临床免疫检验的质量控制概述

1、临床免疫检验的质量控制第一节概概述为保证病病人临床床诊疗或或临床实实验研究究的有效效性，临临床实验验室采取取一系列列有效的的措施证证明其测测定数据据能够达达到所确确定的质质量标准准，这就就是质量量保证的的内容。质量保证证(QualityAssurance,QA)为一产品品或服务务满足特特定质量量要求提提供充分分可信性所必要的的有计划的的和系统统的措施施。室内质量量控制（InternalQuality Control,IQC)由实验室工工作人员员，采取一一定的方方法和步步骤，连连续评价价本实验验室工作作的可靠靠性程度度。一、与质质量保证证相关的的定义室间质量量评价（ExternalQuality

2、 Assessment, EQA） 为客客观比较较一实验验室的测测定结果果与靶值值的差异异，由外单位机机构客观地评评价实验验室的结结果，发发现误差差并校正正结果准确度(accuracy):待测物的的测定值值与其真真值的一一致性程程度。偏倚(bias)待测物的的测定值值与一可可接受参参考值之之间的差差异。精密度(precision)在一定条条件下所所获得的的独立的的测定结结果之间间的一致致性程度度。准确度好好的实验验，其精精密度不不一定好好；准确度差差的实验验，其精精密度则则不一定定差；反反之亦然然。测定的精精密度与与准确度度之间的的关系重复性条条件(repeatabilitycondition

3、s)是指在短短的间隔隔时间内内，在同同一实验验室对相相同的测测定项目目使用同同一方法法和同一一仪器设设备，由由相同的的操作者者获得独独立的测测定结果果的条件件。批(Run)在相同条条件下所所获得的的一组测测定。均值（Mean）标准差（Standarddeviation, SD)变异系数数（Coefficientofvariation, CV）正态分布布(Gaussiandistribution)当一质控控物用同同一方法法在不同同的时间间重复多多次测定定，得到到一个两两头低，中间高高，中为为所有测测定值的的均值，左右对对称的“钟形”曲线，又又称高斯斯分布。正态分布布的基本本统计学学含义可可用均数

4、数、标准准差（s）和概率率来说明明。诊断敏感感性（sensitivityofdiagnosis）指将实际际患病者者正确地地判断为为阳性（真阳性性）的百百分率。诊断特异异性（specificityofdiagnosis）指将实际际无病者者正确地地判断为为阴性（真阴性性）的百百分率。二、实验验方法诊诊断效率率评价诊断效率率（efficiency of diagnosis）指能准确确区分患患者和非非患者的的能力。阳性预测测值（positivepredictive value,PPV）是指特定定试验方方法测定定得到的的阳性结结果中真真阳性的的比率。阴性预示示值(negativepredictiveva

5、lue,NPV)是指特定定试验方方法测定定得到的的阴性结结果中真真阴性的的比率。第二节免免疫检检验的质量控控制原则则标本类型型及采集集容器标本采集集时间及及患者准准备内源性干干扰因素素外源性干干扰因素素一、标本本的正确确收集及及处理最常用的的标本：血液，包包括血清清、血浆浆和全血血。唾液液或尿液液 。建议采用用真空采血血管及蝶蝶形针具具，以免直直接接触触血液。采集容容器最好好为一次次性无菌菌密闭容容器。标本类型型及采集集容器标本采集集时间及及患者准准备激素和治治疗药物物感染性病病原体抗抗原、抗抗体肿瘤标志志物特定蛋白白内源性干干扰因素素 类风湿因因子补体异嗜性抗抗体治疗性抗抗体自身抗体体溶菌酶

6、磷脂药物小分分子总蛋白浓浓度等外源性干干扰因素素溶血细菌污染染标本贮存存时间过过长凝固不全全反复冻融融试剂准备备标本收集集测定方法法和仪器器操作“标准操作作程序”(SOP)二、标准准化操作作及流程程人员的合合理使用用和培训训操作人员员的业务务培训（包括检检测原理理、基本本操作、日常保保养及维维护等)标准品和和质控品品的分类类标准品和和质控品品的基本本条件三、标准准品和质质控品的的应用标准品和和质控品品的分类类标准品即即含量确确定的处处于一定定基质中中的特性性明确的的物质。标准品分分级:一级标准准品为国际标标准品二级标准准品为国家标标准品三级标准品品为商品校校准品质控品的的选择国际临床床化学学学

