2体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则(征求意见稿)

1、 Evaluation Warning: The document was created with Spire.Doc for .NET.附件：体外诊断断试剂分分析性能能评估系系列指导导原则（征征求意见见稿）目 录录1.体外诊诊断试剂剂分析性性能评估估指导原原则编制说说明2.体外诊诊断试剂剂分析性性能评估估指导原原则检测限限3.体外诊诊断试剂剂分析性性能评估估指导原原则线性范范围4.体外诊诊断试剂剂分析性性能评估估指导原原则可报告告范围5.体外诊诊断试剂剂分析性性能评估估指导原原则准确度度（回收收实验）6.体外诊诊断试剂剂分析性性能评估估指导原原则准确度度（方法法学比对对）7.体外诊诊断试剂

2、剂分析性性能评估估指导原原则精密度度8.体外诊诊断试剂剂分析性性能评估估指导原原则干扰实实验9.体外诊诊断试剂剂分析性性能评估估指导原原则稳定性性10.体外外诊断试试剂分析析性能评评估指导导原则参考考值（参参考区间间）附件1：体外诊断试试剂分析析性能评评估指导导原则 编制制说明 体外外诊断试试剂注册册管理办办法（试试行）颁颁布后，体体外诊断断试剂产产品的注注册过程程中要求求提供申申报产品品的分析析性能评评估资料料，产品品性能评评估是产产品研发发、制定定产品标标准等过过程的重重要技术术支持研研究过程程，并可可能对产产品的质质量造成成一定的的影响。 目前前国际上上对体外外诊断试试剂的性性能评估估通

3、常是是以美国国临床实实验室标标准化组组织（CClinnicaal aand Labboraatorry SStanndarrds Innstiitudde以下下称为CCLSII）的相相关标准准为依据据，也是是美国FFDA推推荐采用用的评价价标准，但但我国还还没有相相关的标标准及指指导原则则的要求求。为进一步明明确体外外诊断试试剂分析析性能评评估的技技术要求求，我中中心组织织有关专专家起草草产品分分析性能能评估指指导原则则，以明明确体外外诊断试试剂产品品性能评评估的技技术要求求。体外外诊断试试剂产品品性能评评估包括括检测限限、线性性范围、可可报告范范围、准准确度（回回收实验验）、准准确度（方方法

4、学比比较）、精精密度、干干扰实验验、稳定定性、参参考区间间共九个个项目。起起草的主主要依据据CLSSI发布布的以下下标准:1. C228-AA2: Howw too deefinne aand dettermminee reeferrencce iinteervaals in thee clliniicall laaborratoory; Appproovedd Guuideelinne-SSecoond Ediitioon. 2. EPP5-AA: EEvalluattionn off prreciisioon pperfformmancce oof cclinnicaal cchemmis

5、ttry devvicees; Appprovved Guiidellinee.3. EPP6-AA: EEvalluattionn off thhe llineeariity of quaantiitattivee meeasuuremmentt prroceedurres; A Staatissticcal Appproaach; Appprovved Guiidellinee.4. EPP7-AA: IInteerfeerennce tesstinng iin cclinnicaal cchemmisttry; Appprovved Guiidellinee.5. EPP9-AA2: M

6、etthodd coompaarisson andd biias esttimaatioon uusinng ppatiientt saamplles; Appprovved Guiidellinee-Seeconnd EEdittionn.每项性能的的主要研研究方法法均采用用以上标标准和国国内实际际采用的的评价方方法相结结合的方方法。我中心对于于专家起起草的指指导原则则的初稿稿进行了了适当的的文字调调整，之之后将分分析性能能评估指指导原则则发给十十位相关关专业的的专家征征求意见见。意见见返回后后我们对对专家的的回复意意见进行行了整理理，对有有些意见见进行了了采纳，有有些意见见暂时没没有采纳纳

7、。采纳的意见见，如：线性范范围中的的“3.44计算公公式”的描述述采用专专家意见见将公式式的书写写进行了了文字更更改，与与CLSSI文件件一致；“3.33剔除离离群值”中的YY的均描描述由YYavee改为y；还有一一些文字字性错误误也进行行了修改改。有一些专家家意见因因为对一一些概念念还存在在分歧，因因此暂时时未采纳纳，待经经过专家家讨论会会后再进进行确定定。如“检测限限评估”中的检检测方法法“连续测测定200次，计计算均值值加2SSD的方方法缺少少依据，建建议采用用可报告告范围评评估下限限所提供供的方法法。”；“建议将将批内/批间精精密度”改为“分析内内/分析析间精密密度”；“精密度度是用变

8、变异系数数表示还还是用置置信区间间表示”；参考考值：“结果分分析中应应首先验验证是否否为正态态分布，对对于正态态分布，则则应根据据临床应应用目采采用均值值2SDD或均值值3SDD，对于于偏态分分布则应应选择单单侧955分位位数或双双侧2.5-97.5分分位数”。由于一些概概念在学学术界还还存在分分歧，因因此我们们会通过过上网征征求意见见和专家家会的形形式进行行讨论，找找到最理理想、最最适合企企业及我我国国情情又能保保证产品品质量的的评价方方法。附件2体外诊断试试剂分析析性能评评估指导导原则检测限限（征求求意见稿稿）一、概述检测限（llimiit oof ddeteectiion）是指检测方法可

