缺血再灌注损伤培训课件

1、教 学 目 标1 掌握缺血-再灌注损伤的概念及英语词汇2 掌握缺血-再灌注损伤的发生机制3 熟悉心肌、脑缺血-再灌注损伤的变化4 了解其他内容缺血再灌注损伤10/8/20221教 学 目 标缺血再灌注损伤10/3/20221血液再灌注后缺血性损伤进一步加重的现象 I/R是在临床实践中采用了一些新技术、新方法后出现的一新课题。这些新技术、新方法在临床的应用大多取得预期的疗效，取得较满意的效果。但是也出现同一技术或同一方法治疗同一种疾病不仅未取得预期疗效，反而使原来缺血的组织出现更为严重的损伤。 因此，临床工作需要迫切解决这一课题。这也是本章讨论的重点。概 念缺血再灌注损伤10/8/20222血液

2、再灌注后缺血性损伤进一步加重的现象 I/R研究背景溶栓疗法器官移植体外循环PTCA冠脉搭桥治疗手段的改进缺血再灌注损伤10/8/20223研究背景溶栓疗法器官移植体外循环PTCA冠脉搭桥治疗手段的改 I/R研究概况：1955年 Sewell报道，结扎狗冠脉后，如突然解除结扎恢复血流，部分动物立即发生室颤而死亡。1960年 Jennings第一次提出了心肌I/R概念1968年 Ames率先报道了 脑I/R1972年 Flore 肾I/R1978年 Modry 肺I/R1981年 Greenberg 肠I/R缺血再灌注损伤10/8/20224 I/R研究概况：缺血再灌注损伤10/3/20224氧反

3、常钙反常pH反常低氧/缺氧正常氧供无钙含钙损伤加重酸中毒纠正酸中毒缺血再灌注损伤10/8/20225氧反常钙反常pH反常低氧/缺氧正常氧供无钙含钙损伤加重酸中毒第一节 缺血-再灌注损伤的原因及条件缺血再灌注损伤10/8/20226第一节 缺血-再灌注损伤的原因及条件缺血再灌注损伤10/组织器官缺血后恢复血液供应 休克时微循环的疏通 冠脉痉挛缓解 心脑肺复苏术后 动脉搭桥 溶栓疗法 PTCA 体外循环 器官移植 断指再植原 因缺血再灌注损伤10/8/20227组织器官缺血后恢复血液供应原 因缺血再灌注损伤10/3/20缺血再灌注损伤的发生条件 为什么同一种疾病使用同一种治疗措施会出现相反的结果呢

4、？这就是要介绍的缺血再灌注损伤的发生条件。（一）缺血时间：实验证明结扎大鼠冠状动脉时间少于5分钟再解除结扎不会发生心肌损伤；结扎时间在510分钟之内再解除结扎发生心肌损伤。如果结扎时间超过10分钟再解除结扎也不发生心肌损伤。因为结扎时间短心肌未受影响，而结扎时间过长，心肌已发生了最为严重的损伤坏死。（二）侧枝循环缺血再灌注损伤10/8/20228缺血再灌注损伤的发生条件 为什么同一种疾病使用同一种治（三）组织对缺氧的耐受性： 耗氧耗能多的组织对缺氧敏感，也即对缺氧不耐受。一旦发生缺血缺氧，组织的代谢、功能首先发生改变。因此，心肌、脑组织容易发生缺血再灌注损伤，动物（大鼠）的心肌也就成为人类研究

5、缺血再灌注损伤发生机制的理想材料。本教材中有关缺血再灌注损伤发生机制的认识大多来源于动物实验。相反，对缺氧耐受的组织不容易发生缺血再灌注损伤。（四）再灌注条件： 低压、低温、低PH、低钠、低钙液灌流，可使心肌再灌注损伤减轻，反之加重再灌注损伤。缺血再灌注损伤10/8/20229（三）组织对缺氧的耐受性：缺血再灌注损伤10/3/20229第二节 缺血-再灌注损伤的发生机制的作用自由基钙超载的作用白细胞缺血再灌注损伤10/8/202210第二节 缺血-再灌注损伤的发生机制的作用自由基钙超载的作用白一、自由基的作用 自由基的概念与类型 外层轨道上含有单个不配对电子 的原子、原子团和分子的总称 1.

