溶性，且高度稳定的小分子物质。保证电化学发光反应的高效和稳定，而且避免了本底噪声干扰。

最先进的包被技术采用罗氏公司专利的链霉亲和素-生物素包被技术。链霉亲和素-生物素是最牢固和特异的结合。保证了牢固的包被效果和特异的检测结果。电化学发光技术的优势电化学发光技术的优势特殊的磁性微粒子载体以及分离技术由聚苯乙烯包被的磁性微粒子为载体，直径仅为2.8um。同类型产品最小提供类均相的反应环境，增加反应面积，提高反应速度；保证最终检测结果的高灵敏度；利用磁性分离技术，实现全自动化分析。与其它几种标记免疫测定技术相比，电化学发光具有更多的优点：1.

高灵敏度，检测下限达pmol；2.

线形范围宽，达7个数量级；3.

快速，出第一个结果的时间仅需数分钟；4.

应用范围广，可以同样的灵敏度和线性范围检测各种物质，包括DNA；5.

试剂稳定，无污染和衰变问题；6.

自动化程度高。免疫检测技术的发展电化学发光系统及其原理电化学发光仪器性能特点电化学发光技术的优势电化学发光检测项目甲状腺项目肿瘤标志物性激素类肝炎系列心脏功能贫血诊断指标骨质疏松其它项目Elecsys系列全自动分析仪检测项目最齐全的检测项目菜单甲状腺项目

TSH促甲状腺激素（查明甲状腺功能的初筛试验）T3三碘甲状腺原氨酸（作用于靶器官的主要甲状腺激素）T4甲状腺素（诊断甲亢、甲低）FT3游离三碘甲状腺原氨酸FT4游离甲状腺素TG甲状腺球蛋白（甲状腺体完整性的特殊标志物）T－uptake甲状腺素结合力（了解甲状腺素的结合位点数）Anti-TG抗甲状腺球蛋白抗体（增高见于慢性桥本甲状腺炎等）Anti-TPO抗甲状腺过氧化物酶抗体肿瘤标志物AFP甲胎蛋白（原发性肝癌最特异的肿瘤标志物）CEA癌胚抗原（增高多见于结肠癌患者）CA125糖类抗原125（最可靠的卵巢癌诊断指标）CA15-3糖类抗原15-3（主要用于乳腺癌的监测和筛选）CA19-9糖类抗原19-9（胰腺癌敏感性最高的标志物）CA72-4糖类抗原72-4（胃肠道和卵巢癌的肿瘤标志物）Cyfra21-1非小细胞肺癌抗原NSE神经元特异性烯醇化酶（小细胞肺癌检出的阳性率高）PSA前列腺特异性抗原（前列腺癌的筛选与早期诊断）FreePSA游离前列腺特异性抗原S100S100蛋白质(辅助诊断恶性黑色素瘤患者能脑损伤患者)性激素类Cortisol皮质醇（最主要的糖皮质类固醇）Estradiol雌二醇（生物活性最强的雌激素）FSH促卵泡生成激素LH促黄体生成激素HCG＋β人绒毛膜促性腺激素+β亚单位HCGSTAT总HCG（2010及e411）Progesterone孕酮Prolactin泌乳素Testosterone睾酮DHEA-S硫酸脱氢雄甾酮（辅助诊断多毛症和女子男性化）SHBG性激素结合球蛋白协同调节和刺激性腺的发育和功能肝炎系列HBsAgII乙肝表面抗原（检测HBV感染的首选标志物）Anti-HBs乙肝表面抗体HBeAg乙肝e抗原（阳性提示大量病毒存在）Anti-Hbe乙肝e抗体Anti-HBc乙肝核心抗体Anti-HBcIgM乙肝核心抗体IgM

HBsAgConfirmatory乙肝表面抗原确证实验Anti-HAV甲肝抗体Anti-HAVIgM甲肝抗体IgM心脏功能CK-MB肌酸肌酶同功酶（诊断心肌缺血性损伤的重要指标）Digoxin地高辛Digitoxin洋地黄Myoglobin肌红蛋白（诊断急性心肌梗死的的重要指标）TroponinT肌钙蛋白T

（心肌损伤特异的标志）pro-BNP脑利钠肽前体（反映心衰的标志物）贫血诊断指标Ferritin铁蛋白B12维生素B12（辅助诊断巨幼细胞性贫血）Folate叶酸（辅助诊断巨幼细胞性贫血）RBCFolate红细胞内叶酸（真实反映组织中叶酸的含量）骨质疏松

Β-CrossLapsβ-胶原降解产物N-OsteocalcinN端骨钙素PTH甲状旁腺激素P1NP总I型胶原氨基端延长肽其它项目IgE免疫球蛋白EHIVcombi艾滋病抗原抗体联合试验ACTH促肾上腺皮质激素INSULIN胰岛素C-PEPTIDEC肽ElecsysRubellalgG

ElecsysRubellalgMElecsysToxolgGElecsysToxolgMElecsysCMVlgGElecsysCMVlgMTORCH用于孕妇的产前检查1、ElecsysAnti-HCV

2、21三体（唐氏综合症）评估项目及软件