临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立

1、临床基因扩增检验实验室的设置及质量管理体系的建立临床基因因扩增检检验实验验室的设设置依据：卫卫生部颁颁发的临床基因因扩增检检验实验验室管理理暂行办办法（卫医发发200210号）临床标本本的接收收通常的工工作流程程：标本采集集血血清清分离编号保保存或检检测应在四个个测定区区域之外外的地方方或区域域内接收收接收的标标本应收收集在原原始容器器中在核酸提提取时带带入至标标本制备备区理想的PCR实验室设设置A产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊工作流向扩增区标本制备区试剂准备区产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊工作流向扩增区标本制备区试剂

2、准备区理想的PCR实验室设设置B门试剂准备区标本制备区扩增区产物分析区外走廊门门门门试剂准备区标本制备区扩增及产物分析区外走廊门门门门AB试剂准备区标本制备区扩增及产物分析区门门门门空气流向空气流向空气流向走廊走廊试剂准备区标本制备区扩增和产物分析区空气流向空气流向空气流向其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室门试剂准备区标本制备区扩增及产物分析区门门门空气流向空气流向+空气流向+走廊走廊试剂准备区标本制备区扩增和产物分析区空气流向空气流向+空气流向+其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室空气流向临床基因因扩增实实验室设设置的一一

3、般原则则各区独立注意风向向因地制宜宜方便工作作“十六字字口诀”产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊工作流向扩增区标本制备区试剂准备区传递窗传递窗传递窗实验室质质量管理理体系的的建立质量手册册质量体系系程序文文件标准操作作程序(相关记录录表格)质量管理理的内涵涵写你所做做的做你所写写的记录你已已做的分析你已已做的怎样编写写SOP？实验室清清洁SOP要点目的:为了使实实验室台台面、地地面和仪仪器设备备在实用用后，处处于洁净净和无感感染性状状态，以以防止出出现因仪仪器设备备不洁影影响检测测或仪器器使用寿寿命；防防止因实实验室台台面、地地面和仪仪器设备备的生物物传染危危

4、险性造造成实验验室人员员感染，以及防防止实验验室交叉叉污染而而出现假假阳性结结果等。适用范围围应包括括实验室室地面、台面和和仪器设设备等的的清洁。按实验室室台面、地面和和仪器设设备分开开来写各各自的具具体清洁洁方法，要具体体而又有有可操作作性应规定工工作人员员在清洁洁时，必必须按试试剂准备备区标本制备备区扩增(及产物分分析)区方向进进行，不不得逆行行规定每一一工作区区域的清清洁必须须使用专专用的清清洁用具具，不得得混用规定有潜潜在生物物传染危危险性材材料溅出出时的消消毒清洁洁方法生物安全全防护SOP要点明确规定定实验室室工作人人员在进进行哪一一类接触触到有潜潜在生物物传染危危险性的的物品和和材

5、料时时，应使使用哪类类个体生生物安全全防护设设备和用用具制定实验验室内锐锐器物品品的使用用规则制定发生生意外如如手指划划破、血血清溅入入眼内等等情况下下的处理理程序明确有潜潜在生物物传染危危险性的的废弃物物（包括括废弃临临床标本本）拿出出实验室室前的消消毒方法法如高压压或化学学消毒仪器设备备的维护护和校准准SOP责任人维护和校校准的基基本方面面：光路路、滤光光片、波波长、加加热模块块的清洁洁、具体体的校准准点选择择（如加加样器的的校准体体积点选选择、温温度计的的校准温温度点选选择等）、维护护和校准准的具体体方法包包括用具具校准合格格的判断断标准维护和校校准的间间隔时间间仪器设备备的操作SOP按

6、照每台台仪器设设备的使使用说明明书，将将其详细细操作步步骤包括括开机关关机次序序、编程程、调试试、运行行、计算算等按实实际使用用中的先先后顺序序逐项列列出，最最后还应应有使用用的注意意事项。临床标本本的采集集、运送送、接收收和保存存SOP特定标本本采集的的具体方方法步骤骤明确规定定标本的的采集容容器要求求明确标本本的采集集量明确标本本采集后后送到实实验室检检测所能能容许的的最大时时间间隔隔，亦即即标本采采集后，应在多多长时间间内送至至实验室室明确标本本采集后后，在送送至实验验室检测测前的保保存方式式和条件件明确标本本从采集集处运送送至实验验室过程程中所要要求的运运送条件件明确标本本接收时时，签

