DB50-T 1245-2022 绿色食品 秀珍菇生产技术规范

1、ICS 65.020.01CCSB39DB50重 庆 市 地 方 标 准DB50/T12452022绿色食品秀珍菇生产技术规范2022-06-01发布2022-09-01实施重庆市市场监督管理局 发布DB50/T12452022目次前言.II绿色食品秀珍菇生产技术规范.11范围.12规范性引用文件.13术语和定义.14菌种场的设置与技术要求.35母种制作.46原种制作.57栽培种制作.58液体菌种制作.69菌种质量要求.610抽样及菌种质量检验.611菌种的标签、标志、包装、运输及贮存.612栽培技术要求.613病虫害防治.814采收与分级.8附录A（规范性）秀珍菇常用原种和栽培种培养基及其配

2、方.10附录B（规范性）秀珍菇生产环境、接种器具可选用的化学消毒剂.11附录C（规范性）秀珍菇常用栽培基质及其配方.12IDB50/T12452022前言本文件按照GB/T1.1-2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由重庆市农业农村委会提出并归口。本文件起草单位：重庆市农业科学院、重庆市永川区食用菌行业协会。本文件主要起草人：韦静宜、陈红霞、龙琦、何叶、黄建坤、胡玮、黄英、田时炳、范永前、张权利。IIDB50/T12452022IIIDB50/T12452022绿色食品秀珍菇生产技

3、术规范1范围本文件规定了秀珍菇生产的术语和定义、菌种的制作、菌种场的设置与技术要求、母种制作、母种制作、栽培种制作、液体菌种制作、菌种质量要求、抽样及菌种质量检验、菌种的标签、标志、包装、运输及贮存、栽培技术要求、病虫害防治以及采收与分级技术要求。本文件适用于室内秀珍菇鲜品的生产。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB5749-2006生活饮用水卫生标准GB19172-2003平菇菌种GB/T12728-2006食用菌术语NY50

4、99-2002无公害食品食用菌栽培基质安全技术要求NY/T391-2013绿色食品产地环境质量NY/T528-2010食用菌菌种生产技术规程NY/T1846-2010食用菌菌种检验规程NY/T1935-2010食用菌栽培基质质量安全要求3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1秀珍菇Pleurotuspulmonarius属担子菌门（Basidiomycota）、伞菌目（Agaricales）、侧耳科（Pleurotaceae）、侧耳属（Pleurotus）凤尾菇，俗称秀珍菇。注：其菌盖呈扁半球至平展，倒卵形或近扇形，光滑，边缘平滑或稍呈波状，直径4cm10cm，白色、灰色至灰褐色；菌柄偏

5、生或侧生，内实，光滑，短或无，有绒毛，后期近光滑，内部实心至松软，白色；菌褶延生，稍密，不等长，白色；菌肉靠近基部稍厚，白色；孢子印灰白色；孢子近圆柱形，光滑，（8.1 m10.7 m）（3 m5.1 m），无色透明。3.21DB50/T12452022母种经选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物，以玻璃试管为培养容器和使用单位，也称一级种、试管种。来源：NY/T528-2010，3.33.3原种由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。常以玻璃菌种瓶或塑料菌种瓶或聚丙烯塑料袋为容器。来源：NY/T528-2010，3.43.4栽培种由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。常以玻

6、璃菌种瓶或塑料袋为容器。栽培种只能用于栽培，不可再次扩大繁殖菌种。来源：NY/T528-2010，3.53.5接种菌种移植到培养基物中的操作。来源：GB/T12728-2006，2.4.413.6无菌操作在无菌条件下的操作过程。来源：GB/T12728-2006，2.5.143.7液体菌种培养基为液体状态的菌种。来源：GB/T12728-2006，2.5.303.8PDA马铃薯葡萄糖培养基。3.9培养平板2DB50/T12452022固体培养基在无菌培养皿中冷却凝固形成的平面培养基称为培养平板，简称平板。3.103.11添加剂泛指培养料中的各种化学用品，包括化肥类、无机盐类、植物生长调节剂、杀