9、检测出的最低被测量浓度，也称检测低限（lower limit of detection）或最小检出浓度（minimum detectable concentration），有时也称为分析灵敏度（analytical sensitivity）。检测限评估资料是评价拟上市产品有效性的重要依据，也是产品注册所需的重要申报资料之一。本指南基于于国家食食品药品品监督管管理局体体外诊断断试剂注注册管理理办法（试试行）（以以下简称称办法法）的的有关要要求，参参考CLLSI有有关标准准，对定定量检测测方法检检测限的的评估方方法和数数据处理理方法进进行了要要求。其其目的是是为生产产企业进进行定量量检测方方法检测

10、测限评估估提供原则则性指导导，也为为注册管管理部门门审核该该部分分分析性能能评估资资料提供供技术参参考。同同时，本本指南亦亦可指导导临床实实验室进进行定量量检测方方法检测测限评估估。由于体外诊诊断试剂剂产品发发展速度度快、专专业跨度度大，国国家食品品药品监监督管理理局将根根据体外外诊断试试剂发展展的需要要，适时时对本指指南进行行修订。检测限评估估的基本本原则实验人员应应熟悉检检测方法法与仪器器操作；采用合适的的校准品品、质控控品并保保持仪器器处于正正常状态态；用于实验的的试剂应应为同一一批号，且且在有效效期内。检测限的评评估和数数据处理理方法实验材料和和基本要要求空白样本的的制备：空白样样本应

11、不不含被测测物，但但其基质质应与待待测定常常规样本本相同。如如空白样样本难以以得到，可可采用55%牛血血清或人人血清白白蛋白溶溶液。或或根据测测定项目目选用相相应基质质的样本本，但应应注意将将基质效效应减至至最小。实验方法在一次运行行中将空空白样本本重复测测定200次。数据处理数据记录：将测定定结果记记录于表表格中。如如果检测测系统对对于低于于零的结结果报告告为零，应应记录初初始响应应值，如如吸光度度值等。数据统计：计算220次结结果的均均值X与标标准差SSD。结果报告：以空白均值值加两倍倍标准差差报告方方法的检检测限。（X+2SD）附件3体外诊断试试剂分析析性能评评估指导导原则线性范范围（征

12、征求意见见稿） 一一、概述述线性范围评评估资料料是评价价拟上市市产品有有效性的的重要依依据，也也是产品品注册所所需的重重要申报报资料之之一。本指南基于于国家食食品药品品监督管管理局体体外诊断断试剂注注册管理理办法（试试行）、中中华人民民共和国国卫生行行业标准准定量测测定方法法的线性性评价的的有关要要求，参参考CLLSI有有关标准准，对定定量检测测方法中中线性范范围的评评估方法法和数据据处理方方法进行行了原则则性要求求。其目目的是为为生产企企业进行行线性范范围评估估及准备备线性范范围评估估资料提提供原则则性指导导，也为为注册管管理部门门审核该该部分分分析性能能评估资资料提供供技术参参考。同时，本

13、本指南亦亦可指导导临床实实验室建建立定量量测定方方法的线线性范围围或对标标称的线线性参数数进行验验证。由于体外诊诊断试剂剂产品发发展速度度快、专专业跨度度大，国国家食品品药品监监督管理理局将根根据体外外诊断试试剂发展展的需要要，适时时对本指指南进行行修订。二、线性范范围评估估的基本本原则（1）实验验操作人人员应熟熟悉方法法原理与与操作，能能对样本本进行正正确处理理，确保保仪器工工作状态态正常，采采用适当当的校准准品对仪仪器进行行校准。 （2）仪器器的各项项性能指指标（如如精密度度）应与与标称值值相符，不不存在明明显的携携带污染染等。（3）应使使用同批批号试剂剂及校准品。三、线性范范围的评评估及

14、数数据处理理方法1.实验样样本的基基本要求求和制备备方法1.1 基基本要求求（1）样本本基质应应与临床床实验样样本相似似，但不不可采用用含有对对测定方方法具有有明确干干扰作用用物质的的样本，如如溶血、脂脂血、黄黄疸或含含有某些些特定药药物的样样本。进进行血清清学标志志物检测测时，理理想的样样本为分分析物浓浓度接近近预期测测定上限限的混合合人血清清。（2）建立立一种定定量测定定方法的的线性范范围时，需需在预期期测定范范围内选选择7-11个个浓度水水平。如如将预期期测定范范围加宽宽至1330%，在在此范围围内选择择更多的的浓度水水平，然然后依据据实验结结果逐渐渐减少数数据点直直至表现现出线性性关系

15、，可可发现最最宽的线线性范围围。（3）当对对标称线线性参数数进行验验证时，需需在已知知线性范范围内选选择5-7个浓浓度水平平。（4）无论论是建立立或验证证线性范范围，所所选用的的浓度水水平应可可覆盖整整个预期期测定范范围并包包括与临临床有关关的重要要评价浓浓度，如如最小测测定浓度度或线性性范围的的最低限限、不同同的医学学决定水水平、最最大测定定浓度或或线性范范围的高高限等。1.2 制制备方法法（1）不同同浓度水水平的样样本可通通过将高高浓度样样本与低低浓度样样本进行行倍比稀稀释得到到，注意意在进行行液体吸吸取时应应选择精精密度与与准确性性好的移移液装置置。制备备时应将将样本完完全混合合并避免免

