弯曲菌属Campylobacter 的检验

1、弯曲菌属Campylobacter 的检验一类呈逗点状或S形的革兰氏阴性杆菌，广泛分布于动物界，其中有些可引起动物和人类腹泻、胃肠炎和肠道外感染。目前弯曲菌属有18个种（含亚种），对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌的胎儿亚种，前者引起人类急性腹泻，后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等，其次是胎儿弯曲菌和大肠弯曲菌等。 1983年分离的幽门弯曲菌则与慢性胃炎和胃溃疡、十二指肠溃疡有关。兽医临床上常见的有五个种（含亚种）：空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌（胎儿亚种和性病亚种）、小肠弯曲菌、幽门弯曲菌。其中以空肠弯菌最多见，胎儿亚种次之。致病性（一）形态与染色1、0.2-0.41.5-3.0m；

2、G-, 呈弧形、S形或海鸥展翅状，不易着色；2、无芽孢，一端或两端各有一根鞭毛，运动活泼，形态似霍乱弧菌；3、从微需氧到厌氧，CO2有利于其生长。（二） 培养特性微需氧，最适生长环境: 氧气5、二氧化碳10、氮气85；通常42初分离空肠弯和大肠弯曲菌，其他菌株37生长良好。营养要求高，普通培养基不生长，常用含头孢哌酮的选择性培养基，以抑制肠道正常菌群。含血的Skirrow培养基、头孢哌酮-万古霉素-两性霉素琼脂培养基（CVA）和不含血的碳-头孢哌酮-去氧胆酸盐（CCDA）、碳基选择性培养基（CSM）和半固体动力培养基等常用于分离该属的细菌。在凝固血清和血琼脂培养基上培养36小时可见无色半透明毛

3、玻璃样小菌落，单个菌落呈中心凸起，周边不规则，无溶血现象。（四） 抵抗力抵抗力较弱，易被干燥、直射日光及弱消毒剂所杀灭，56、5min可被杀死。但耐寒，在4冰箱或水中可存活4周。对红霉素、新霉素、庆大霉素、四环素、氯霉素、卡那霉素等抗生素敏感。但近年发现了不少耐药菌株。 （五）抗原构造本菌抗原构造比较复杂，与肠道杆菌一样具有O、H和K抗原。根据O抗原，可把空肠弯曲菌分成45个以上血清型。 目前分型没有被广泛应用。（六）毒力本菌具有粘附定居和入侵上皮细胞的能力，通过产生的肠毒素、细胞毒素和内毒素等多种毒力因子致病，病变部位通常在空肠和回肠，也可蔓延至结肠。（七）致病性 可引起人畜急性传染病弯曲菌

4、病。 1、带菌者：动物和人类，经肠道或生殖道排出； 2、感染：经口(污染的食物或水)；经产道感染婴儿； 3、临床症状：潜伏期1-10d，一般3-5d。 （1）肠炎：腹泻、腹痛、呕吐及发热等，初为水样，继而转为粘液便，少数呈脓血便。 （2）肠道外感染：可致菌血症、心内膜炎、脑脊髓膜炎、血栓性静脉炎、关节炎、肺脓肿和腹膜炎等。 （3）母畜感染：上呼吸道症状、肺炎、发热及菌血症；死胎或流产；新生畜败血症及脑脊髓膜炎。（八）微生物学诊断1 粪便直接镜检，G-呈弧形、呈投镖式运动。2 核酸检测粪便 细菌鉴定（九） 检验程序1. 标本采集 采集粪便及剩余食物，立即送检，或将标本接种于卡-布运送培养基中送检

5、；对于高烧和脑膜炎者，于用药前抽取静脉血或脑脊液，注入布氏肉汤送检。2. 细菌检验（1）显微镜检查 悬滴法动力检查：显微镜下观察有无螺旋状或投标样运动，脑脊液标本经离心沉淀后再制成悬滴标本检查； 染色标本检查：取新鲜粪便或脑脊液离心沉淀物涂片、革兰氏染色，找革兰氏阴性、弯曲呈S状或螺旋状杆菌，鞭毛染色见一端或两端单根鞭毛；（2）分离培养 将标本直接接种于选择性培养基上，也可将标本过滤后培养，弯曲菌形成的菌落为灰色、扁平、表面湿润、圆形凸起、边缘不规则，常沿穿刺线蔓延生长，血平板不溶血，布氏肉汤中呈均匀混浊。3. 细菌鉴定弯曲菌属的鉴定较复杂，必须综合多种试验确定。通常氧化酶阳性、革兰染色阴性、弯曲呈S形或螺旋形，进一步鉴定试验：马尿酸盐水解试验：鉴别空肠弯曲菌空肠亚种和多氏亚种的重要试验；前者阳性，后者阴性。醋酸吲哚水解试验：空肠弯曲菌为阳性而胎儿弯曲菌为阴性。萘啶酸、头孢噻吩耐药试验： 空肠弯曲菌和大肠弯曲菌对萘啶酸敏感，对头孢噻吩耐药； 胎儿弯曲菌对萘啶酸