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文档简介

1、PAGE25生物技术实践1下面是制备固定化酵母细胞的实验步骤,请回答:酵母菌细胞的活化配制CaCl2溶液配制海藻酸钠溶液海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合固定化酵母细胞1在_状态下,微生物处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复_状态。活化前应选择足够大的容器,因为酵母菌活化时_。2一般来说,酶更适合采用_和_法固定,而细胞多采用_固定,原因是细胞个大,酶分子很小,个大的细胞难以被吸附或结合,而个小的酶容易从包埋材料中漏出。3加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环,关系着实验的成败。如果海藻酸钠浓度过_,很难形成凝胶珠;如果浓度过_,形成的凝胶珠所包埋的_数目少,影响实验效果。4刚形成的

2、凝胶珠应在_溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。将凝胶珠加入用于发酵的葡萄糖溶液中发现有_产生,同时有_散发,说明凝胶珠制备成功。答案:1缺水正常的生活体积会变大,以避免酵母细胞的活化液溢出容器外2化学结合法物理吸附包埋法3高低酵母细胞4CaCl2气泡酒味2请回答下列与传统发酵技术相关的问题:1苹果酒口感清醇,营养丰富,适量饮用,可舒筋活络,是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生,可用_来检验。2果醋制作使用的菌种是_,当_都充足时,其可将果汁中的糖分解成醋酸。3腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品。多种微生物参与了豆腐的发酵,其中起主要作用的是_,发酵完成后需加盐腌制,加盐还可以抑制

3、_生长,避免豆腐变质。4制作泡菜时,泡菜坛一般用水密封,目的是_。蔬菜在腌制过程中,会产生亚硝酸盐。在_条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生_反应后,与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成_色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,估算出的亚硝酸盐含量如图曲线所示,据图可以得出的结论是_。答案:1酸性重铬酸钾2醋酸菌氧气、糖源3毛霉微生物4创造无氧环境盐酸酸化重氮化玫瑰红泡菜封坛后亚硝酸盐含量不断增加,至第4天含量最高,以后逐渐减少3在薄荷油提取中,由于薄荷油化学性质稳定,不溶于水,因此可采用水中蒸馏法,请设计简单的实验装置水蒸气蒸馏装置来提取薄荷油。蒸馏装置:铁架台两个、酒精灯、石棉网

4、、蒸馏瓶、橡胶塞、蒸馏头、温度计、直型冷凝管、接液管、锥形瓶,以及连接进水口和出水口的橡皮管。所有仪器必须事先干燥,保证无水1整套蒸馏装置可分为左、中、右三部分,其中左边的部分用来_,中部用来_。2有人设计了一套实验室蒸馏芳香油的五个步骤:A将蒸馏烧瓶固定在铁架台上,在蒸馏烧瓶上塞好带温度计的橡皮塞B连接好冷凝管,把冷凝管固定在铁架台上,将冷凝管进水口橡皮管的另一端与水龙头相连,将和出水口相接的橡皮管的另一端放在水槽中C把酒精灯放在铁架台上,根据酒精灯高度确定铁圈的高度,放好石棉网D向蒸馏烧瓶中放入几片碎瓷片,再用漏斗向烧瓶中加入原料,塞好带温度计的橡皮塞,把接液管连接在冷凝管的末端,并伸入接

5、收装置如锥形瓶中E检查气密性薄荷油可用_法提取,原因是高温_。上述实验正确的操作顺序是_。冷凝管里水流的方向与水蒸气的流向_。在蒸馏烧瓶中加入几片碎瓷片,目的是_。通过蒸馏,得到的是_,若想得到纯净的薄荷精油需_,首先向乳液中加入氯化钠,目的是_。静置后在_“上口”或“下口”得到产物。提取薄荷精油的程序是_。用简单的文字和箭头表示。答案:1通过加热进行蒸馏将蒸馏物冷凝2水蒸气蒸馏不易分解、难溶于水、能随水蒸气蒸出CABED相反防止暴沸油水混合物进行分液增加水层的密度,使混合物出现明显分层上口薄荷叶清水水蒸气蒸馏油水混合物分离油层除水薄荷精油4微生物培养与分离技术是生物学中重要的实验技术。根据有

6、关微生物的知识,分析回答问题:1培养基的制备需经过计算、称量、溶化和B:_、A:_等过程,上述过程中需要在超净工作台上操作的是_。2纯化菌种时为得到单菌落,常采用的接种方法是平板划线法和D:_,其中需用接种环进行操作的是_。3为达到筛选土壤中分解尿素细菌的目的,平板内的固体培养基应以尿素作为唯一的_,培养基中加入_指示剂培养后,若变红则其中含有所需细菌。若筛选纤维素分解菌,在选择培养后须进行E:_和F:_过程,一般通过观察_的有无挑选出所需菌种。答案:1灭菌倒平板倒平板2稀释涂布平板法平板划线法3氮源酚红梯度稀释涂布平板透明圈5牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健