16、蒸发或或其他使使样本变变质的情情况。每每份样本本的浓度度与体积积单位应应统一。（2）如果果高/低低浓度血血清的值值未知，可可将每种种血清编编码，用用编码代代表每个个血清的的相对浓浓度。对对于等浓浓度间隔隔样本，可可用连续续整数（如如1、22、3、44、5）代代表连续续样本。进进行数据据处理时时可用样样本号代代替X值值。表1和表22中描述述的样本本制备过过程是按按照等浓浓度间隔隔的设计计进行的的，每个个浓度水水平的样样本量为为1.000mll。制备非等浓浓度间隔隔的样本本时应明明确各样样本间的的浓度关关系，测测定时可可以这些些样本间间的相对对浓度比比值做为为X值。表1：111个浓度度水平的的样本

17、制制备样本号123456低浓度血清清(mll)1.000.900.800.700.600.50高浓度血清清(mll)0.0000.400.50样本号7891011低浓度血清清(mll)0.400.300高浓度血清清(mll)0.600.700.800.901.00表2：5个个浓度水水平的样样本制备备样本号12345低浓度血清清(mll)1.000.750.500.250.00高浓度血清清(mll)0.000.250.500.751.00（3）样本本的特殊殊处理：在无法法得到适适用的人人血清时时，需对对样本进进行一些些特殊处处理以满满足实验验要求。这这

18、些处理理过程包包括稀释释、加入入添加物物或透析析、热处处理等，无无论进行行何种处处理均应应以保持持基质恒恒定为基基本原则则。在评评价报告告中应对对所使用用的稀释释液、添添加物、溶溶剂等的的材料来来源加以以注明。样本稀释液液应选用用由厂家家推荐或或经实验验室证明明可使用用的产品品，如可可采用55%牛血血清白蛋蛋白或人人白蛋白白溶液。欲提高样本本浓度时时可在样样本中添添加分析析物纯品品。在添添加物为为溶液状状态时，应应注意添添加液体体对样本本的稀释释作用（小小于100%）并并注明所所用溶剂剂。2实验过过程2.1 建立线线性范围围：需测定定9-111个浓浓度水平平，每个个浓度水水平重复复测定33-4

19、次次。2.2 验证标标称线性性参数：需测定定4-66个浓度度水平，每每个浓度度水平重重复测定定3-44次。2.3 所有样样本应在在一次运运行中或或几次间间隔很短短的运行行中随机机测定，最最好在一一天之内内完成。3.数据处处理3.1 数数据记录录（1）可参参考表3进行数数据记录录。（2）可采采用其它它形式进进行记录录，但应应注意保保留原始始数据。表3：线性性评价数数据记录录表（111个浓浓度水平平，重复复测定44次）项目：样品：仪器：试剂/批号号：校准品/批批号：操作者：审核者：测定日期：样本号测定1测定2测定3测定4均值1234567891011数据可用性性检查可通过绘制制散点图图对测定定数据

20、的的可用性性进行初初步检查查。以样样本号或或样本浓浓度为XX轴，以以测定结结果为YY轴做图图，在图图上标出出针对每每个样本本的测定定值及每每个浓度度水平的的测定均均值，手手工或用用计算机机做图将将均值点点相连，观观察数据据点与直直线间的的偏差，如如偏差过过大，表表明数据据组存在在明显非非线性，需需要对测测定过程程进行检检查，排排除因操操作错误误所至误误差，并并对样本本进行重重新测定定。如图图形与直直线接近近，表明明可对数数据组继继续进行行统计分分析。3.3 剔剔除离群群值离群值可由由散点图图初步判判断，标标准中建建议采用用格拉布布斯（GGRUBBBS）法法进行离离群值检检验。检检验步骤骤如下:

21、每组数据中中有4个个测定结结果，分分别记为为 y11，y22，y33，y44。(1)将44个测定定值按大大小顺序序排列,最大值值记为mmax,最小值值记为 minn;(2)由44个测定定值计算算均值y 和标准准差S: y=(y11+y22+y33+y44)/44； s=(3)根据据可疑值值 maax或 minn分别按按下式计计算统计计量t:t1 = (maax-y)/SS，t2 = (minn-y)/SS;(4)根据据给定的的显著性性水平aa和重复复测定次次数查表表得临界界值;(5)如tt值大于于临界值值，则相相应的可可疑值为为离群值值。Grubbbs检验验临界值值(Taa)值表表样本数显著性

22、水平平样本数显著性水平平0.050.02550.010.00550.050.02550.010.005531.15331.15551.15551.155541.46331.48111.49221.4966进行多项回回归分析析对数据组进进行多项项回归分分析，得得到一级级、二级级与三级级多项式式。一级级多项式式为直线线，二级级多项式式表示上上升曲线线或下降降曲线，三三级多项项式表示示S形曲曲线（在在测量范范围两端端具有明明显的非非线性）。多项式方程程如下：级数 多项式式 回归自自由度（RRdf）一级 Y = b0 + b1X 2二级 Y = b00 + b1X + b22X2 3三级 Y = b0

23、 + b1X + b22X2 + b3X3 43.5对回回归方程程进行线线性检验验多元回归方方程中以以bi表表示的系系数为回回归系数数。在二二级与三三级方程程中，bb2与bb3为非非线性系系数。对对回归方方程进行行线性检检验就是是对每个个非线性性系数作作t检验验，判断断回归系系数与零零是否有有显著性性差异。bb0与bb1不反反映非线线性，故故不需对对其进行行检验。对对b2与与b3的的检验方方法如下下：计算统计量量t，计计算公式式为：t = bbi/ SSEi其中，SEEi 为每每个非线线性系数数的斜率率标准误误，计算算公式为为：SEi= Syx=(y-Y)其中，Y为为回归方方程预测测值，X与与

