微生物标本采集及检验结果解读课件

1、微生物标本的采集规范及结果解读XX大学第一附属医院检验科XXX内 容标本采集 1 血培养 2 导管相关性血流感染 3 脑脊液等无菌穿刺液 4 尿标本 5 痰标本微生物结果解读“正确的微生物学检验,始自正确的标本采集” Manual of Clinical Microbiology 主编:Patrick R Murray 46-68.2% 4-15% 18.5-47% 错误率 Clin Chem. 2007 Jul;53(7):1338-42. Epub 2007 May 24. Clin Chem Lab Med. 2006;44(6):750-9分析前分析中分析后标本采集+运送+前处理检验全

2、过程必须医护人员和检验人员共同配合-分析前实验前环节主要包括：1）病人准备2）标本采集3）标本运送及时采集标本。抗菌药物使用前采集标本。无菌操作及时送检。标本采集的基本原则血培养采集规范临床常见采血指征发热（38C）或低温（36C） 寒战 白细胞增多（计数大于10，000109/L，特别有“核左移” 未成熟的或杆状核的白细胞） 粒细胞减少（成熟的多核白细胞1:5 抑制细菌生长 血液凝固血液：肉汤104 cfu/ml 革兰阴性杆菌105 cfu/ml穿刺尿：任意菌报告方式 “经48小时培养无细菌生长”。痰标本采集规范标本留取质量的好坏直接影响到对下呼吸道病原学的诊断, 导致抗菌治疗失败,以及造成

3、耐药菌的出现。重 要 ！标本采集1.应在用药前留取标本。2.无菌容器留取标本。 采集方法自然咳痰法 最常用 注意清洁口腔小儿取痰法 支气管镜、支气管穿刺、支气管肺胞灌洗等采集法胃液抽取法: 适用于婴幼儿患者。痰标本的运送采样后1小时内必须送到实验室。痰标本不能及时送检者，可暂存4冰箱2小时。 如室温下放置数小时，口咽部的非致病菌呈过度生长，而肺炎球菌、葡萄球菌和流感嗜血杆菌检出率则明显下降。 痰培养结果的评价质量 （上皮细胞 白细胞）数量（+及以上）细菌种类痰标本是否合格？分 类细胞数/低倍视野白细胞扁平上皮细胞5252510-2532525210-2525125上皮细胞25/LP,白细胞25

4、/LP, 上皮细胞5/LP痰标本常见病原菌主要病原菌 肺炎链球菌 流感嗜血杆菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 克雷伯菌属. 非病原菌 酵母菌 草绿色链球菌 肠球菌 凝固酶阴性葡萄球菌等其他标本采集粪便生殖道标本耳鼻眼标本脓液及伤口标本：尽可能抽取脓液送检，而不是用沾浸脓液的拭子送检。鼻咽拭子标本送检常见问题汇总厌氧培养：痰、鼻咽部、皮肤表面痰标本不合格率过高，按要求拒收尿标本部分不合格血培养送检率低标本类型选择有误，具体！药 敏 试 验什么是抗菌药物的敏感性试验？测定抗菌药物在体外抑制病原微生物生长的效力敏感/S：常规剂量，达到较好疗效 中介/I：较大剂量，达到较好疗效 耐药/R：较大剂量，一

5、般达不到治疗效果如何进行药物敏感性试验？扩散法（纸片法）Kirby-baure(K-B)法稀释法(MIC) 肉汤稀释法 琼脂稀释法 E-Test纸片扩散法大小和敏感度正相关！ 稀释法最低抑菌浓度（MIC）：大小和敏感度负相关！ E-试验（E-Test）E-test综合了稀释法和扩散法的原理和特点，直接定量测出药物对测试菌的最低抑菌浓度（MIC）大小和敏感度负相关！ 药物选择（执行标准）美国临床实验室标准化委员会（CLSI/NCCLS）一菌一药一规则肠杆菌科A组（常规实验/常规报告的药物）B组（首选实验/有选择报告的药物）C组（补充实验/有选择报告的药物）U组（仅用于泌尿道的补充实验的药物）氨苄

