罗氏试剂盒说明书 CA19-9 11872141001v15

1、11872141001V15糖类抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9，CA 19-9） 2007-08, V 15 中文 5/5 Elecsys 和 cobas e 分析仪11776193 122 100测试本试剂盒适用的分析仪Elecsys 1010Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601注意：CA 19-9的检测结果与检测方法密切相关。因此实验室结果报告应注明检测方法。不同检测方法间的结果不能直接比较，以免引起临床解释的错误。在疗效观察过程中，如果检测方法变动，必须使用原检测方法同时平行测定

2、。主要用途用于体外定量检测人体血清或血浆中的CA 19-9。Elecsys和cobas e 免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ECLIA”。临床应用Elecsys CA 19-9检测使用1116-NS-19-9单克隆抗体。1116-NS-19-9的反应位点位于糖脂分子上，分子量约为10,000道尔顿。这种黏液素类似Lewis血型家族的半抗原决定簇，属于黏膜细胞的组成部分。1，23-7%的人存在Lewis a-阴性/b-阴性的血型结构，其不能表达类似CA 19-9的这类黏液素。因此在解释结果的时候，必须注意。3黏液素由胎儿的胃、肠、胰脏上皮细胞分泌。在成年人的肝脏、肺和胰脏组织也能发现低

3、浓度的黏液素。3，4CA19-9的检测值可以帮助鉴别诊断胰腺癌以及监测胰腺癌患者（敏感性达到70-87%）。5，6，7，肿瘤的大小和CA19-9的检测值之间没有相互关系，但是，血清CA19-9水平超过10，000 U/mL以上的患者几乎都存在肿瘤的远处转移。3CA19-9不能作为胰腺癌的早期检查指标。8，9，10对于胆管癌CA19-9的敏感性约为50-75%。对于胃癌建议同时检测CA 72-4和CEA。对于结、 结肠癌中建议只检测CEA。极少数CEA阴性的病例检测CA19-9才有价值。3由于黏液素经肝脏分泌，轻微的胆汁淤积都能导致血清CA19-9水平的明显升高。胃肠道和肝脏的良性病变或炎症也会

4、导致CA19-9水平的升高，比如囊性纤维化。3，6，9检测原理双抗体夹心法，总检测时间：18分钟第一次孵育：10l标本、生物素化的CA19-9单克隆特异性抗体和钌（Ru）a标记的CA19-9特异性单克隆抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复合物。第二次孵育：添加包被链霉素的磁珠微粒进行孵育，复合体与磁珠通过生物素和链霉素的作用结合。将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。仪器自动通过2点校正的定标曲线计算得到检测结果。 试剂工作溶液M包被链霉素的磁珠微粒（透明瓶盖），每瓶

5、6.5ml；包被链霉素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐剂。R1 生物素化的抗CA 19-9单克隆抗体（灰盖），每瓶，10ml：生物素化的抗CA 19-9抗体（鼠）浓度3mg/L，磷酸缓冲液100mmol/L，pH 6.5；防腐剂。R2 Ru(bpy)32+标记的抗CA 19-9单克隆抗体（黑盖），每瓶，10 ml，钌标记的抗CA 19-9 单抗（鼠）浓度4 mg/L，磷酸缓冲液100 mmol/l，pH6.5；防腐剂。警告和注意事项仅用于体外诊断。在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。专业人员可要求获得安全数据报告。避免试剂和样本（样本、

6、定标液和质控品）产生气泡。试剂处理试剂盒（M,R1和R2）为即用型，不能分开使用。试剂相关信息可以通过试剂条形码阅读获取。储存及稳定性存放于28。请垂直摆放Elecsys CA 19-9试剂盒，确保仪器的自动搅拌器能够完全混匀磁珠微粒。稳定性：未开封试剂，28有效期内均可使用开封试剂，288周放置分析仪MODULAR ANALYTICS E170 和cobas e 601上6周放置分析仪Elecsys 2010 和 cobas e 411上8周放置分析仪Elecsys 1010上4周（试剂交替放置于冰箱和20-25的分析仪中，持续开盖的情况下至多20小时）样本的采集和准备仅以下罗列的样本类型通