7、收收的程序序、拒收收的标准准和标本本唯一编编号的规规则规定标本本在实验验室内的的短期（应有具具体时间间）和长长期（应应有具体体时间）保存条条件和要要求制定保证证标本安安全，即即如何防防止标本本丢失、掉换、变质的的措施试剂和消消耗品的的质检SOP试剂质检检的基本本方面，如试剂剂的抗干干扰能力力（主要要是针对对提取试试剂），即对溶溶血、脂脂血标本本扩增抑抑制作用用的了解解。可通通过自行行制备含含已知量量病毒核核酸的不不同程度度溶血或或脂血的的标本进进行质检检。如为为定量检检测试剂剂，还应应包括检检测的重重复性、线性范范围等的的质检，通常使使用2-3份样本进进行检测测即可。如为定定性检测测试剂，则应

8、重重点考察察测定下下限，可可用系列列稀释的的含已知知量靶核核酸的血血清标本本进行核酸提取取用离心心管质检检的基本本方面带滤心吸吸头的质质检主要要是滤心心的密封封性项目检测测、结果果判断、解释和和报告SOP标本进入入实验程程序后的的操作编编号方式式根据所用用试剂盒盒确定的的详细操操作流程程仪器编程程及文件件名的编编写规则则结果判读读的流程程和规则则结果分析析解释的的流程结果报告告流程实验记录录及其管管理SOP日常检验验过程中中应记录录的基本本内容的的规定，如仪器器设备操操作、维维护和校校准过程程及有关关数据；检验试试剂来源源和批号号；检验验标本的的来源和和唯一编编号；试试剂的配配制；实实验环境境

9、条件的的控制记记录；实实验室清清洁的记记录；质质控的记记录；原原始检测测数据及及其推导导记录等等对实验记记录者的的签名方方式的规规定和要要求实验记录录管理的的基本方方面：指指定专门门的管理理人；有有专门的的保存处处如柜子子等；记记录的登登记归档档方法；记录的的借阅及及销毁记记录；记记录保存存的时间间；电子子记录的的备份保保存具体体方法及及保存时时间等室内质量量控制SOP明确室内内质控物物的来源源及浓度度明确所选选用的质质控方法法明确失控控的判断断标准或或所采用用的失控控规则明确失控控后的分分析及处处理措施施参加室间间质量评评价SOP明确规定定室间质质评样本本的接收收记录方方式、保保存条件件及实

10、验验编号规规则明确室间间质评样样本的检检测流程程，要强强调的是是，室间间质评样样本应以以与临床床标本相相同的方方式处理理和检测测明确室间间质评样样本的报报告流程程，即填填写、复复核和签签发如何何进行，由谁负负责明确对返返回结果果的分析析流程和和责任人人明确室间间质评检检测失败败的原因因分析流流程明确如果果测定准准确性出出现问题题后，如如何针对对性采取取措施的的流程投诉处理理SOP明确投拆拆第一接接触人对对投拆的的处理流流程，即即如何记记录、如如何针对对相关投投诉的进进一步处处理程序序、是否否需要报报告和如如何报告告、以及及如何向向投拆人人返回处处理意见见等。可可将投拆拆分为不不同类如如对检验验

11、结果正正确性、服务态态度、报报告单填填写错误误等分别别编写处处理流程程投拆有效效时的如如何改进进和采取取何种措措施的具具体流程程。应非非常具体体并具有有可操作作性临床PCR检验流程程记录表表检验日期期检验项目目：扩增仪中中保存文文件名：使用说明明：1本记录录表须严严格遵循循试剂准准备区标本制备备区扩增区（产物分分析区）单一流流向移动动，严禁禁逆向移移动。2各项工工作执行行后，在在相应叙叙述前的的“”内打“”。3本记录录表最后后与相应应的标本本接收记记录等归归档保存存于扩增增区的专专用文件件柜内，以备查查找。实验前准准备试剂在有有效期内内扩增仪、加样器器和温度度计在校校准的有有效期内内生物安全全

12、柜的滤滤膜在使使用有效效期内消毒溶液液在有效效期内冲眼器内内无菌生生理盐水水在有效效期内离心管、带滤心心吸头已已经过质质检合操作者：试剂准备备区（1区）实验前：打开通风风设备实验台面面清洁（水或70%酒精擦拭拭）冰箱温度度：冷藏藏室（28）；冷冷冻室（182）实验室温温度：（允许范范围：1030）；相对对湿度：（允许范范围：30%70%）PCR试剂来源源：（可直接接列出有有关厂家家名称）批号：检验项目目：本次实验验用量：人份，剩剩余量：人份。其他有关关试剂配配制：按XXX（将有关SOP编号列出出）SOP配制1%含氯消毒毒液毫升；按XXX（将有关SOP编号列出出）SOP配制4NaOH溶液毫升；按

