2020届-二轮复习-生物技术实践-课件-47-张-(全国通用)

1、2020届-二轮复习-生物技术实践-课件-47-张-(全国通用)2020届-二轮复习-生物技术实践-课件-47-张-(知识主线思维串联尿素稀释涂布平板法刚果红染色法醋酸菌乳酸菌高压蒸汽灭菌法平板划线法碳源、氮源、水和无机盐水蒸气蒸馏法纸层析法鉴定知识主线思维串联尿素稀释涂布平板法刚果红染色法醋酸菌乳酸菌1.培养基制备与微生物纯化技术微专题1 微生物的培养与应用称量灭菌接种环梯度稀释1.培养基制备与微生物纯化技术微专题1 微生物的培养与应提醒：为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物实验一般会设置空白对照：随机取若干灭菌后的空白平板培养基在适宜条件下培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成。平板划线

2、法只适用于微生物的纯化，不适合进行计数，并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯。末端可分离得到一个单独的细菌细胞提醒：为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物实验一般会设置空2.微生物分离与计数的两个实例酚红变红纤维素纤维素分解菌纤维素消失透明圈2.微生物分离与计数的两个实例酚红变红纤维素纤维素分解菌纤维1.(2019全国卷，37)生物选修1：生物技术实践(15分)已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5 g/L)。号培养基：氯化钠(5 g/L)，硝酸铵(3 g/L)，其他无

3、机盐(适量)，X(15 g/L)。号培养基：氯化钠(5 g/L)，硝酸铵(3 g/L)，其他无机盐(适量)，X(45 g/L)。1.(2019全国卷，37)生物选修1：生物技术实回答下列问题。(1)在号培养基中，为微生物提供氮源的是_。、号培养基中为微生物提供碳源的有机物是_。(2)若将土壤悬浮液接种在号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会_，其原因是_。(3)号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是_。(4)假设从号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长

4、提供_和_。回答下列问题。解析(1)牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏、蛋白胨为微生物提供了氮源，而号、号培养基中除X外的其他物质均不含碳，所以能为微生物提供碳源的有机物是X。(2)因为号培养基中碳源只有X，相当于是选择培养基，只有能降解X的细菌才能增殖，而不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖。(3)要对菌落进行计数，应采用稀释涂布平板法进行接种。(4)在有氧条件下，丙酮酸参与细菌的有氧呼吸，可以为该菌的生长提供能量和合成其他物质的原料。答案(1)牛肉膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的细菌能够增殖(3)稀释涂布平板法(4)能量合成其他物质的原料解析(1)牛肉膏蛋白胨

5、培养基中，牛肉膏、蛋白胨为微生物提供2.(2019包头质检)有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。某生物兴趣小组的同学设计如图所示的实验流程来分离纯化高效降解苯磺隆的微生物。据此回答下列问题：2.(2019包头质检)有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使(1)实验所用的培养基只能以苯磺隆作为_，原因是_。(2)对培养基进行灭菌，常采用的方法是_，检测灭菌是否彻底的方法是_。(3)图示分离纯化菌株时，所用的接种方法是_，由图推测该同学接种时可能的操作失误是_。多次重复a、b过程的目的是_。(4)为测定所获微生物降解苯磺隆的能力，其基本思路是_。(1)实验所用的培养基只能以苯磺隆作为_，原因

6、解析(1)分离降解苯磺隆的微生物的培养基应以苯磺隆作唯一碳源，不能分解苯磺隆的微生物难以在此培养基上正常生长和繁殖而达到分离目的。(2)培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法；检测灭菌是否彻底，一般会设置空白对照，即将灭菌冷却后的培养基在恒温箱中倒置培养一段时间，观察是否有菌落产生，若有说明灭菌不彻底。(3)分离纯化菌株时，常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，图示接种为稀释涂布平板法；该同学未涂布均匀，导致培养基有的地方菌落较多，有的地方无菌落；多次重复a、b过程是为了分离高效降解苯磺隆的菌株。(4)为测定所获微生物降解苯磺隆的能力，可将筛选出的一定量的菌株加入到苯磺隆溶液中，检测单位时间内苯磺