7、过实验符合检测要求。血清样本须用标准试管或有分离胶的真空管收集。肝素锂、肝素钠、肝素胺、K3-EDTA抗凝的血浆都适用。不能使用枸橼酸钠抗凝血浆。标准：回收率90-110%，斜率0.9-1.1，截距0.95。稳定性： 2-8可保存30天；-20可保存3个月。11选择合适的试管进行不同类型样本的采集，不是所有的试管均可用于检测。不同厂商的样本采集系统可能含有不同的物质，某些情况下会影响检测结果。如果使用原始管进行检测（样本前处理系统）时，应遵循生产商所提供的指导。有沉淀的样本检测前必须先作离心处理。避免使用热灭活的样本。添加叠氮化合物的样本和质控品均不能使用。检测前，样本、定标液及质控品须室温平

8、衡(20-25)。由于蒸发因素的影响，样本、定标液及质控品在分析仪上的检测必须2小时内完成。提供的物品参阅“试剂工作溶液”章节。需要的物品（未提供）货号11776215, CA19-9 CalSet, 规格4 x 1ml货号11776452, PreciControl Tumor Marker，规格2 x 3ml，分别为PreciControl Tumor Marker 1和2货号11732277，Diluent Universal，2 x 16 ml样本稀释液，或货号03183971,Diluent Universal，2 x 36ml样本稀释液实验室基础设备Elecsys 1010/201

9、0 、MODULAR ANALYTICS E170或cobas e分析仪Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析仪所需材料：货号11662988, ProCell, 6 x 380 mL ,系统缓冲液货号11662970, CleanCell, 6 x 380 mL,测量池洗液 货号11930346, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL 附加洗液货号11933159, SysClean 适配器 货号11706829, Elecsys 1010分析杯, 12 x 32反应管或者货号11706802, Elecsys 2010 分析杯, 60 x 60 反

10、应管货号11706799, Elecsys 2010 分析吸头, 30 x 120移液吸头MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析仪所需材料：货号04880340,ProCell M, 2 x 2 L 系统缓冲液货号04880293, CleanCell M, 2 x 2 L测量池洗液 货号03023141, PC/CC杯, 12个用于在检测前预热Procell M及Cleancell M。货号03005712,ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于在检测完毕后或更换试剂时清洗试剂针。货号12102137,反应杯/吸头 组合装84反应杯/吸

11、头 组合装48盒,废物袋 货号03023150, WasteLiner,废物袋 货号03027651,系统清洁适配器 M所有分析仪需要：货号11298500, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系统清洗液 检测要优化检测性能，请遵照本说明书中有关分析仪的相关指导，并参照分析仪操作手册。试剂使用前分析仪自动搅拌磁珠微粒，使其处于悬浮状态。试剂相关信息可通过条形码自动读取，在特殊情况下，分析仪无法自动读取条码信息时，请输入条码标签上的15位数字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e分析仪：将冷藏试剂室温平衡至20C左右，放

12、置分析仪的试剂盘（20C）内。避免泡沫产生。分析仪能自动调节试剂温度和开、关各试剂盒瓶盖。Elecsys 1010 分析仪: 将冷藏试剂室温平衡至20-25C左右，放置分析仪的试剂盘（20- 25C）内。避免泡沫产生。使用前后手动开关试剂盒瓶盖。使用后保存于2-8C冰箱。定标溯源性：该检测方法可溯源至Enzymun-Test CA19-9测量程序。每套Elecsys CA 19-9试剂的条码标签上均含有其批特异的定标信息。使用Elecsys CA 19-9定标液可调整预设置的定标曲线。定校频率：新批号试剂必须进行定标（新试剂盒在分析仪上放置不能超过24小时）。以下情况建议重新进行定标：MODU

13、LAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 和cobas e 分析仪:使用同一批号试剂，1月后（28天）7天后（同一试剂盒在分析仪上使用）Elecsys 1010 分析仪:每盒试剂7天后（室温 20-25C）3天后（室温 25-32C）所有仪器根据需要：如失控。质控可使用Elecsys PreciControl Tumor Marker1和2。其他合适的质控品也适用。各浓度质控至少每24小时内检测一次，每次更换试剂盒或定标后也须进行质控。每个实验室可根据各自的情况设定合适的控制限和质控周期。质控值必须处于规定的控制限内。若失控每个试验室必须采取相应的纠正措施。请遵循政府法