24、Y为测定定均值。由公式dff = L*RR-Rdff 计算算自由度度，L为为样本数数，R为为每个样样本的测测定次数数，Rddf为回回归自由由度，即即回归方方程中系系数（包包括b00）的个个数。如如测定55样本，每每个样本本重复测测定4次次，则对对测定数数据进行行回归分分析后其其三级多多项式中中L=5，R=4，RRdf=4，ddf=5*44-4=16。在在t值表表中寻找找t界值值（双边边检验，=0.05），将计算出的t值与界值比较，如p0.05，表示非线性系数与零无显著性差异，数据组被认为具线性，此时可对数据组进行精密度检验，具体方法见后。当精密度符合线性判断要求时，数据分析可结束。如p9PPP

25、PPP L*RR:样本本数*重重复测量量的次数数表B 不精精密度和和ADLL的临界界值（PPctBBnd=5%，dd=3阶阶）/%L*R=110L*R=112L*R=114L*R=116L*R=118L*R=22026.16.0 5.847.27.06.679.0(PP)8.7(PP)7.88PP8.9(PP)8.6(PP)8.48.29PPPP8.9(PP)8.7(PP)9PPPPPP L

26、*RR:样本本数*重重复测量量的次数数表C 不精精密度界界值的常常数最优拟合方方程的阶阶数精密度界值值的常数数（C）一阶或二阶阶6.3三阶6.5附件4体外诊断试试剂分析析性能评评估指导导原则可报告告范围（征征求意见见稿）一、概述定量分析方方法的可可报告范范围（rrepoortaablee raangee）是临临床实验验室发出出检验报报告的依依据之一一，可报报告范围围包括可可报告低低限与可可报告高高限。可可报告范范围评估估资料是是评价拟拟上市产产品有效效性的重重要依据据，也是是产品注注册所需需的重要要申报资资料之一一。本指南基于于国家食食品药品品监督管管理局体体外诊断断试剂注注册管理理办法（试试

27、行）的的有关要要求，参参考CLLSI有有关标准准，对定定量检测测方法中中可报告告范围的的评估方方法和数数据处理理方法进进行了原原则性要要求。其其目的是是为生产产企业进进行可报报告范围围评估及及准备可可报告范范围评估估资料提提供原则则性指导导，也为为注册管管理部门门审核该该部分分分析性能能评估资资料提供供技术参参考。同同时，本本指南亦亦可指导导临床实实验室对对定量分分析方法法的可报报告范围围进行验验证。由于体外诊诊断试剂剂产品发发展速度度快、专专业跨度度大，国国家食品品药品监监督管理理局将根根据体外外诊断试试剂发展展的需要要，适时时对本指指南进行行修订。 二、可报告告范围评评估的基基本原则则1.

28、实验人人员应熟熟悉测定定方法与与仪器操操作。2.采用合合适的校校准品、质质控品并并保持仪仪器处于于正常状状态。3.用于评评价实验验的试剂剂应为同同一批号号，并在在有效期期内。三、可报告告范围的的评估及及数据处处理方法法1.实验样样本的基基本要求求和制备方方法1.1 样样本要求求最好选择与与测定样样本具有有相同基基质的样样本。1.2 制制备方法法（1）低值值样本：将待测测样本（含含被分析析物）用用混合人人血清（含含被分析析物浓度度水平较较低）或或5%牛牛血清白白蛋白生生理盐水水溶液进进行稀释释，产生生接近于于方法线线性范围围低限浓浓度水平平的样本本，一般般为5个个浓度水水平，浓浓度水平平间隔应应

29、小于线线性范围围低限的的10%。（2）高值值样本：选取含含被测物物的高值值样本，必必要时可可添加被被分析物物的纯品品，并计计算出理理论值。使使用混合合血清或或5%牛牛血清白白蛋白生生理盐水水溶液或或测定方方法要求求的稀释释液对高高值待测测样本进进行稀释释，使其其接近于于线性范范围的上上1/33区域内内，并记记录稀释释倍数。至至少选用用三个高高浓度样样本，稀稀释倍数数应为方方法性能能标明的的最大稀稀释倍数数、并适适当增加加或减小小稀释比比例。2.实验过过程在一次运行行中将低低值样本本重复测测定100次，高高值稀释释样本重重复测定定3次。3.数据处处理3.1 数数据记录录：可根根据附表表进行数数据

30、记录录。3.2 数数据统计计：分别别计算AAVE(X)、SDD、CVV值。对对于可报报告范围围高限还还应计算算乘以稀稀释倍数数后的还还原浓度度和相对对偏差。4.结果报报告4.1 可可报告范范围低限限：以方方法性能能标示的的CV值值为可接接受界值值，由数数据中选选取CVV值等于于或小于于可接受受界值的的最低浓浓度水平平做为可可报告范范围低限限。4.2 可可报告范范围高限限：选取取还原浓浓度与理理论浓度度的偏差差（%）等等于或小小于方法法标示CCV值时时的最大大稀释倍倍数为方方法推荐荐的最大大稀释倍倍数，方方法线性性范围的的上限与与最大稀稀释倍数数的乘积积为该方方法可报报告范围围的高限限。附表：可

31、报告范围围（低限限）数据据记录表表浓度1浓度2浓度3浓度4浓度512345678910AVESDCV%可报告范围围（高限限）数据据记录浓度1浓度2浓度3123AVE稀释倍数还原浓度理论浓度相对偏差（%）附件5体外诊断试试剂分析析性能评评估指导导原则准确度度（回收收实验）（征求意见稿） 一一、概述述准确度评估估资料是是评价拟拟上市产产品有效效性的重重要依据据，也是是产品注注册所需需的重要要申报资资料之一一。定量量检测方方法的回回收实验验是评估估准确度度的方法法之一，用用于评估估定量检检测方法法准确测测定加入入纯分析析物的能能力，结结果用回回收率表表示。本指南基于于国家食食品药品品监督管管理局体体

