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文档简介
1、第第 页/共7页检验记录归入建库资料保存。细胞库交细胞库管理员入库,并填写相应管理记录.检验用细胞的储存与管理本公司检验用细胞储存于细胞库专用液氮罐中。细胞库实行实验室管理员与细胞主要负责人共同管理,由实验室管理员管理钥匙与细胞领用台账。本公司检验细胞所用的保存容器上的标识应包括:细胞名称、代次、批号、细胞库类别-瓶号,例如UMR106P620140408WCB1,即为UMR-106细胞第6代,批号为20140408(冻存日期为2014年04月08日),工作细胞库的第一支。细胞存放位置编号应为:液氮罐编号+提篮编号+冻存盒层数,例如X号-0101,即为X号罐的第1提篮的第一层(从下往上数)位置
2、.细胞库管理员应每周检查液氮高度,在液氮危险高度2cm处时需要及时添加液氮,填写附表液氮记录。检验细胞的领用:检验细胞由细胞培养操作人员到细胞库管理员处领取,填写检验用细胞库管理台账。检验细胞的销毁7.5.1检验剩余细胞,不得随意弃置,应采用高压蒸汽灭菌的方式处理(122口,30分钟)或者置于沸水中30min进行销毁。无保存价值、污染或经检验不合格细胞库细胞,应经细胞管理负责人、质量保证部审核,销毁时应在质量保证人员的监督下进行销毁,并应填写好相应的附表八细胞销毁记录。文件归档细胞培养记录按同一细胞系进行归类,按季度归档至实验管理员处。细胞建库资料如:购买合同(复印件)、发票(复印件)、验收记
3、录、细胞检定报告、细胞交接单等均应归档至实验室管理员处。相关文件参考文献中国药典2015年版三部“生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规流程图附录第第1页/共1页第第1页/共1页细胞培养记录(细胞复苏记录)时间:年月日细胞名称代次/编号冻存时间规格/密度冻存人领用数量(支)设备及编号C02培养箱ESCO/CCl170B-8(BZSY022)THERM0/311(201412178)离心机湘智离心机/TD25-WS(BZSY-046)倒置显微镜Motic倒置显微镜/AE31(BZSY-041)细胞计数仪Biorad细胞计数仪/TC20(2016011301)超净工作台苏净安泰超净工作台/SW
4、-CJ2FD(BZSY-007201412145)试剂试液培养基/来源FBS/来源操作过程(*无菌操作)取细胞冻存管,于37C水浴中融化后,立即用移液器转移至ml完全培养基中,rpm离心min,弃上清,用ml兀全培养基重悬细胞。取重悬的细胞悬液计数,结果(若未计数,此处填“/”将重悬的细胞悬液转移至细胞培养瓶中,放入CO2培养箱中培养。备注:操作人/日期第1页/共1页第第1页/共1页第第1页/共1页细胞培养记录(细胞传代、接板记录)时间:年月日细胞名称代次/编号传代时间规格/密度设备及编号C02培养箱ESCO/CCl-170B-8(BZSY022)THERMO/311(201412178)离心
5、机湘智离心机/TD25WS(BZSY046)倒置显微镜Motic倒置显微镜/AE31(BZSY-041)细胞计数仪Bio-rad细胞计数仪/TC20(2016011301)超净工作台苏净安泰超净工作台/SWCJ2FD(BZSY-007201412145)试剂试液0.25%胰酶/来源培养基/来源FBS/来源操作过程(*无菌操作)消化:取上述生长状态良好的细胞,吸弃培养液,用ml0.25%胰酶(或PBS缓冲液)洗涤细胞后弃去,加入ml0.25%胰酶消化,消化结束后,加入ml完全培养基终止反应,轻轻吹下细胞.(悬浮细胞无需此操作)离心:将细胞液转移至离心管中,rpm离心min,弃上清,用ml完全培养
6、基重悬细胞。接板:取重悬的细胞悬液计数,计数结果:cells/ml,取ml细胞悬液,加入ml完全培养基(终浓度cells/ml);口1/孔接板,接板数量:。传代:取重悬的细胞悬液ml,加入ml完全培养基,于培养瓶中培养,传代后信息:备注:操作人/操作人/日期细胞培养记录(细胞冻存记录)操作时间细胞名称代次/编号传代时间规格/密度数量设备及编号C02培养箱ESCO/CCl170B-8(BZSY022)THERMO/311(201412178)离心机湘智离心机/TD25WS(BZSY-046)倒置显微镜Motic倒置显微镜/AE31(BZSY041)细胞计数仪Biorad细胞计数仪/TC20(20
7、16011301)超净工作台苏净安泰超净工作台/SWCJ2FD(BZSY007201412145)试剂试液培养基/来源FBS/来源DMSO/来源操作过程(*无菌操作)冻存液:消化:取上述生长状态良好的细胞,吸弃培养液,用mlO。25%胰酶(或PBS缓冲液)洗涤细胞后弃去,加入ml025%胰酶消化,消化结束后,加入ml完全培养基终止反应,吹下细胞并收集于离心管中.(悬浮细胞无需此操作)离心:将细胞液转移至离心管中,rpm离心min,弃上清,用ml冻存液重悬细胞。计数:取重悬的细胞悬液计数,计数结果:cells/ml。稀释:取ml细胞悬液,加入ml冻存液,混匀(终浓度cells/ml)。分装:将上
8、述含细胞的冻存液分装入冻存管中,ml/支、共支于每支冻存管上标记细胞名称、代次、批号、细胞库类别一瓶号等信息,分装完成后,将冻存管放入冻存盒中,于一70下冷冻过夜,将冻存管转移至液氮管中保存,冻存位置:备注:操作人/日期细胞交接单细胞信息序号细胞名称代次单位数量资料明细序号资料名称原件/复印件份数移交单位签字/日期接收单位签字/日期备注:细胞验收记录细胞名称数量传代代次编号来源验收人/日期复核人/日期验收项目验收结果1、口实物与购买申请单的一致性。实物与交接单的一致性.2、包装完好,标签清晰,封口严密、无渗漏、无启封痕迹。结论:验收合格验收不合格备注:检验用细胞管理台账细胞名称类别口主细胞库工作细胞库细胞来源用途细胞编号/批号细胞密度装量冻存数量存放位置冻存人液氮高度记录液氮罐编号:液氮危险高度:日期工作内容液氮高度操作人备注测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度测量高度
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