6、西林阿米卡星氨曲南头孢噻吩头孢唑啉阿莫西林/克拉维酸氨苄西林/舒巴坦哌拉西林/他唑巴坦替卡西林/克拉维酸头孢他啶洛美沙星 或氧氟沙星诺氟沙星庆大霉素妥布霉素头孢呋辛氯霉素头孢吡肟四环素头孢替坦头孢西丁呋喃妥因头孢噻肟 或头孢曲松磺胺甲恶唑环丙沙星左氧氟沙星甲氧苄啶厄他培南亚胺培南美罗培南哌拉西林甲氧苄啶/磺胺甲恶唑铜绿假单胞菌A组（常规实验/常规报告的药物）B组（首选实验/有选择报告的药物）C组（补充实验/有选择报告的药物）U组（仅用于泌尿道的补充实验的药物）头孢他啶阿米卡星洛美沙星 或氧氟沙星诺氟沙星庆大霉素妥布霉素氨曲南头孢吡肟哌拉西林环丙沙星左氧氟沙星亚胺培南美罗培南哌拉西林/他唑巴坦替

7、卡西林葡萄球菌属A组（常规实验/常规报告的药物）B组（首选实验/有选择报告的药物）C组（补充实验/有选择报告的药物）U组（仅用于泌尿道的补充实验的药物）阿奇霉素 或 克拉霉素 或 红霉素达托霉素氯霉素洛美沙星诺氟沙星克林霉素利奈唑胺环丙沙星 或 左氧沙星 或 氧氟沙星莫西沙星苯唑西林（头孢西丁）泰利霉素青霉素多西环素四环素庆大霉素呋喃妥因甲氧苄啶/磺胺甲恶唑万古霉素奎奴普汀/达福普汀磺胺甲恶唑利福平甲氧苄啶肠球菌属A组（常规实验/常规报告的药物）B组（首选实验/有选择报告的药物）C组（补充实验/有选择报告的药物）U组（仅用于泌尿道的补充实验的药物）氨苄西林青霉素达托霉素庆大霉素（仅用于筛选高水

8、平耐药株）环丙沙星左氧氟沙星诺氟沙星利奈唑胺链霉素（仅用于筛选高水平耐药株）奎奴普汀/达福普汀呋喃妥因万古霉素四环素洋葱伯克霍尔德菌 嗜麦芽窄食单胞菌A组（常规实验/常规报告的药物）B组（首选实验/有选择报告的药物）甲氧苄啶/磺胺甲恶唑头孢他啶氯霉素左氧氟沙星美罗培南米诺环素替卡西林/克拉维酸A组（常规实验/常规报告的药物）B组（首选实验/有选择报告的药物）甲氧苄啶/磺胺甲恶唑头孢他啶氯霉素左氧氟沙星米诺环素替卡西林/克拉维酸CLSI 注解a.“警告”：对分离于CSF 中的细菌，下列抗微生物药物不予选择用于常规报告。这些抗微生物药物对于治疗细菌性CSF感染可能无效，不予采用： 口服抗生素只针对

9、一、二代头孢菌素（头孢呋辛肠外用药除外）以及头霉素、克林霉素、大环内酯类、四环素类、氟喹诺酮类b.当从粪便中分离到沙门菌和志贺菌，应作药敏试验。只有氨苄西林、喹诺酮和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑可用于常规试验报告。此外，对于肠道外沙门菌分离菌株，应测试并报告氯霉素和一种3代头孢菌素。C.测试红霉素可以预报阿奇霉素、克拉霉素和地红霉素的敏感性及耐药性。d.对四环素敏感的菌株也对多西环素和米诺环素敏感。院感需要监测的几种耐药模式 MRSA VRSA VRE ESBLs PDR/PA CRAB CRE MRSA 耐苯唑西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）: 对现在可用的所有内酰胺类抗生素是耐药的。（青霉素类、头孢类、复合制剂、氨曲南、碳青霉烯类） VRSA ESBLs(超广谱B内酰胺酶） 2010年以前CLSI标准: ESBLs（+）报告所有的一、二、三代头孢菌 素及安曲南耐药，不管其体外敏感与否。 2010年以后CLSI标准: 不需要修正结果 Rx：首选碳青酶烯类、也可选用含酶抑制剂的抗生素复合制剂，如特治星、舒普深等。碳青酶烯酶产碳青霉烯酶菌株主要发生在鲍曼不动杆菌(CRAB)、铜绿假单胞菌(CRPA)、部分肠杆菌科细菌（CRE)可水解各种广谱-