32、外诊断断试剂注注册管理理办法（试试行）的的有关要要求，参参考CLLSI有有关标准准，对采采用回收收实验进进行准确确度评估估的实验验方法和和数据处处理方法法进行了了原则性性要求。其其目的是是为生产产企业采采用回收收实验方方法进行行准确度度评估并并准备准准确度评评估资料料提供原原则性指指导，也也为注册册管理部部门审核核该部分分分析性性能评估估资料提提供技术术参考。同同时，本本指南亦亦可指导导临床实实验室采采用回收收实验方方法对准准确度进进行评估估。由于体外诊诊断试剂剂产品发发展速度度快、专专业跨度度大，国国家食品品药品监监督管理理局将根根据体外外诊断试试剂发展展的需要要，适时时对本指指南进行行修订

33、。二、回收实实验评估估的基本本原则1.实验人人员应熟熟悉测定定方法与与仪器操操作。2.采用合合适的校校准品、质质控品并并保持仪仪器处于于正常状状态。三、回收实实验的评评估及数数据处理理方法1.实验样样本的基基本要求求和制备方方法1.1 选选择合适适浓度的的常规检检测样本本，分为为体积相相同的33-4份份。1.2 在在其中22-3份份样本中中加入不不同量的的待测物物标准，制制成2-3个不不同加入入浓度的的回收样样本，计计算加入入的待测测物的浓浓度。1.3 在在另一份份样本中中加入同同样量的的无被测测物的溶溶剂，制制成基础础样本。2.实验过过程用待评价方方法对回回收样本本和基础础样本进进行测定定，

34、通常常对样本本进行22-3次次重复分分析，取取其均值值进行计计算。3.数据处处理及结结果报告告3.1 计算回回收率：回收率率1 = 回收样本浓度3.2 计算平平均回收收率：平均回收率率 = 3.3 计算比比例系统统误差：比例系系统误差差 = 1000% - 平均均回收率率3.4 可接受受判断：比例系系统误差差不大于于CLIIA 888允许许总误差差的1/2。4 注意意事项：4.1 加加入体积积：加入入的标准准液体积积一般在在样本体体积的110%以以内；并并且保证证在加样样过程中中的取样样准确度度。4.2 加加入待测测物的浓浓度：在在保证总总浓度在在方法分分析测量量范围内内，尽量量使加入入标准液

35、液后样本本中的被被测物浓浓度达到到医学决决定水平平。4.3 标标准物浓浓度：因因为标准准物溶液液加入体体积不到到10%，为保保证得到到不同浓浓度的回回收样本本，标准准物的浓浓度应该该足够高高。5范例某法法测定血血清葡萄萄糖回收收率5.1 样样本制备备：（1）基础础血清：血清11ml（浓浓度5.5mmmol/L）+蒸馏水水0.11ml;（2） 回回收样本本1：血清11ml+0.11ml葡葡萄糖水水溶液（浓浓度222mmool/LL）; （3） 回回收样本本2：血清11ml+0.11ml葡葡萄糖水水溶液（浓浓度555mmool/LL）；5.2 采采用待评评价方法法，按照照从低到到高的浓浓度顺序序，

36、每个个样本测测定3次次，取平平均值。填填入下表表：测定浓度mmmoll/L加入浓度mmmoll/L回收浓度mmmoll/L回收率%基础样本5.00分析样本117.062.002.06103分析样本229.955.004.95995.3 计计算平均均回收率率：平均均回收率率 = 103+992x100% = 10115.4 计计算比例例系统误误差：比比例系统统误差 = |1000% - 1001%| = 1%5.5 可可接受判判断：12TEa=5% 11%, 该方法法的回收收试验（准准确度）试试验可附件6：体外诊断试试剂分析析性能评评估指导导原则准确度度（方法法学比对对）（征征求意见见稿） 一一

37、、概述述很多临床实实验室内内部，通通常会有有两个以以上的检检测系统统，多个个检测系系统之间间应该定定期进行行比对。对对于开放放检测系系统，也也应该对对系统进进行验证证，其中中最重要要的一项项便是准准确度的的评价，准确度评价可以通过方法学比对来实现，利用两种方法的比对对非配套系统的准确度进行评估是评估准确度的方法之一。准确度评估资料是评价拟上市产品有效性的重要依据，也是产品注册所需的重要申报资料之一。本指南基于于国家食食品药品品监督管管理局体体外诊断断试剂注注册管理理办法（试试行）的的有关要要求，参参考CLLSI有有关标准准，对采采用方法法学比对对进行准准确度评评估的实实验方法法和数据据处理方方

38、法进行行了原则则性要求求。其目目的是为为生产企企业采用用方法学学比对进进行准确确度评估估并准备备准确度度评估资资料提供供原则性性指导，也也为注册册管理部部门审核核该部分分分析性性能评估估资料提提供技术术参考。同同时，本本指南亦亦可指导导临床实实验室采采用方法法学比对对进行准准确度评评估。由于体外诊诊断试剂剂产品发发展速度度快、专专业跨度度大，国国家食品品药品监监督管理理局将根根据体外外诊断试试剂发展展的需要要，适时时对本指指南进行行修订。二、方法学学比对的的基本原原则1.熟悉待待评价系系统。2.编写仪仪器标准准操作规规程，其其中包括括校准程程序和室室内质控控程序。3.比对方方法的选选择：对于比