6、氧自由基： O2 OH 2. 脂性自由基：L LO LOO 3. 其它：Cl CH3 NO概念类型缺血再灌注损伤10/8/202211一、自由基的作用 自由基的概念与类型 外层轨道上含有单个体内主要活性氧的生物效应及其清除剂活性氧生物效应清除剂或阻断剂超氧阴离子 引发脂质过氧化 超氧化物歧化酶 VE和V别嘌呤醇 钨羟自由基 氧化/还原其它生物活性物质二甲基亚砜甘露醇VCVE谷胱甘肽过氧化氢 产生羟自由基, 过氧化氢酶谷胱甘肽过氧化物酶髓过氧化物酶VC单线态氧 强氧化剂,使脂肪酸自氧化谷胱甘肽金尿酸VCVE烷过氧基 抑制酶活性磷脂氢过氧化物谷胱烷氧基 使生物活性物质交联磷脂氢过氧化物谷胱缺血再灌

7、注损伤10/8/202212体内主要活性氧的生物效应及其清除剂活性氧生物效应清除剂或阻断O2O2OH H2O2H2Oe-e-+2H+e-+H+e-+H+H2O缺血再灌注损伤10/8/202213O2O2OH H2O2H2Oe-e-+2H+e-+H+ 自由基生成增多的机制 1. 血管内皮细胞内黄嘌呤氧化酶的形成增多 2. 中性粒细胞 3. 线粒体 4. 儿茶酚胺的自身氧化 5.诱导型NOS表达增强 6.体内清除活性氧的能力下降缺血再灌注损伤10/8/202214 自由基生成增多的机制 1. 血管内皮细胞内黄嘌呤氧化酶的ATPADPAMP缺血期再灌注期腺嘌呤核苷次黄嘌呤核苷次黄嘌呤黄嘌呤脱氢酶黄嘌

8、呤氧化酶黄嘌呤 O2H2O2O2O2黄嘌呤氧化酶尿酸+O2H2O2OH Ca2+1.黄嘌呤氧化酶的形成增多缺血再灌注损伤10/8/202215ATPADPAMP缺血期再灌注期腺嘌呤核苷次黄嘌呤核苷次组织缺血ATP降解ADPAMP腺苷肌酐次黄嘌呤细胞内钙超载激活钙依赖的蛋白水解酶黄嘌呤脱氢酶黄嘌呤氧化酶黄嘌呤尿酸脱电子O2接受电子氧自由基损伤组织缺血再灌注损伤10/8/202216组织缺血ATP降解ADPAMP次黄嘌呤细胞内钙超载激活钙依赖2. 中性粒细胞：呼吸爆发3. 线粒体 4. 儿茶酚胺的自身氧化 单胺氧化酶肾上腺素 肾上腺素红+ O25.诱导型NOS表达增强，NO生成增多6.体内清除活性

9、氧的能力下降缺血激活补体系统细胞膜分解趋化物质激活中性粒细胞细胞色素氧化酶系统功能失调Ca2+进入线粒体使Mn-SOD减少，清除OFR的能力缺血再灌注损伤10/8/2022172. 中性粒细胞：呼吸爆发缺血激活补体系统细胞膜分解趋化物质 自由基的损伤作用 1. 膜脂质过氧化 2. 蛋白质的功能抑制 3. 破坏核酸和染色体 4. 细胞间基质破坏 缺血再灌注损伤10/8/202218 自由基的损伤作用 1. 膜脂质过氧化缺血再灌注损伤11. 膜脂质过氧化 破坏膜的正常结构 间接抑制膜蛋白的功能 促进自由基及其它生物活性物质生成 减少ATP的生成缺血再灌注损伤10/8/2022191. 膜脂质过氧化