7、隆的分解速率。解析(1)分离降解苯磺隆的微生物的培养基应以苯磺隆作唯一碳答案(1)唯一碳源只有能降解苯磺隆的微生物才能在此培养基上正常生长和繁殖，从而达到分离目的(2)高压蒸汽灭菌法将灭菌冷却后的培养基在恒温箱中倒置培养一段时间，观察是否有菌落产生(3)稀释涂布平板法涂布不均匀进一步筛选纯化获得高效降解苯磺隆的菌株(4)将筛选出的一定量的菌株加入到苯磺隆溶液中，检测单位时间内苯磺隆的分解速率(合理即可)答案(1)唯一碳源只有能降解苯磺隆的微生物才能在此培养基3.(2019天一大联考)有些耐热、抗辐射的细菌具有吸附重金属和降解芳烃类物质的特性，极端干燥炎热的沙漠环境中耐热和抗辐射的细菌数量较多。

8、请回答下列相关问题：(1)若要获得所需菌株，可从吐鲁番库木塔格沙漠中采集土样，原因是_。(2)培养微生物要制作培养基，虽然各种培养基的配方不同，但一般都含有_和无机盐，对培养基进行高压蒸汽灭菌的目的是_。培养细菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性，pH调节应在灭菌之_(填“前”或“后”)。3.(2019天一大联考)有些耐热、抗辐射的细菌具有吸附重(3)为了增加耐热、抗辐射菌的浓度，可在稀释涂布到培养基之前进行_培养，采用_法或平板划线法进行接种，在进行平板划线时，第二次及其后的划线操作总是从上一次划线的末端开始，原因是_。将培养基放在高温辐射(50 、紫外线照射5 min)条件下培养的目的是_

9、。(3)为了增加耐热、抗辐射菌的浓度，可在稀释涂布到培养基之前解析(1)根据目的菌株对生存环境的要求，应到相应的环境中去寻找，若要获得耐热、抗辐射的菌体可从吐鲁番库木塔格沙漠中采集土样。(2)一般培养基中都含有水、碳源、氮源和无机盐，高压蒸汽灭菌可将物体内外所有的微生物杀灭。为了保证培养基不被杂菌污染，pH调节应在灭菌之前。(3)可采用选择培养增加耐热、抗辐射菌的浓度。微生物的接种方法包括稀释涂布平板法和平板划线法，在进行平板划线时，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，因此第二次以及其后的划线操作总是从上一次划线的末端开始，这样便于获得单个菌落。为了筛选耐热、抗辐射的菌体，需将培养基放在高温辐

10、射(50 、紫外线照射5 min)条件下培养。解析(1)根据目的菌株对生存环境的要求，应到相应的环境中去答案(1)根据目的菌株对生存环境的要求，需到相应的环境中去寻找(答案合理即可)(2)水、碳源、氮源杀灭培养基中的所有微生物，为所需微生物的培养提供一个无菌环境前(3)选择稀释涂布平板线条末端细菌的数目比线条起始处要少，易得到单个菌落筛选得到耐热、抗辐射的菌体答案(1)根据目的菌株对生存环境的要求，需到相应的环境中去1.理清“4”种传统发酵食品的制作技术微专题2传统发酵技术的应用有氧、无氧1.理清“4”种传统发酵食品的制作技术微专题2传统发酵技术有氧有氧无氧有氧有氧无氧2.把握控制杂菌的“四大

11、措施”(1)通过发酵条件控制杂菌。无氧发酵时的无氧环境可以抑制好氧菌。乳酸菌发酵、酒精发酵形成的酸性环境抑制杂菌繁殖。(2)利用盐控制杂菌：如腐乳的制作。(3)利用酒精控制杂菌：如果酒、腐乳的制作。(4)利用香辛料控制杂菌：如腐乳、泡菜的制作。2.把握控制杂菌的“四大措施”3.理解乳酸菌、乳酸、亚硝酸盐的数量(含量)随时间变化的曲线3.理解乳酸菌、乳酸、亚硝酸盐的数量(含量)随时间变化的曲线题型传统发酵技术的应用(2019四川宜宾二诊)回答下列关于生物技术实践的问题。(1)某同学利用鲜苹果汁来制作果酒和果醋时，在发酵装置的排气口上连接的胶管长而弯曲的目的是_。利用果酒进行果醋发酵之前，需要调整