7、康状况,也影响奶制品的运输和贮藏。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况,做如图所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1mL生牛奶稀释液至盛有9mL无菌水的试管中,混合均匀,如此再重复2次。请回答下列有关问题:1微生物培养操作过程中,为了防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行_填“消毒”或“灭菌”,操作者双手要进行清洗和_。除巴氏消毒外,还有_和化学药剂消毒。2取最终的牛奶稀释液滴在培养基上进行涂布,选择的涂布工具称为_,为防止杂菌污染,该工具应浸泡于酒精中,涂布前应_。3图中所示方法为稀释培养法,理想情况下,培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该

8、方法培养设置了3个培养皿,菌落数分别为35个、33个、34个,则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为_个。运用这种方法统计的结果往往较实际值_填“偏大”或“偏小”,原因是_。答案:1灭菌消毒煮沸消毒2涂布器将涂布器引燃灼烧后待冷却3106偏小当两个或多个菌落重叠在一起时按一个菌落计算6如表所示是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方,请根据表格和所学知识回答下列问题:成分含量蛋白胨10.0 g乳糖5.0 g蔗糖5.0 gK2HO2.0 g0.2 g12.0 gL1大肠杆菌的同化类型为_,从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于_。2在微生物的实验室培养中,获得纯净培养物的关键是_,因此需对培养基和

9、培养皿进行_填“消毒”或“灭菌”,操作者的双手需要进行清洗和_。空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使_,还能破坏DNA的结构。3根据用途划分,该培养基属于_填“选择”或“鉴别”培养基,若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中_换成_,若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成_。4培养大肠杆菌时,常用的接种方法是_和_。通过上述方法可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,称为_。答案:1异养型分解者2防止外来杂菌的入侵灭菌消毒蛋白质变性3鉴别蛋白胨尿素酚红指示剂4平板划线法稀释涂布平板法菌落7为获得果胶酶高产菌株,科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作。1为分离果胶酶产生菌,科

10、研人员配制了下表所示成分的培养基,该表空白处的两种成分是_。制备的培养基常用_法进行灭菌。2科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中,震荡混匀,制成悬液。为获得较均匀分布的单菌落,还需要将悬液进行_,用_法接种于固体培养基上。接种后的培养基_状态放入培养箱。K2HL,总大肠菌群不得大于3个/L。1检验大肠杆菌的含量时,通常将水样进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,记录菌落数量,这种方法称为_。2用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组_为什么_。3如分别取已稀释102倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养,培养基记录到大肠杆菌的

11、菌落数分别为161、155、158、170,则每升原水样中大肠杆菌数为_。4纯化大肠杆菌时使用的培养基一般用_法灭菌,_可/不可用加入抗生素的方法防止杂菌感染。5如果要测定水中的病毒种类,可以用_技术使其遗传物质扩增,然后用_技术进行鉴定。答案:1稀释涂布平板法2需要因为需要判断培养基是否被污染31084高压蒸汽灭菌不可5L若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定,需在上表培养基配方中添加的物质是_、_。若分离得到的是尿素分解菌,则培养基中L1从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于_。2若根据用途划分,该培养基属于_填“选择”或“鉴别”培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌

12、,培养基的营养成分必须怎样更改_,并用_作为指示剂。3在微生物培养的过程中,为防止杂菌污染,需要对培养基和培养皿进行_;操作者的双手需要进行清洗和_。4图1和图2是培养某细菌的结果图,其对应的接种方法分别是:_和_,这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的_。图1所用的接种方法可用来对活菌进行计数。此外,测定微生物数目的另一种方法是_。5以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有_。A制作果酒B由果酒制作果醋C制作泡菜D制作腐乳答案:1分解者2鉴别将蛋白胨改成尿素酚红3灭菌消毒4稀释涂布平板法平板划线法菌落显微镜直接计数法5BC24人们的日常生活与传统发酵技术密

13、切相关。请回答下列相关问题:1腐乳制作中主要利用了微生物产生的_酶和脂肪酶。2在制作果醋、腐乳、泡菜的过程中需要氧气的是_。在发酵产物制作过程中都需要培养微生物,为防止杂菌污染,需要对培养液基和培养器皿进行_填“消毒”或“灭菌”。3利用酵母菌酿酒时,一开始持续通入空气,使酵母菌数量_填“增多”“不变”或“减少”,然后再密封,使酒精_填“增产”“减产”或“不产生”。4果酒发酵后是否有酒精产生,可以用_来检验,在酸性条件下呈现灰绿色。5纯化果酒制作的菌种时,利用_填“固体”或“液体”培养基。接种时常用的方法有平板划线法和_法。答案:1蛋白2制作果醋、腐乳灭菌3增多增产4重铬酸钾5固体稀释涂布平板2