10、 破坏膜的正常结构 穿膜糖 蛋白膜表面蛋白-SHSH-CH3-S-磷脂缺血再灌注损伤10/8/202220穿膜糖膜表面蛋白-SHSH-CH3-S-磷脂缺血再灌注损伤1蛋白质断裂蛋白质-蛋白质交联-S-S-CH3-S-脂质-脂质交联O二硫交联脂质-蛋白 质交联氨基酸 氧化OHHO脂肪酸氧化OHHO从氧化的脂肪酸释出的 丙二醛缺血再灌注损伤10/8/202221蛋白质断裂蛋白质-蛋白质交联-S-S-CH3-S-脂质-脂质1. 膜脂质过氧化 破坏膜的正常结构 间接抑制膜蛋白的功能 促进自由基及其它生物活性物质生成 减少ATP的生成缺血再灌注损伤10/8/2022221. 膜脂质过氧化 破坏膜的正常结

11、构 2. 蛋白质的功能抑制缺血再灌注损伤10/8/2022232. 蛋白质的功能抑制缺血再灌注损伤10/3/202223蛋白质断裂蛋白质-蛋白质交联-S-S-CH3-S-O二硫交联脂质-蛋白 质交联氨基酸 氧化缺血再灌注损伤10/8/202224蛋白质断裂蛋白质-蛋白质交联-S-S-CH3-S-O二硫交联3. 破坏核酸和染色体碱基羟化 / DNA断裂染色体畸变 / 细胞死亡 自由基可使碱基羟化或DNA断裂，从而引起染色体畸变或细胞死亡，这种作用80%为OH. 所致，因OH.易与脱氧核酸及碱基反应并使其结构改变。4.细胞间基质破坏 自由基可使透明质酸酶降解、胶原蛋白交联，从而使细胞间基质变得疏松

12、，弹性减退。缺血再灌注损伤10/8/2022253. 破坏核酸和染色体4.细胞间基质破坏缺血再灌注损伤10第二节 缺血-再灌注损伤的发生机制的作用自由基钙超载的作用白细胞缺血再灌注损伤10/8/202226第二节 缺血-再灌注损伤的发生机制的作用自由基钙超载的作用白 二、钙超载（calcium overload） 各种原因引起细胞内钙含量异常增多并导致细胞结构损伤和功能代谢障碍的现象。 正常:细胞外Ca2+ 10-3mol/L 细胞内Ca2+ 10-7mol/L细胞外Ca2+ 是细胞内Ca2+ 10000倍 依赖ATP的钙泵 钠钾泵 Na+-Ca2+交换系统 肌浆网（SR） 钙结合蛋白（CaB

13、P) 线粒体摄取细胞膜细胞内维持因素缺血再灌注损伤10/8/202227 二、钙超载（calcium overload）细胞膜细胞内 二、钙超载（calcium overload） 细胞内钙超载的机制Na+/Ca2+交换异常 （1）Na+ 直接激活Na+/Ca2+交换蛋白缺血 ATPNa+泵细胞内Na+ 激活Na+-Ca2+交换蛋白Ca2+进入细胞 （2） H+ 间接激活Na+/Ca2+交换蛋白缺血时：无氧代谢产生H+增多再灌时：组织间液H+迅速减少细胞内外较高的 H+浓度差激活Na+/H+交换蛋白细胞内Na+ 激活钠泵 激活Na+/Ca2+交换蛋白 （3） PKC活化 间接激活Na+/Ca2

14、+交换蛋白 Na+/H+缺血再灌注损伤10/8/202228 二、钙超载（calcium overload） 细胞内1去甲肾上腺素GqPLCP1IP3Ca2+Ca2+肌浆网DGPKCH+Na+Ca2+肌丝(3)PKC对Na+/Ca2+交换蛋白的间接激活如1肾上腺素能受体激活G蛋白-PLC H + /Na +交换激活缺血再灌注损伤10/8/2022291去甲肾上腺素GqPLCP1IP3Ca2+Ca2+肌浆网D二、钙超载 细胞内钙超载的机制1.Na+/Ca2+交换异常 2.生物膜损伤 细胞膜损伤 线粒体及肌浆网膜损伤 缺血组织因能量不足，细胞膜及肌浆网膜的钙离子泵活性降低，不能有效将细胞内的钙离子

