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文档简介
1、课题1 DNA的粗提取与鉴定 专题5 DNA和蛋白质技术DNA是主要的遗传物质!(具有细胞结构的生物)课题1 DNA的粗提取与鉴定 专题5 DNA和蛋白质技术D人教版生物选修一专题五课题DNA的粗提取与鉴定课件-1.遗传信息的携带者是什么物质?2.为什么说DNA是主要的遗传物质?3.真核细胞中DNA主要存在于哪里?课前回忆:核酸少数病毒的遗传物质是RNA主要存在于细胞核中1.遗传信息的携带者是什么物质?2.为什么说DNA是主要的遗课题1 DNA的粗提取与鉴定DNA和蛋白质技术课题1 DNA的粗提取与鉴定DNA和蛋白质技术课堂目标:1.了解DNA的物理化学性质;2.理解DNA粗提取以及DNA鉴定
2、的原理;3.尝试对动物或植物组织中的DNA进行粗提取。课堂目标:1.了解DNA的物理化学性质;活动一:理解DNA粗提取与鉴定的基本原理1、提取DNA等生物大分子的基本思路2、DNA粗提取的基本原理3、DNA的鉴定原理根据预习情况,各小组讨论、完善导学案“活动一”问题。活动一:理解DNA粗提取与鉴定的基本原理1、提取DNA等生物(1)DNA在NaCl溶液中的溶解性 page54 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀。(或者相反:杂质溶解,DNA析出!)DNA粗提取的基本原理(1)DNA在NaCl溶液中的溶解
3、性 page54 DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步分离。(2)DNA在酒精溶液中的溶解性(3)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受6080C的高温,而DNA在80C以上才会变性。洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜,去除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响。 DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于洗涤剂如何瓦解细胞膜?(相似相溶原理!)洗涤剂如何瓦解细胞膜?3.DNA鉴定 DNA与二苯胺在沸水浴条件下 会染成蓝色试剂:条件:现象:二苯胺沸水浴3.DNA鉴定 DNA与二苯胺
4、在沸水浴条件下试剂:条件:活动二:小组合作,完成DNA粗提取与鉴定的实验设计(一)实验材料的选择(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液(三)除去滤液中的杂质(DNA纯化处理)(四)DNA的析出与鉴定实验的主要步骤有:活动二:(一)实验材料的选择(二)破碎细胞,获取含DNA的滤(一)实验材料的选取 1、材料:鱼卵、猪肝、菜花、香蕉、鸡血、哺乳动物的成熟的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基中培养的大肠杆菌。(从中选取23种实验材料) 2、原则:凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但选用DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大!(一)实验材料的选取 1、材料:鱼卵、猪肝、菜花、香蕉(二
5、)破碎细胞,获取含DNA的滤液1.如果选用动物细胞(鸡血细胞)为实验材料,如何操作,获得DNA提取液?2.如果选用植物细胞(洋葱细胞)为实验材料,又该如何操作?4.以上操作过程中,加入蒸馏水、食盐和洗涤剂的作用分别是?过滤的目的是?使用什么材料进行过滤?3.从植物组织中获取DNA,研磨的目的为?(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液1.如果选用动物细胞(鸡血 鸡血细胞液(制备时要加入0.1g/mL的柠檬酸钠(抗凝剂) 加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液。(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液选择动物细胞答:蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞胀裂,
6、再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂),从而释放出DNA。Think:为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?容易破碎 鸡血细胞液(制备时要加入0.1g/mL的柠檬酸钠(抗凝剂)植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解细胞膜2、植物细胞Discuss:加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?答:洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于DNA的释放;食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。实例:提取洋葱DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行从分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解细胞膜2、植物细胞D(三)去除滤液中的杂质为了
7、纯化提取的DNA需要将滤液作进一步处理讨论:此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质。(三)去除滤液中的杂质为了纯化提取的DNA需要将滤液作进一步三个方案 详见56Discuss: 根据方案一阅读,为什么反复地溶解与析出DNA,能去除杂质?三个方案 详见56Discuss:Discuss:方案二与方案三的原理有什么不同?答:方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质分开;方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与DNA分离。人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美
8、版人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版Discuss:方案二与方案三的原理有什么不同?答:方案二是(四) DNA的析出与鉴定 与滤液体积相等的冷却的酒精溶液(体积分数为95 ) ,静置23min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取DNA。1、DNA的析出 用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水。人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版(四) DNA的析出与鉴定