39、较、对对方法，采采用符合合生产厂厂家要求求的实验验室现行行方法，或或采用公公认的参参考方法法。比对对方法应应具有以以下条件件：（1）具有有比实验验样品方方法更好好的精密密度。（2）没有有已知的的干扰物物。（3）同实实验样品品方法具具有相同同单位。比较方法应应该选择择正确性性经过验验证的方方法，根根据实际际条件，选选择的顺顺序如下下：参考考方法、原原装系统统、配套套系统、经经过验证证的非配配套系统统。4.待评价价方法的的处理：进行方法学学对比实实验前，应应该对系系统进行行初步评评价（可可参考NNCCLLS EEP-110），并并且对待待评价方方法进行行精密度度评价（参参考相关关标准），只只有在以

40、以上评价价完成并并且达到到相关标标准后，才才可进行行对比实实验。三、方法学学比对的的评估及及数据处处理方法法1.实验样样本的基基本要求求1.1 按按照实验验对样品品的要求求收集处处理病人人样品，样样本贮存存时间及及条件由由被测组组分的稳稳定性而而定，尽尽可能避避免使用用贮存的的样品。1.2 样样品应来来自于许许多病人人，并且且此病人人的疾病病对于被被测组成成的影响响应该是是知道的的，不要要使用含含有干扰扰此方法法的组分分或条件件(如溶溶血)样样品。1.3 在在具有临临床意义义范围内内即医学学决定水水平范围围内，评评价实验验样品方方法，通通常基本本从低于于参考范范围的低低限到高高于参考考范围的的

41、高限。分分析浓度度尽可能能在报告告的浓度度范围内内均匀分分布。商商品质控控物或者者校准物物可能存存在基质质效应，应应避免使使用。2.实验过过程2.1 每每天选择择8个临临床病人人样本，按按1到88的顺序序编号。用用两种方方法同时时进行实实验，按按照1，22，3，44，5，66，7，88，8，77，6，55，4，33，2，11的样本本顺序进进行测定定。2.2 以以上实验验至少重重复5天天，即至至少分析析40个个不同的的临床病病人样本本。每天天实验必必须进行行校准和和室内质质控。只只有在室室内质控控合格的的情况下下，当天天的实验验室数据据才有效效。3.数据处处理及结结果报告告3.1 记记录测定定结

42、果（XXii和YYjj）。3.2 计计算每个个样本测测定的均均值（和和），样本重重复测定定间差值值的绝对对值（DDXi 和DDYi）及两两种方法法测定结结果间的的差值（-）。3.3 以以对作散点点图。3.4 以以（-）对做偏偏倚图。3.5 以以（Yjjj-XXij）对对做偏倚图。3.7 检检查批内内离群点点：计算算样本重重复测定定间差值值（DXXi 和和DYii）的平平均数，实实验结果果差值超超出平均均数4倍倍时，则则判断为为离群点点。3.8 检检查批间间离群点点：计算算两种方方法测定定结果间间均值差差值(-)的平平均数，超超出该平平均数44倍时，则则判断该该样本为为离群点点。3.9 相相关系

43、数数计算：利用所所有样本双份份测定值值进行相相关系数数计算，如果0.975(或20.95)，则认为X范围适合，数据满足要求。X的误差可以由数据范围给以适当补偿，并且简单的线性回归可以用来评价斜率和截距。如果r200.955，那么么必须通通过分析析另外一一些样品品以扩大大数据范范围，然然后再检检查全部部数据系系列。如如果没有有超出范范围，采采用分步步偏差程程序代替替线性回回归，评评价平均均偏差。3.10回回归计算算：利所所有样本本双份测测定的有有效数据据，计算算两个方方法间的的线性回回归方程程：Y=a+bbX.3.11 偏差估估计：在在医学决决定水平平，利用用回归方方程计算算预期偏偏差,预预期偏

44、差差Bx=a+(b-11)X,相对偏偏差=Bx/X3.12 根据相相关规定定，判定定预期偏偏差、相相对偏差差是否在在规定范范围内。附件7：体外诊断试试剂分析析性能评评估指导导原则精密度度（征求求意见稿稿） 一一、概述述精密度是衡衡量体外外诊断试试剂批内内和批间间变异的的重要指指标，通通常包括括批内和和批间不不精密度度。精密密度评估估资料是是评价拟拟上市产产品有效效性的重重要依据据，也是是产品注注册所需需的重要要申报资资料之一一。本指南基于于国家食食品药品品监督管管理局体体外诊断断试剂注注册管理理办法（试试行）（以以下简称称办法法）的的有关要要求，参参考CLLSI有有关标准准，对定定量检测测方法

45、中中精密度度的评估估和数据据处理方方法进行行了要求求。其目目的是为为生产企业业进行定定量检测测方法中中精密度度的评估估提供原则则性指导导，也为为注册管管理部门门审核该该部分分分析性能能评估资资料提供供技术参参考。同同时，本本指南亦亦可指导导临床实实验室进进行定量量检测方方法的精精密度评评估。由于体外诊诊断试剂剂产品发发展速度度快、专专业跨度度大，国国家食品品药品监监督管理理局将根根据体外外诊断试试剂发展展的需要要，适时时对本指指南进行行修订。二、定义1.批内精精密度是众多种类类精密度度中最基基本的一一个，它它是在严严格的相相似条件件下，所所得到的的最佳的的精密度度。2.批间精精密度指在同一实实