14、规和当地行业导则进行质量控制计算仪器会自动计算每个样本中的分析物浓度（单位是U/mL或kU/L）。干扰因素检测结果不受黄疸（胆红素1112mol/L或66 mg/dL）, 溶血（血红蛋白1.4mmol/L或 2.2g/dL）, 脂血(脂肪乳剂 1500mg/dL)和生物素5mg/天），必须在末次生物素治疗8小时后采集样本。检测结果不受类风湿因子影响（RF1500 IU/ml）。CA19-9检测不受hook效应影响（浓度达500，000 U/mL）体外对27种常用药物进行试验未发现会影响检测结果。由于检测试剂使用单克隆抗鼠抗体，因此接受过小鼠单抗诊疗的病人会出现错误结果。试剂的添加物可将影响因素

15、降到最低。少数病例中高浓度的钌抗体会影响检测结果。作为诊断指标，必须结合患者病史，临床检查和其他临床资料来综合评估检测结果。检测范围0.600-1000 U/mL（通过最低检出限和厂商定标曲线的最高值确定）。低于检出限的值报告1000 U/mL 。(1:10稀释结果可报告至10，000 U/mL)稀释高于检测范围的标本可用通用稀释液（Elecsys Diluent Universal）稀释。建议稀释度1:10（MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 1010/2010 和cobas e 分析仪可以自动稀释，也可以手工稀释）。稀释的标本CA19-9浓度必须高于50 U/m

16、l。如用手工稀释，结果应乘稀释倍数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。期望值通过检测381例样本（187例健康受试者，194例献血员）结果如下：27 U/mL (第95百分位数)34 U/mL (第97.5百分位数)39 U/mL (第99百分位数)每个实验室应通过实验确定参考范围的适用性，必要时建立本实验室的参考范围。特殊的性能指标试剂在分析仪上的性能试验数据如下。各实验室由于具体情况不同，所得出的数据可能会稍有差异。精密度应用Elecsys试剂盒、人混合血清样本和质控品验证重复性，按照NCCLS的EP5-A执行：每天6次，共10天 (n=60)。批内精密度由 MODULAR ANAL

17、YTICS E170分析仪完成，n=21下面是获得的结果。分析灵敏度（最低检出限） 0.60 U/mL最低检出限指区别于零浓度的分析物最低检测浓度。最低检出限是最低浓度标准品+2SD得到的浓度（厂商定标品1+2SD，批内精密度，n=21）。方法学比较使用临床标本比较Elecsys CA19-9检测（y） 和 CA19-9酶免疫检测（x），相关性数据如下：标本数n=78Passing/Bablok12 线性回归y = 0.99x + 0.87 y = 0.99x + 2.68T = 0.766 r = 0.944样品比较的浓度范围约为4.5216 U/mL。分析特异性The Elecsys CA

18、 19-9肿瘤标志物检测方法基于单克隆抗体1116-NS-19-9建立的，该抗体为Fujirebio诊断公司的专利。该检测方法的性能特点只能依赖此抗体得出，而不能用其他抗体替代。参考文献1. Koprowski H, Steplewski Z, Mitchell K, Herlyn M, Herlyn D,Fulner P. Colorectal carcinoma antigens detected by hybridoma antibodies. Somat Cell Genet 1979;5:957-972.2. Hansson GC, Zopf D. Biosynthesis of t

19、he cancer-associated sialyl-Lea antigen. J Biol Chem 1985;260:9388-9392.3. Stieber P, Fateh-Moghadam A. Sensible Use of Tumormarkers. Dtsch: Tumormaker und ihr sinnvoller Einsatz. Boehringer Mannheim, Cat. No. 1536869 (engl), 1320947 (dtsch). ISBN 3-926725-07-9 dtsch/engl. Juergen Hartmann Verlag Ma

20、rloffstein-Rathsberg (1993).4. Herlyn M, et al. Monoclonal antibody detection of a circulating tumor-associated antigen. Presence of antigen in sera of patients with colorectal, gastric and pancreatic carcinoma. J Clin Immunol 1982;2:135-140.5. Ritts RE Jr, Del Villano BC, Go VLV, Herbermann RB, Klu

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