9、 与滤液体积相等的冷却的人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共22、 DNA的鉴定(1)向两支试管中分别加入 2mol/L NaCl 溶液5ml(2)其中一支试管中加入DNA丝状物(3)各加入二苯胺试剂4ml(4)混匀后,置于沸水浴中加热5min(5)待冷却后,比较两只试管中溶液的颜色变化溶有DNA的一组,遇二苯胺,水浴加热冷却后呈蓝色人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与
10、鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版2、 DNA的鉴定(1)向两支试管中分别加入 2mol/L 蓝色沸水浴新鲜鸡血加入柠檬酸钠离心或静置 20mL蒸馏水 搅拌 、过滤 2mol/L NaCl、搅 拌蒸馏水 搅拌过滤含DNA的粘稠物 2mol/L NaCl、 搅拌 过滤含DNA的滤液冷酒精 搅 拌DNA二苯胺试剂 滤液(丢弃) 不溶物(丢弃)上层清液(丢弃)鸡血细胞液 不溶物(丢弃) DNA含DNA的滤液活动三:以下列鸡血细胞DNA提取为例,回顾实验操作步骤人教版生物选修一专题五课题
11、1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版蓝色沸水浴新鲜鸡血加入柠檬酸钠 20mL蒸馏水 2mol 观察你提取的DNA颜色,如果不是白色丝状物,说明DNA中的杂质较多;二苯胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功,如果不呈现蓝色,可能所提取的DNA含量低,或是实验操作中出现错误,需要重新制备。课题成果评价是否提取出了DNA?人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共
12、28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版 观察你提取的DNA颜色,如果不是白色丝状物,说明D练习1、请解释提取DNA的实验操作中主要的步骤的目的。答:提取DNA的第一步是材料的选取,其目的是一定要选取DNA含量较高的生物材料,否则会由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难;第二步是DNA的释放和溶解,这一步是实验成功与否的关键,要尽可能使细胞内的DNA全部溶解;第三步是DNA的纯化,即根据DNA的溶解特性、对酶及高温的耐受性的不同等特性,最大限度地将DNA与杂质分开;最后一步是对DNA进行鉴定,这是对整个实验的结果的检测。人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PP
13、T)【PPT优秀课件】-精美版人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版练习1、请解释提取DNA的实验操作中主要的步骤的目的。答:2、你认为从细胞中提取某种特定的蛋白质与提取DNA一样容易吗?答:提取蛋白质比提取DNA的难度大。这是因为,与DNA相比,蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件要敏感得多,很容易失活;并且蛋白质的空间结构多种多样,理化性质各不相同,使得蛋白质的提取没有一种统一的方法,只能根据特定蛋白质的特性摸索提取的条件,设计特定的方法。人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美
14、版人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版2、你认为从细胞中提取某种特定的蛋白质与提取DNA一样容易吗2.实验中NaCl的物质的量浓度为2 molL和0.14 molL对DNA有何影响?1.在DNA的粗提取实验过程中,两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是( )。A.稀释血液、冲洗样品B.使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出C.使血细胞破裂、增大DNA溶解量 D.使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA答:B答:前者是溶解DNA,后者是使DNA析出人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美
15、版人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版2.实验中NaCl的物质的量浓度为2 molL和0.14 3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成( ) A.砖红色 B.橘黄色 C.紫色 D.蓝色4.提取鸡血中的DNA时,为什么要除去血液中的上清液?答:DNA的提取,关键是对杂质的去除,由于上清液是血液中的血浆部分,不含DNA,所以要除去上清液(含有蛋白质)。答:D人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件
16、】-精美版3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成( ) 4.提取鸡血人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)【PPT优秀课件】-精美版人教版生物选修一专题五课题1 DNA的粗提取与鉴定课件(共21.某林场中繁殖力极强老鼠种群数量的增长会受密度制约2.鱼塘中某种鱼的养殖密度不同时,单位水体该鱼的产量有可能相同3.物体的两个分运动是直线运动,则它们的合运动一定是直线运动4.若两个互成角度的分运动分别是匀速直线运动和匀加速直线运动,则合运动一定是曲线运动5.科学家在对黄化豌豆
17、幼苗切段的实验研究中发现,低浓度的生长素促进细胞的伸长,但生长素浓度增高到一定值时,就会促进切段中乙烯的合成,而乙烯含量的增高,反过来又抑制了生长素促进切段细胞伸长的作用。6.科学家在对黄化豌豆幼苗切段的实验研究中发现,低浓度的生长素促进细胞的伸长,但生长素浓度增高到一定值时,就会促进切段中乙烯的合成,而乙烯含量的增高,反过来又抑制了生长素促进切段细胞伸长的作用。7.先用低倍镜找到叶肉细胞,然后换用高倍镜观察。注意观察叶绿体随着细胞质流动的情况,仔细看看每个细胞中细胞质流动的方向是否一致致。8.内质网以类似于“出芽”的形式形成具有膜的小泡,小泡离开内质网,移动到高尔基体与高尔基体融合,成为高尔基体的一部分。高尔基体又以“出芽”方式形成小泡,移动到细胞膜与细胞膜融合,成为细胞膜的一部分。9.使细胞具有一个相对稳定的内部环境。在物
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