46、验室，由由同一（组组）操作作员在同同一仪器器上，使使用同一一方法和和同种、同同一批号号试剂，在在一段时时间内(一般为为一个月月或200个工作作日)对对同一测测试样品品（常用用质控品品）测量量结果的的精密度度。三、精密度度评估的的基本原原则1.操作者者必须熟熟悉方法法和/或或仪器工工作原理理，了解解并掌握握仪器的的操作步步骤和各各项注意意事项，能能在评估估阶段维维持仪器器的可靠靠和稳定定。2.用于评评估试验验的样品品一般常常采用临临床实验验室收集集的稳定定和冷冻冻贮存的的血清(浆)库库；当实实验室收收集的样样品不稳稳定或不不易得到到时，也也可考虑虑使用稳稳定的、以以蛋白质质为基质质的商品品物质，

47、如如校准品品或质控控品。3.评估精精密度时时，应至至少评估估二个浓浓度水平平样本的的精密度度。当二二个浓度度的精密密度有显显著差异异时，建建议增加加为三个个浓度。所所选样本本浓度应应在测量量范围内内有医学学意义，即即至少有有一个浓浓度在医医学决定定水平(meddicaal ddeciisioon lleveels)左右。不不要为了了得到较较小的精精密度，都都选用较较高值的的样品，甚甚至超出出测量范范围。也也不应选选用靠近近最低检检出限的的样品，此此时所得得的精密密度往往往偏大。相相当多的的检验项项目低值值常无实实际临床床意义，但但有少数数检验项项目，其其低值也也有临床床价值，此此时就需需要评估

48、估有判断断价值的的低值精精密度，适适用时，可可进行功功能灵敏敏度的评评估。如如没有医医学决定定水平，可可在参考考区间上上限左右右选一个个浓度。此此外，再再根据检检验项目目的性质质在线性性区间内内选择另另一个值值。如与与厂商或或文献报报导的精精密度进进行比较较，所选选浓度应应与被比比较精密密度的浓浓度相接接近。否否则，有有可能得得出不恰恰当的结结论。四、精密度度评估的的方法和和数据处处理1.只评估估批内不不精密度度1.1 试试剂和校校准品：应使用用同一种种类、同同一批号号的试剂剂和校准准物,如如可能,只进行行一次校校准。使使用不同同批号试试剂和多多次校准准都会增增加检验验结果的的变异程程度。1.

49、2 评评估方法法：在以以上条件件满足的的情况下下，在一一批内对对样本进进行重复复测定，至至少进行行20次次重复测测定。1.3 质质量控制制：检验验时应同同时至少少测一个个质控品品。当质质控品结结果超出出规定的的失控限限，不论论实验结结果是否否满意都都应弃去去不用，重重新进行行试验以以取得220个实实验数据据。要保保存所有有的质控控数据和和失控处处理记录录。 1.4 数数据收集集：在进进行数据据分析前前，检查查数据中中有无由由于偶然然差错引引起的离离群值(outtlieers)，可用用下述离离群值的的标准；从已收收集的220数据据计算出出总均值值和标准准差，任任何结果果和总均均值的差差值超过过4

50、个标标准差时时，可认认为是离离群值。为为了能收收集到至至少200个有效效数据。除除补充由由于质控控失控而而增加的的测试外外，还应应再增加加由于离离群值不不用于精精密度的的计算所所需增加加的检验验次数。在进行这种种批内精精密度评评估实验验时，一一次只能能有一个个离群值值，当离离群值超超过1个个时，应应怀疑是是否为方方法不稳稳定或操操作者不不熟悉所所致。此此时，应应不用此此次试验验数据。检检查问题题和解决决问题后后重新开开始新的的评估实实验。1.5数据据的记录录：将所所收集到到的数据据记录在在表1：表1 批内内精密度度实验原原始数据据记录序号测量值（均值-测测量值）2121920均值1.6 批批内

51、精密密度估计计值的计计算求出均值：=Xi/n使用下列公公式计算算出批内内标准差差估计值值的标准准差1.7 批批内精密密度估计计值的995%可可信限查统计表得得出自由由度200的上限限公差因因数为11.255，相应应下限公公差因数数为0.75，得得出批内内精密度度的955%可信信区间为为：（批批内精密密度0.775）-（批内内精密度度1.225）2.同时评评价批内内和批间间不精密密度2.1 评评估方法法：每天做2个个批次的的测试，每每批测试试时，对对同一样样品作双双份测量量，共做做20天天。评估估结束时时共有440对，即即80个个测试结结果。从从40批批次测量量中双份份结果的的差值求求出批内内精

52、密度度。从所所有800个数据据计算出出批间精精密度。在实施此项项评估工工作时，必必须由同同一个或或一组操操作者在在同一台台仪器上上进行，应应该使用用相同的的校准品品、相同同种类和和批号的的试剂。所所用时间间不得少少于200个工作作日，这这样所测测到的精精密度能能更好地地反映出出该临床床实验室室定量测测量方法法在一段段时间内内的理想想或最适适的稳定定性。 在每一批次次测量中中，必须须同时测测量质控控品，以以保证结结果是可可靠的，数数据能够够采用。注：也可可以一日日进行一一个批次次测量，一一个批次次中对同同一样品品重复测测量4次次，共测测20个个工作日日，由880个数数据求出出批内和和批间精精密度

