转基因动物-第二章 实验动物的饲养与培育课件

1、1第二章 实验动物的饲养与培育2目的要求掌握实验动物的分类及饲养条件与环境控制 重点讲授实验动物的分类及饲养条件与环境控制 3实验动物的育种21实验动物的分类 3主要内容超排卵与取卵4实验动物的饲养条件与环境控制4动物转基因技术Animal transgenic technique第一节 实验动物的分类 实验动物 实验用动物经人工培育，遗传背景明确，来源清楚，对其携带微生物和寄生虫实行监控，应用于生命科学研究，药品、生物制品的生产和检定，以及其它科学研究的动物。指一切用于科学实验的动物。 5一、在动物学上的分类 人为分类法 自然分类法界（Kingdom）门（Phylum） 纲（Class） 目

2、（Order） 科（Family） 属（Genus） 种（Species）动物界 脊椎动物门 哺乳纲 真兽亚纲 食肉目 肢脚亚目 犬科 犬属 犬种7 突变系动物是指正常染色体的基因发生了变异的，形成具有各种遗传缺陷的动物。2突变系动物肥胖小鼠8 概念：是两个近交品系动物间有计划进行交配获得的第一代动物，亦称杂交一代，简称Fl动物。 特点：F1动物基因型相同，个体基本相同，表现型变异低，适应性强，反应敏感及分布广等特点，并具有双亲共有的遗传特性。3杂交群动物 10二、按微生物学控制原理分类普通级动物(CV)清洁动物(CL级) 无特定病原体动物(SPF) 无菌动物（包括悉生动物、GF/GA)按照对

3、微生物净化的程度，实验动物在我国分为四类:111、无菌动物概念：机体内、外不带有任何现有方法可检测出微生物和寄生虫的动物。应用：（1）用于微生物学和寄生虫学研究 （3）用于老年病学研究（2）免疫学功能的研究 12概念：指在无菌动物体内植入已知微生物的动物。悉生动物应用：（1）微生物学研究 （2）免疫学研究 （3）抗体制备研究 14 概念：指来自屏障系统的SPF动物，而饲育在半屏障环境设施系统中的动物。 应用：一般用于短期、中期对带菌要求不严格的实验研究。3清洁动物15概念：是未经积极的微生物学控制，普遍地 饲养在开放卫生环境里的动物。4. 普通动物应用：教学、一般性实验、预实验17基因型表现型

4、演出型发育环境周围环境实验动物环境控制与动物实验结果的关系18动物转基因技术Animal transgenic technique1、气候因素（1）温度 18- 29 影响生长发育和繁殖 影响代谢 激发应激反应 影响试验结果。一、影响实验动物环境的因素19温度与毒性的关系 温度对3种药物LD50的影响药物LD50（mg/kg）15.526.7苯异丙胺盐酸脱氧麻黄碱麻黄碱197.0111.0477.190.033.2565.020（2）湿 度 40%-70%（3）风速 0.1-0.25m/s21（1）粉尘：粉尘的标准，以净化的洁净度分为清洁级动物为100000级，SPF动物为10000级，无菌动

5、物为100级。（2）有害气体：主要有氨、甲基硫醇、硫化氢等。氨控制在14 mg/m3以下。2. 理化因素（3）噪音：60 db（4）光照：明暗交替时间为12:12或10:14 223. 生物因素（1）饲养密度和社会因素 大约是每平方米小鼠100只、大鼠50只、豚鼠20只、兔4只、狗1只、猴1只。饲养空间狭小24动物转基因技术Animal transgenic technique二、实验动物设施 实验动物设施：指与实验动物和动物实验有关的实验动物的保种维持、生产、实验、研究等所需的建筑物和设备的总称。25 饲育室、实验室、检疫室、洗刷消毒间、废物处理设施、办公室、机房、库房等。1、实验动物设施的

6、一般组成2、实验动物设施的等级 隔离系统 开放系统 亚屏障系统 屏障系统27 为努力避免与病原微生物接触和传染的机会而设计的封闭设施，适合饲养清洁动物或SPF动物。（2）屏障系统（Barrier system）：28 介于屏障系统和开放系统的中间状态的设施，其构造和设备均基本上按屏障设施的标准要求，空气经亚高效过滤，在管理上没有屏障系统那么严格，用于清洁级动物的生产和实验。（3）亚屏障系统（Sub-Barrier system）29 饲养无菌动物及悉生动物所使用的方式，它能保证动物处于完全无菌的环境下，主要设备是隔离器，可以放在普通环境中。（4）隔离系统（Isolator system）30（

7、1）区域的设置3、实验动物设施的基本要求31地面：应防滑、耐磨、耐清洗消毒、无渗漏。地漏：屏障区内地漏应防堵、防回水回气，采用特制盖、可水封。墙面：应光滑平整，阴阳角为圆弧形，墙面应采用不易脱落、耐腐蚀、无反光、耐冲击、无缝隙的材料。（2）对部分建筑部位的要求32天花板：应采用耐水洗、耐腐蚀、气密性好、坚固、无毒、阻燃的材料。门窗：门应坚固、气密性好、耐腐蚀、易清洗，开闭形式顺应气流密封，门下端设连动装置，关闭时门底不留缝隙，门宽不少于1.0m，门上可留玻璃观察窗。走廊：宽度一般为1.52.0m。房间：为节约能源，饲养室高度可设为2.4m左右。33动物转基因技术Animal transgeni

8、c technique 第三节 实验动物的育种一、近交系的培育1、平行线法 由5个家系组成基础繁殖群，从每个家系中选出一对兄妹进行全同胞交配，以此类推，最后有可能育成5个亚系。缺点：个体不太均一、易发生分化34以某个家系为基础繁殖对，在其后代中一般选留3-5对兄妹，但仅有1对向下传递，生产的个体均一，最后形成单一的品系。2、单线法缺点：选择范围小，由于只有单线的仔代，有断代的危险。35 在基础群中，每代有5对，繁殖过程中，每一代均保持5对向下传递，当某对不孕或生产能力降低时，可从另一对所生的后代中选择优良者代替。它兼有以上两个方法的优点。3、优选法36动物转基因技术Animal transge

9、nic technique 通过培育近交系的方法使突变基因保存下来二、突变系的培育37 将突变基因导入近交系3839 1、随机交配的方法（1）按随机数表配对法 将断奶后的实验动物编号，按随机数表组成配种对。三、封闭群的培育 封闭群动物的繁殖是尽量保持封闭群动物基因异质性及多态性，避免随繁殖代数增加，导致近交系数的过快上升。40 1 2 3 4 D C B A 4 3 2 1 雄鼠组号 雌鼠组号 子代组号（2） 分组交叉交配法41公1 母 公 4 母 公 3 母 公 5 母 公 2 母 公 1 母 公 2 母 公 4 母 公 3 母 公 5 母n 代n1代 （3）循环配对法422、封闭群的维持与生产 遗传背景明确，来源清楚，有完整资料。 引种动物数量要足够多。（1）引种原则封闭群应足够大，并尽量避免近亲交配。2、繁殖原则43四、杂交群的培育采用两个近交系进行杂交而形成。44动物转基因技术Animal transgenic technique一、鼠的准备与要求 第四节 超排卵与取卵45二、超排卵与取卵