7、会（IFCC）对质质控品的的定义为为：专门门用于质质量控制制目的的的标本或或溶液；不能用用作校准准。质控品可可以是液液体的、冰冻的的、冻干干质控品性性能：稳定性，瓶间差差，定值值和非定定值，分析物水水平，预预处理的的要求等等基质效应应制备质控控品所用用的基础础材料一一般为来来自人或或动物的的血清或或其他体体液。经经过处理理，又添添加了其其他外加加的材料料，如防防腐剂等等。在对某一一分析物物进行检检测时，处于该该分析物物周围的的其他成成分的组组合，是是该分析析物的基基质。由由于这些些组合成成分的存存在，对对分析物物在检测测时的影影响称为为基质效效应。理想状态态下，控控制品应应和检验验的患者者标本

8、具具有相同同的基质质状态；这样，质质控品将将和病人人标本具具有相同同的表现现。稳定性是质控品品的重要要指标在厂商说说明的有有效期内内，说明明书上关关于质控控品性能能的各个个指标，如：冻冻干品的的复溶性性能、有有何浑浊浊的表现现、各被被检分析析物实际际检测值值是否在在规定的的范围内内等是否否和说明明书相符符，都是是产品稳稳定性的的反映，很重要要。好的质控控品可以以在规定定的保存存条件下下，至少少稳定12年。实验室最最好购买买够用1年的1个批号的的质控品品瓶间差只有将瓶瓶间差异异控制到到最小，才能使使检测结结果间的的变异真真正反映映日常检检验操作作的不精精密度。冻干的质质控品复复溶的操操作一定定要

9、严加加控制，注意复复溶操作作的标准准化，否否则实验验室自身身造成新新的瓶间间差。液体质控控品，消消除了复复溶过程程引入的的误差；但是较较昂贵，且总含含有防腐腐剂类的的添加物物，对某某些检测测方法引引入了基基质效应应的误差差。定值和不不定值质质控品厂商在定定值质控控品上提提供的预预期范围围很宽，包含了了质控品品的缓慢慢变化使使实际检检测值有有偏离初初始均值值的倾向向。千万不能能将预期期制范围围认为是是质控的的允许范范围。不论定值值还是不不定值的的质控品品，使用用时，必必须用自自己的检检测系统统确定自自己的均均值和标标准差，用于日日常工作作的过程程控制中中。分析物水水平（浓浓度）临床最关关心各项项

10、目（分分析物）的医学学决定水水平浓度度的检验验结果的的质量；实验室更更关心检检测系统统（方法法）性能能的在临临界限值值处的质质量表现现。在选择质质控品时时，应该该有几个个浓度的的、浓度度分布较较宽的、最好是是医学决决定水平平的、有有可报告告范围的的上下限限值的质质控品。依据实验验室和临临床的要要求作出出选择。质控品使使用前的的预准备备检验人员员在使用用前必须须认真阅阅读质控控品的使使用说明明书，明明确要求求后再开开始使用用。质控品的的正确使使用与保保存（1）严格按按说明书书操作；（2）冻干质质控品的的复溶要要确保所所用溶剂剂的质量量；（3）冻干质质控品复复溶时所所加溶剂剂的量要要准确，并尽量量

11、保持每每次加入入量的一一致性；（4）冻干质质控品复复溶时应应轻轻摇摇匀，使使内容物物完全溶溶解，切切忌剧烈烈振摇；（5）质控品品应严格格按使用用说明书书规定的的方法保保存，不不使用超超过保质质期的质质控品；（6）质控品品要在与与患者标标本同样样测定条条件下进进行测定定。临床免疫疫检验实实验室应应有充分分合理的的空间、良好的的照明、空调及及湿度维维持设备备实验室仪仪器设备备应保养养良好，实验用用品要达达到相应应的要求求。四、实验验室的环环境、设设施和设设备第三节质质量保保证、室室内质控控和室间质质评之间间的关系系IQC仅覆盖标标本收集集、实验验室测定定过程和和结果报报告及其其解释分分析步骤骤；而

12、EQA还包括一一个较大大范围的的实验室室活动，诸如在在标本接接收中样样本处理理的可靠靠性，以以及测定定结果的的报告和和解释。QA覆盖了更更宽范围围的活动动，最为为重要的的是标本本收集、结果报报告和解解释阶段段。QA还应评价价实验报报告的发发出周期期（及时时性）、完整性性和简洁洁性。实实验室工工作的质质量保证证在确保保患者治治疗质量量上有重重要意义义。第四节常常用免免疫检验验的质量量控制免疫检验验质量控控制中常常用统计计学方法法的选择择定性免疫检验验定量免疫检验验统计学质质量控制制:使用室内内质控物物与临床床常规标标本同时时检测，然后根根据室内内质控物物的测定定结果，采用统统计学的的原理方方法判