53、；如果取得得稳定样样品有困困难，也也可改为为测5日日，每日日2个批批次，每每个批次次测一个个样本88次。仍仍有800个数据据。从110个批批次中每每一样品品8次差差异算出出批内精精密度。从从所有880个结结果计算算出批间间精密度度。2.2数据据的收集集要收集到足足够有效效数据(至少为为80个个数据)。除补补充由于于质控失失控而增增加的测测试外，应应在进行行数据分分析前，检检查数据据中有无无由于偶偶然差错错引起的的离群值值(ouutliier)，可用用下述剔剔除值的的标准；从实施段已已收集的的40对对均值的的数据计计算出总总均值和和标准差差，出现现下列任任何一种种情况都都可认为为是离群群值：（1

54、）任何何一对均均值和总总均值的的差超过过4倍标标准差（2）任何何一对中中二个结结果的绝绝对差值值超过44倍标准准差离群值不用用于精密密度的计计算。在在剔除后后应再增增加检验验次数，以以保证至至少有440批次次，800个数据据进行计计算。注：任何一一次实验验的剔除除值不能能超过总总测量数数的2.5%。当当超过时时，应怀怀疑是否否为方法法不稳定定或操作作者不熟熟悉所致致。此时时应不用用此次试试验数据据，重新新开始新新的试验验。2.3数据据的记录录将所收集到到的数据据记录在在表2表2 精密密度实验验原始数数据记录录序号日期批次1批次2结果1结果2均值结果1结果2均值1219202.4批内内精密度度的

55、计算算按表3要求求对数据据进行进一一步计算算，将结结果填入入表3表3 精密密度实验验原始数数据计算算日批次1批次2（结果1-结果22）2（结果1-结果22）2121920利用表4中中的结果果(3)、(44)可计计算出批批内精密密度Srr： ，其中II=检验验日数2.5 批批间精密密度估计计值的计计算将上述实验验结果记记录在表表4中表4：批间间精密度度实验原原始数据据记录序号日期第一批第二批结果1（均值-结结果1）2结果2（均值-结结果2）2结果1（均值-结结果1）2结果2（均值-结结果2）2121920合计(1)(5)(2)(6)（3）（7）（4）（8）求出均值，公公式为：从上表得出出：求出批

56、间精精密度，公公式为：从上表得出出式中n=检检验总数数2.6 批批间精密密度估计计值的置置信区间间由于检验次次数不可可能无限限增加，当当按规定定方案，多多次重复复测量，就就是在很很好控制制条件下下，也很很难得到到相同的的值，换换言之，通通过这样样实验的的数值只只是精密密度的估估计值，围围绕“真值”而变动动。变动动的范围围大小和和检验次次数密切切相关。人人们往往往在给出出精密度度值外，还还给出其其95%的置信信区间。置信区间与与所测次次数相关关，次数数愈多，可可信限愈愈小。可可以查出出与检次次数相关关自由度度的0.95因因数，乘乘以标准准差值就就可得出出95%可信限限的上、下下值。实实际工作作中

57、，可可查出995%可可信限的的上值的的公差因因数（ttoleerannce facctorr），由此此计算出出95%可信限限。实验验室在报报告精密密度同时时，可给给出955%置信信区间。3.与其它它来源的的精密度度的比较较临床实验室室在测定定方法的的精密度度后，应应评价得得到的精精密度是是否满意意，最简简单办法法就是与与生产企企业（文文献）所所提供的的精密度度进行比比较，判判断是否否存在差差异。如如果临床床实验室室所测的的精密度度小于生生产企业业（文献献）的精精密度，说说明临床床实验室室所得到到的精密密度是合合适的。如如果临床床实验室室测得的的精密度度大于生生产企业业（文献献）的值值，可利利用

58、F-检验法法（F-tesst），即即方差比比值检验验（vaariaancee raatioo teest）对对实验室室测得的的结果和和生产企企业提供供的结果果进行比比较计算算。表55是为此此工作设设计的数数据记录录和计算算表格：表5 与生生产企业业（文献献）声明明批间标标准差的的比较表表实验浓度=声明浓度=实验标准差差=srr或srrr声明标准差差=r或rr方差=srr2或srrr2方差=rr2或rr2测量次数自自由度=n-11声明测量次次数自由由度=nn-1注：标准差差大小常常与浓度度有关，比比较时，必必须检查查二者浓浓度是否否接近一一致，如如差异较较大不应应进行比比较。如如接近一一致，按按

59、下列公公式计算算出F值值，以批批间精密密度为例例： FF=Srrr2/rr2将计算出的的F值和和根据二二组自由由度从表表6中查查到的FF值(pp=0.05)进行比比较，如如计算FF值小于于查表得得出F值值，虽然然实验室室得到的的标准差差大于声声称值，但但在统计计学上无无差异。反反之，说说明实验验室得到到的标准准差没有有达到方方法应达达到的水水平。此此时，实实验室应应该进一一步改善善条件，例例如培训训操作人人员，修修改操作作程序或或者维修修仪器等等再次进进行测定定。仍然然达不到到时，应应与生产产企业讨讨论和取取得协助助。表6 FF分布临临界值表表(p=0.05)分母自由度度分子自由度度5 110

60、 14 220 40 50 1000 2200 051015203040601001205.05 44.744 4.664 4.56 44.466 44.444 44.411 4.339 4.363.33 22.988 2.886 2.77 22.666 22.644 22.599 2.556 2.542.90 22.544 2.442 2.33 22.200 22.188 22.122 2.110 2.072.71 22.355 2.222 2.12 11.999 11.977 11.911 1.888 1.842.53 22.166 2.004 1.93 11.799 11.766 11.