12、的发酵条件是_。(2)在泡菜的腌制过程中，需要进行密封发酵，原因是_；并注意控制腌制的_等：还要跟踪检测腌制过程中产生的亚硝酸盐的含量，其原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与_发生重氮化反应后，与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。题型传统发酵技术的应用(3)腐乳制作过程中防止杂菌污染的措施有_(答出两点即可)。腐乳易被人体吸收的原因是_。答案(1)防止空气中微生物的污染通入氧气，将温度设置为3035 (2)乳酸菌是厌氧菌时间、温度和食盐用量对氨基苯磺酸(3)用来腌制腐乳的玻璃瓶洗刷干净后要用沸水消毒；装瓶时操作要迅速、小心；整齐地摆放好豆腐、加入卤汤后，要用胶条将瓶口密封；封瓶时，最好将

13、瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染(其他合理答案也给分)毛霉等微生物产生的蛋白酶将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸(3)腐乳制作过程中防止杂菌污染的措施有_1.图解酶的应用与固定化微专题3酶的应用1.图解酶的应用与固定化微专题3酶的应用2.比较固定化酶与固定化细胞2.比较固定化酶与固定化细胞3.加酶洗衣粉的洗涤效果的探究实验及变量分析3.加酶洗衣粉的洗涤效果的探究实验及变量分析题型一酶在食品加工及洗涤中的应用1.据图分析回答下列问题：题型一酶在食品加工及洗涤中的应用(1)酶所降低的活化能可用图1中_段来表示。如果将酶催化改为无机催化剂催化该反应，则b在纵轴上将_

14、(上移/下移)。(2)图2中能正确表示酶量增加1倍时，底物浓度和反应速率关系的是_(填“A”或“B”)。(3)某实验小组为探究洗衣粉加酶后的洗涤效果，将一种无酶洗衣粉分成3等份，进行了3组实验。甲、乙组在洗衣粉中加入1种或2种酶，丙组不加酶，在不同温度下清洗同种化纤布上的2种污渍，其他实验条件均相同，下表为实验记录：(1)酶所降低的活化能可用图1中_段来表示。如2020届-二轮复习-生物技术实践-课件-47-张-(全国通用)甲组在洗衣粉中加入的酶是_；乙组在洗衣粉中加入的酶是_。如果甲、乙和丙3组均在水温为90 时洗涤同一种污渍，请比较这3组洗涤液效果之间的差异并说明理由。解析(1)酶能降低化

15、学反应的活化能，由图可知，ab段表示酶所降低的活化能。由于无机催化剂的催化效率没有酶高，因此将酶催化改为无机催化剂催化，b在纵轴上将上移。(2)酶浓度增加，酶促反应速率加快，选B。(3)由表格数据可推知，甲组在洗衣粉中加入的酶是蛋白酶。乙组在洗衣粉中加入的酶是蛋白酶和脂肪酶。如三组的水温都在90 ，则三组洗涤效果几乎没有差别，因为高温使酶变性失活。答案(1)ab上移(2)B(3)蛋白酶蛋白酶和脂肪酶没有差异，因为高温使酶变性失活甲组在洗衣粉中加入的酶是_；乙组在洗衣粉中加题型二酶和细胞的固定化技术及应用2.下图1表示制备固定化酵母细胞的某步操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图，请

16、据图分析回答：题型二酶和细胞的固定化技术及应用(1)图1中，将溶化好的海藻酸钠溶液_，加入已活化的酵母细胞，进行充分搅拌，使其混合均匀，再转移至注射器中。(2)图1中X溶液为_，其作用是_。(3)某同学在图1过程结束后得到图3所示的实验结果，出现此结果的可能原因有海藻酸钠浓度过_(“高”或“低”)或注射器中的混合液推进速度过_(“快”或“慢”)。(4)图1中制备的凝胶珠用_后再转移到图2装置中，发酵过程中搅拌的目的是_。(1)图1中，将溶化好的海藻酸钠溶液_，加入已解析(1)将溶化的海藻酸钠冷却至室温，才能与活化的酵母细胞混合，以免高温使酵母细胞失活。(2)将混合液滴加到CaCl2溶液中固定化