13、断断所进行行的临床床常规标标本测定定是否在在控的一一种质量量控制措措施。一、免疫疫检验质质量控制制中常用用统计学学方法的的选择统计学质质控的特特点检验误差差有两类类：一是是系统误差差，一是随机误差差。系统误差差通常表表现为质质控物测测定均值值的漂移移，是由由操作者者所使用用的仪器器设备、试剂、标准品品或校准准物出现现问题而而造成的的，这种种误差可可以通过过前述的的措施方方法加以以控制，是可以以排除的的。随机误差差则表现现为测定定SD的增大，主要是是由实验验操作人人员的操操作等随随机因素素所致，其出现现难以完完全避免免和控制制。统计学质质控的功功能就是是发现误误差的产产生及分分析误差差产生的的原

14、因，采取措措施予以以避免。开展统计计质量控控制前，应将可可以控制制的误差差产生因因素尽可可能地加加以控制制，这不不但是做做好室内内质控的的前提，也是保保证常规规检验工工作质量量的先决决条件。基线测定定最佳条件件下的变变异（Optimal conditionsvariance, OCV）和常规规条件下下的变异异（Routine conditionsvariance, RCV）；当RCV与OCV接近，或或小于2 OCV时，则RCV是可以接接受的。以上为为批间变变异。批内变异异的测定定；室内质控控物的测测定准确确度的评评价。临床免疫疫检测质质控图的的选择、绘制及及质控结结果判断断Levey-Jenn

15、ings质控图方方法也称Shewhart质控图，是由美美国的Shewhart于1924年首先提提出，并并用于工工业产品品的质量量控制。二十世纪纪五十年年代初，Levey-Jennings将其引入入临床检检验的质质量控制制 。经经Henry和Segalove的改良，即为目目前常用用的Levey-Jennings质控图。(1)统计学含含义:稳定条件件下，在在20个个IQC结果中不不应有多多于1个个结果超超过2SD（95.5%可信限）限度；在1000个个测定结结果中超超过3SD（99.7%可信限）的结果果不多于于3个。如以3s为失控限限，假失失控的概概率为0.3%。(2)对待质控控品应如如对待病病人

16、标本本一样同同等对待待，不能能进行特特殊处理理，在每每批病人人标本测测定的同同时测定定质控品品，将所所得结果果标在质质控图上上，质控控品在控控时，方方能报告告该批病病人标本本的测定定结果，质控品品失控时时，说明明测定过过程存在在问题，不能报报告病人人标本结结果，应应解决存存在的问问题，并并重新测测定在控控后方能能报告；（3）当使用用一个以以上浓度度的质控控品想在在同一张张质控图图描点时时，则质质控图上上均值和和s可不标具具体数据据，而仅仅以和s表示；（4）若以均均值2s为失控限限，假失失控的概概率太高高，通常常不能接接受；以以均值3s为失控限限，假失失控的概概率低，但误差差检出能能力不强强。质

17、控图的的记录质控结果果日期试剂质控物批批号和含含量测定者姓姓名等。通常质控控规则以以符号AL来表示，其中A为质控测测定中超超出质量量控制限限的测定定值的个个数，L为控制限限，通常常用均值值或均值值13SD来表示。当质控测测定值超超出控制制限L时，即该该批测定定判为失失控。常用的13S质控规则则，其中中1为原式中中的A，3s为原式中中的L，表示均均值3s，其确切切的含义义为：在在质控测测定值中中，如果果有一个个测定值值超出均均值3s范围，即即可将该该批测定定判为失失控。质控规则则的表达达方式符 号定定义义12S一个质控控测定值值超出2s控制限。13S一个质控控测定值值超出3s控制限。22S两个连

18、续续的质控控测定值值同时超超出+2s或2s控制限。R4S同一批测测定中，两个不不同浓度度质控物物的测定定值之间间的差值超出出4s控制限。41S四个连续续的质控控测定值值同时超超出+1s或1s控制限。7T七个连续续的质控控测定值值呈现一一个向上上或向下下的趋势势变化。10X十个连续续的质控控测定值值同时处处于均值值（X）的同一一侧。常用质控控规则的的符号及及定义Levey-Jennings质控图结结合Westgard多规则质质控方法法Westgard多规则质质控方法法即是将将前述的的多个质质控规则则同时应应用进行行质控判判断的方方法。最初常用用的有六六个质控控规则，即12S、13S、22S、R4S、41S和10X，其中12S规则作为为告警规规则。13S和R4S规则反映映的是随随机误差差。22S、41S和10X反映的是是系统误误差，系系统误差差超出一一定的程程度，也也可从13S和R4S规则反映映出来。在Levey-Jennings