13、XXX（将有关SOP编号列出出）SOP配制0.1%焦磷酸二二乙酯毫升；按XXX（将有关SOP编号列出出）SOP配制毫升；其他：仪器设备备使用：离心机：正常不正常振振荡器器：正常不正常实验后：按XXX（将有关SOP编号列出出）SOP清洁实验验室台面面、地面面、加样样器和离离心机，并进行行紫外照照射30分钟以上上。按XXX（将有关关SOP编号列出出）SOP处理实验验废弃物物。操作者：标本制备备区（2区）实验前：打开通风风设备实验台面面清洁（水或70%酒精擦拭拭）冰箱（柜柜）温度度：冷藏藏室（28）；冷冷冻室（182）实验室温温度：（允许范范围：1030）；相对对湿度：（允许范范围：30%70%）阳

14、性室内内质控物物来源：浓度及批批号：扩增位置置：阴性室内内质控物物来源：批号：扩增位置置：所取理的的标本（对应标标本接收收的唯一一编号）及拟扩扩增位置置：1917252101826311192741220285132129614223071523318162432核酸提取取及加样样过程：按XXX（列出编号号）SOP进行。仪器设备备使用：生物安全全柜：正常不正常恒恒温温仪温度度校准：离心机：正常不正常振振荡器器：正常不正常实验后：按XXX（将有关SOP编号列出出）SOP清洁实验验室台面面、地面面及仪器器设备。按XXX（将有关SOP编号列出出）SOP处理实验验废弃物物。操作者： 扩增及产物分析区（

15、3区）实验前 打开通风设备 实验台面清洁（水或70%酒精擦拭） 实验室温度： （允许范围：1030）；相对湿度： （允许范围：30%70%）扩增仪操作： 开机自检及运行正常 按XXX（列出编号）SOP进行编程、参数设定标准曲线计算值：Slope值： （ ）Intercept值： （ ） r值： （ ）室内质控结果：结果： 填写室内质控记录、描质控图 是否失控：否 是 实验结果：见所附扩增仪打印结果实验后： 按XXX（将有关SOP编号列出）SOP清洁实验室台面、地面及仪器设备。 按XXX（将有关SOP编号列出）SOP处理实验废弃物。 操作者： 失控原因及分析：（失控判断标准及原因分析按XXXSO

16、P进行） 临床PCR实验室标本接收记录唯一编号 姓 名 性 别 病历号 采集时间 接收时间 标本特性 标本状态 以上标本编号从 至 ， 送检人（签字）： 接收人（签字） 以上标本编号从 至 ， 送检人（签字）： 接收人（签字） 以上标本编号从 至 ， 送检人（签字）： 接收人（签字） 男 女 月 日 时 月 日 时 全血 正常 男 女 月 日 时 月 日 时 全血 正常 男 女 月 日 时 月 日 时 全血 正常 男 女 月 日 时 月 日 时 全血 正常 男 女 月 日 时 月 日 时 全血 正常 男 女 月 日 时 月 日 时 全血 正常 男 女 月 日 时 月 日 时 全血 正常 姓名名

17、性性别别病病历号号采采集集时间接接收时间间标标本本特性拒拒收收原因男女月月日日时时月月日日时时全血（列出原原因号）男女月月日日时时月月日日时时全血（列出原原因号） 男女月月日日时时月月日日时时全血（列出原原因号）标本拒收收原因：1患者姓姓名不符符。2标本容容器为非非不含任任何添加加剂的真真空采血血管。3采血量量低于2 ml。4标本采用用肝素抗抗凝。5.容器破损损。6标本采采集后送送检时间间超过6小时。7标本重重度溶血血。8标本脂脂血。9标本不不正确。10其他：临床PCR实验室标标本拒收收记录实验室的的日常工工作管理理工 作项项目目核核查查 点水浴箱、微量恒恒温器（加热模模块）校准及记记录温度度次氯酸钠钠溶液新鲜配制制生物安全全柜先起动运运行30分钟后再再开始工工作室内质控控弱阳性质质控（定定性）有低、中、高浓度度质控（定量）有阴性质控控：原样样本有经历提取取过程的