17、酵母细胞，故图1中X溶液为CaCl2溶液，作用是使海藻酸钠形成凝胶珠。(3)图3中所示的凝胶珠不是圆形或椭圆形，可能原因是海藻酸钠浓度偏高或注射器中的混合液推进速度过快。(4)制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中进行发酵，发酵过程中搅拌的目的是使培养液与酵母细胞充分接触，以利于发酵过程的顺利进行。答案(1)冷却至室温(2)CaCl2溶液使海藻酸钠形成凝胶珠(3)高快(4)蒸馏水洗涤使培养液与酵母菌充分接触解析(1)将溶化的海藻酸钠冷却至室温，才能与活化的酵母细胞1.蛋白质的提取与分离(1)原理与方法微专题4蛋白质及植物有效成分的提取、分离分子的形状和大小电荷琼脂糖凝胶电泳1.蛋白质的提

18、取与分离微专题4蛋白质及植物有效成分的提取、(2)实验血红蛋白的提取和分离样品处理与粗分离去除杂蛋白血红蛋白溶液透析小分子杂质(2)实验血红蛋白的提取和分离去除杂蛋白血红蛋白溶液透析纯化与纯度鉴定凝胶色谱法移动速度不同纯化与纯度鉴定凝胶色谱法移动速度不同2.植物有效成分的提取(1)水蒸气蒸馏、压榨、萃取三种方法的比较2.植物有效成分的提取2020届-二轮复习-生物技术实践-课件-47-张-(全国通用)(2)把握物质分离的5种方法分离油水混合物：分液法。除去固体物和残渣：过滤法。除去液体中质量较小的固体残留物：离心法。除去芳香油中的残留水分：加入无水硫酸钠后过滤。除去萃取液中的有机溶剂：蒸馏法。

19、注：胡萝卜素不溶于水，其萃取剂应为具有较高沸点的水不溶性有机溶剂如石油醚(丙酮、乙醇为水溶性有机溶剂，则不宜使用)萃取加热时要加装回流冷凝装置，目的是防止加热时有机溶剂挥发。胡萝卜素在人体肝脏中可被氧化成两分子的维生素A，因此可用于治疗因缺乏维生素A引起的夜盲症等。(2)把握物质分离的5种方法题型一蛋白质的提取、分离1.下列为凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入(甲图)和洗脱(乙图)示意图，请据图回答下列问题：题型一蛋白质的提取、分离(1)装填凝胶色谱柱时，需要一次性_(填“缓慢”或“快速”)倒入，并轻轻敲打使凝胶装填紧密而不具有气泡，否则必须重装。(2)用吸管加样时必须注意正确操作以避免破坏凝

20、胶面，加样操作应如甲图所示吸管口沿管壁环绕移动进行，形成_(填“滴灌加样”或“贴壁加样”)。(3)凝胶色谱法分离血红蛋白的基本过程：样品加入后进行洗脱，而后收集血红蛋白。全过程中，共需要_次打开下端的流出口。收集血红蛋白样品时需把握好时机，即待_时，用试管连续收集流出液。最后收集到的血红蛋白与刚洗脱时收集到的蛋白质相比，后者相对分子质量较_(填“大”或“小”)，原因是_。(1)装填凝胶色谱柱时，需要一次性_(填“缓慢(4)电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。某同学利用电泳技术将得到的蛋白质样品进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的_、_以及分子的形状等。而在

21、测定蛋白质相对分子质量时通常使用的电泳方法为_。(4)电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。某同学利解析(1)装填凝胶色谱柱时，需要一次性缓慢倒入色谱柱内，并轻轻敲打色谱柱，使凝胶装填均匀。(2)加样操作应如甲图所示吸管口沿管壁环绕移动进行，形成贴壁加样，这样有利于保护凝胶面。(3)凝胶色谱法分离血红蛋白的过程是先加入样品再进行洗脱而后收集血红蛋白，该过程的操作为调节缓冲液面，打开下端流出口，使缓冲液下降到与凝胶面平齐后，关闭下端出口加入蛋白质样品打开下端出口，使样品渗入凝胶床内，等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口色谱柱上端连接缓冲液洗脱瓶打开下端出口，收集分装蛋白质，即可分离得到血红蛋白。所以全过程共需要3次打开下端的流出口。相对分子质量较大的蛋白质通过色谱柱的路程较短、移动速率较快。(4)蛋白质在进行聚丙烯酰胺凝胶电泳时的迁移率取决于它所带净电荷的多少以及分子的大小等因素。为了消除净电荷对迁移率的影响，可以在凝胶中