15、泵至细胞外或摄入肌浆网，胞浆中钙离子增多。 自由基损伤细胞膜，细胞外钙离子顺浓度差进入细胞内。 以上是缺血组织内钙离子超载的发生机制。缺血再灌注损伤10/8/202230二、钙超载 细胞内钙超载的机制缺血再灌注损伤10/3/20 钙超载引起缺血-再灌注损伤的机制 1. 线粒体功能障碍 2. 激活磷脂酶：加重膜损伤 3. 心律失常 4. 促进自由基生成 5. 肌原纤维过度收缩(1)胞浆内高Ca2+(2)再灌注期消除了H+对心肌收缩的抑制作用Ca2+PO33+Ca3(PO3)2(黄嘌呤脱氢酶黄嘌呤氧化酶)ATPNa+/Ca2+ 一过性内向离子流缺血再灌注损伤10/8/202231 钙超载引起缺血-

16、再灌注损伤的机制Ca2+PO33+C第二节 缺血-再灌注损伤的发生机制的作用自由基钙超载的作用白细胞缺血再灌注损伤10/8/202232第二节 缺血-再灌注损伤的发生机制的作用自由基钙超载的作用白三、白细胞的作用 1.血管内皮细胞与白细胞激活 粘附分子（adhesion molecule）：是指由细胞合成的、可促进细胞与细胞之间、细胞与细胞外基质之间粘附的一大类分子的总称，如整合素、选择素、细胞间粘附分子、血管细胞粘附分子及血小板内皮细胞粘附分子等。在维持细胞结构完整和细胞信号转导中起重要作用。内皮释放粘附分子白细胞释放趋化介质白细胞内皮细胞缺血再灌注损伤10/8/202233三、白细胞的作用

17、内皮释放粘附分子白细胞释放趋化介质白细胞内皮 2.介导的损伤 微血管损伤(无复流现象，no-reflow phenomenon)机制：（1）微血管血液流变学改变：白细胞粘附 （2）微血管口径改变：内皮肿胀；缩血管物质的释放 （3）微血管通透性增高 细胞损伤 激活的VEC和N可释放大量生物活性物质如FR、蛋白酶、细胞因子微血管通透性自由基、粒细胞血液流变学改变白细胞粘附聚集、血流缓慢微血管口径的改变内皮细胞肿胀缩血管物质扩血管物质缺血再灌注损伤10/8/202234微血管通透性自由基、粒细胞血液流变学改变白细胞粘附聚集、血第三节 缺血-再灌注损伤时机体的功能及代谢变化 一、心脏缺血-再灌注损伤的

18、变化 心功能变化 1. 心律失常 电生理改变：兴奋性、传导性ECG改变:缺血心肌对应部位ST段抬高，R波振幅 再灌使R波振幅迅速，ST段高度恢复原水平，U波 出现 心律失常发生率：50-80%室性心律失常多见与缺血t、缺血范围、缺血程度、再灌V、电解质紊乱有关兴奋折返、-R兴奋自律性、纤颤阈电解质紊乱缺血再灌注损伤10/8/202235第三节 缺血-再灌注损伤时机体的功能及代谢变化 一、心脏缺2. 心肌舒缩功能降低心肌顿抑myocardial stunning可逆性损伤不可逆性损伤心肌舒缩功能器质性损伤心肌顿抑:在再灌注血流已恢复后一定时间内，心机出现的可逆性收缩功能降低的现象。缺血再灌注损伤

19、10/8/2022362. 心肌舒缩功能降低心肌顿抑myocardial stun可逆性I-R损伤胞浆Na+超载Na+/Ca2+：O2.-H2O2OH.脂质过氧化蛋白质及酶失活肌浆网钙转运蛋白质膜通离子泵线粒体损伤收缩蛋白损伤钙超载ATPCa2+敏感性心肌舒缩功能(可逆性抑制可持续12小时)心肌顿抑的发生机制:缺血再灌注损伤10/8/202237可逆性I-R损伤胞浆Na+超载Na+/Ca2+：O2.-H (二)心肌代谢变化（ATP） (三)心肌超微结构的变化 线粒体损伤 基质内Ca2+蓄积颗粒增多 肌原纤维断裂缺血再灌注损伤10/8/202238 (二)心肌代谢变化（ATP）缺血再灌注损伤10/3/2二、脑缺血-再灌注损伤的变化 细胞代谢的变化 组织学变化三、其它器官缺血-再灌注损伤的变化如肾，线粒体损伤，急性肾小管坏死