14、5人类利用微生物发酵制作果酒、果醋的历史源远流长。请回答下列问题:1果酒的制作离不开酵母菌。酵母菌是一类_呼吸类型微生物。2温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。利用酵母菌发酵制作葡萄酒时一般将温度控制在_。在葡萄酒的自然发酵过程中,起主要作用的是_。随着酒精度数的提高,红葡萄皮的_也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色。在_的发酵条件中,酵母菌可以生长繁殖,而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。3醋酸菌是一种好氧细菌,只有当氧气充足时,才能进行旺盛的生理活动。在变酸的酒的表面观察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。实验表明,醋酸菌对氧气的含量_。当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为_,再

15、进一步转变为_。答案:1兼性厌氧型21825附着在葡萄皮上的野生型酵母菌色素缺氧、呈酸性3特别敏感乙醛醋酸26研究发现橘皮精油和乳酸菌素蛋白质均有抑菌作用,有很高的经济价值。请回答下列问题:1橘皮中贮藏了大量的橘皮精油,由于橘皮精油的有效成分在水蒸气蒸馏时会_,使用水中蒸馏法又会发生_等问题,所以一般采用压榨法来提取。为了使橘皮精油易于与水分离,还要加入_,并调L_中充分振荡后,取1mL上清液加入到液体培养基中,37培养24h,选取发酵液颜色_的样品,经稀释后采用_法接种到固体平板上继续培养。3用以上方法筛选纯化得到的菌种的异化作用类型是_,理由是_。答案:1水、无机盐、碳源、氮源琼脂2无菌水

16、变黄稀释涂布平板3需氧型或兼性厌氧型未在无氧条件下进行筛选29宣木瓜为蔷薇科落叶灌木植物贴梗海棠的成熟果实,以安徽宣城所产最为著名,距今已有二千多年的栽培历史。宣木瓜中含有十九种氨基酸、十八种矿物微量元素,以及大量维生素C,有舒筋活络、祛风湿痹等功效。近年来利用宣木瓜果实加工果酒、果醋等保健品和美容化妆品。下图是某同学制备宣木瓜酒的简易装置图。请回答下列问题:1制备果酒时阀a和阀b的开闭情况为_。装置的温度控制在_。宣木瓜酒呈淡黄色,是因为随酒精度数的提高,_进入发酵液。2为提高果酒的品质,可以直接在木瓜汁中加入人工培养的酵母菌,为了培养和分离出酵母菌,淘汰细菌和放线菌,培养基要用()A较多的

17、氮源物质B较多的碳源物质C青霉素类似物D高浓度食盐3若是制备果醋,除接种醋酸菌外,还应对上述装置作何处理_。4若是从宣木瓜中提取类胡萝卜素,一般采用_法。为提高提取效果在操作前先要将宣木瓜进行_。答案:1阀a关闭、阀b打开1825色素2C3阀a打开,装置温度调到30354萃取干燥和粉碎30生物技术实践在实际生产生活中有着多种应用。请回答下列有关问题:1泡菜发酵过程会产生少量的亚硝酸盐,若泡菜中的亚硝酸盐总量达到一定值,则会引起中毒,故需要检测泡菜中亚硝酸盐的含量,测定亚硝酸盐含量的常用方法是_。2微生物的接种方法有多种,常用于统计活菌数目的接种方法是_,使用该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数

18、目偏低,原因是_。统计微生物数目的方法除利用菌落进行活菌计数外,还有_法。3精油在日常生活中有着广泛的应用,不同精油的制备过程不同,这与其原料的性质等有关。柚皮在水中蒸馏时容易焦糊,宜采用_法提取柚皮精油;玫瑰精油的化学性质稳定,难溶于水,常选择_法进行提取。4天然胡萝卜素具有保护视力,抗癌变,延缓衰老等功效。根据胡萝卜素具有易溶于有机溶剂的特点,常采用_法提取胡萝卜素;提取的胡萝卜素粗产品可通过_法进行鉴定。答案:1比色法2稀释涂布平板法当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落显微镜直接计数3压榨水蒸气蒸馏4有机溶剂萃取纸层析31酵母菌是生物科学研究中一种重要的生物材料,请回答下列问题:1酵母菌的新陈代谢类型是_,其细胞内将葡萄糖分解为酒精的酶存在于_。2某同学尝试用新鲜葡萄制作葡萄酒,为验证发酵液中含有酒精,取2mL发酵液加入试管中,滴加浓硫酸酸化的重铬酸钾溶液并轻轻振荡,观察到溶液变_色,则证明发酵液中含酒精。3研究者利用基因工程技术改造酵母菌,得到如下四种变异菌株:菌株不能合成纤维素酶,菌株合成的纤维素酶不能分泌到细胞外,菌株合成的纤维素酶能分泌到细胞外,菌株合成的纤维素酶分泌并固定在细胞壁上。在以纤维素为唯一碳源的培养基上能生长繁殖形成菌落的是菌株_,若在培养基中加入_,则菌落周围会出现透明圈。在利

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