7、虫剂、杀菌剂等。来源：GB/T12728-2006，2.6.41转潮期子实体在一定时间内大量发生的现象称为菇潮，菇潮在一个生长周期内可以发生若干次，一个菇潮至下一菇潮的间隔期,称为转潮期。4菌种场的设置与技术要求4.1选址场址应距离禽畜场、垃圾场和医院等污染源1000m以上，交通方便。4.2能源供应场内有稳定的水源、电源、供热设备。4.3设计要求各作业室干净整洁，布局利于无菌作业的流程，做到既相连又相隔。4.4菌种场作业室及主要设施设备要求菌种场作业室及主要设施设备要求见表1。表1菌种场作业室及主要设施设备序号1名称用途设施及条件主要仪器设备母种实验室母种的扩繁通自来水，220V电源，洁净等级

8、为十万级，建筑面积按实际需要确定超净工作台、培养箱、普通光学显微镜、高压灭菌器、玻璃器皿、电子天平、电炉、微波炉、摇床、小型发酵罐拌料机、装袋机234备料室灭菌室冷却室培养料配制、分装通自来水，220V及380V电源，建筑面积按实际需要确定培养料灭菌通自来水，220V及380V电源，建筑面积按实际需要确定高压灭菌器或常压灭菌器灭菌后培养料的220V及380V电源，建筑面积按空调系统、臭氧消毒机、新风系统3DB50/T12452022冷却实际需要确定，洁净等级为千级220V电源，建筑面积按实际需要确定，洁净等级为千级5678缓冲间接种室进入无菌操作室前的准备工作接种作业洗手台、空调系统、臭氧消毒

9、机、新风系统、作业服装专用柜220V及380V电源，建筑面积按实际需要确定，洁净等级为百级220V电源，建筑面积按实际需要确定，洁净等级为十万级层流罩、接种操作台面、空调系统、新风系统、臭氧消毒机菌种培养室菌种保存库培养菌种贮存菌种培养架、空调系统、臭氧消毒机、新风系统220V及380V电源，建筑面积按实际需要确定，温度要求：15制冷机组、保温库5母种制作5.1试管规格及要求宜采用18mm 180mm的玻璃试管。5.2试管培养基制作新鲜无病害马铃薯洗净去皮，切成小薄片，取200g，加自来水1000mL，置于容器内煮沸20min后过滤，取滤汁加葡萄糖20g、蛋白胨1g2g、KH2PO40.1g0

10、.2g、琼脂20g，煮溶后用水补足至1000mL。将培养基分装至试管的2/5处，擦拭干净沾在试管口上培养基，塞上试管塞，用牛皮纸或报纸包装后灭菌，不可过夜放置。也可选用商品马铃薯葡萄糖培养基（PDA培养基）。将包好的试管（试管塞朝上）垂直放入高压灭菌器，在0.105MPa压力下，121灭菌20min。灭菌后的试管后趁热倾斜摆放形成斜面，斜面顶端应距离试管塞40mm50mm，培养基未凝固前不宜再移动。5.3接种室消毒接种前1d应用臭氧消毒机对接种室消毒20min30min，接种前60min再消毒20min30min。臭氧消毒结束30min后操作人员方可进入接种室，防止臭氧中毒。5.4接种5.4.

11、1准备工作操作人员进入缓冲间，应更换已消毒的洁净衣帽，戴上口罩，用消毒液清洁手部。5.4.2操作方法4DB50/T12452022在超净工作台内，按照无菌操作要求，用灼烧冷却后的接种工具从母种管切取3mm见方菌种块，迅速转接入待转接试管的培养基上，用酒精灯火焰灼烧试管口和试管塞后塞紧管口。1支母种管的转接量宜控制在30支50支。接种后应及时贴上菌种标签，注明菌种名称（代号）、接种人、接种日期。5.5母种培养及保存转接后的试管，251恒温培养至菌丝满管。满管后应及时置于4冰箱中，存放时间不超过180d。6原种制作6.1培养料配制6.1.1配方见附录A。6.1.2配制方法将配方表中的原材料混合拌匀

12、，补足水分，使培养料含水量达到60%70%。6.2装瓶（袋）消毒液或洁净剂洗净容器后用清水冲刷干净。配制好的培养料及时装瓶（袋）至容器肩部，750mL菌种瓶培养料填充量不超过400g（湿重）；18cm直径的菌袋，装袋高度不应超过18cm，填充量不超过1200g。装瓶（袋）完成后用干净毛巾将容器璧擦拭干净，容器口盖上透气盖或用棉花塞紧。6.3灭菌宜高压蒸汽灭菌，0.105Mpa121下灭菌180min。常压灭菌1001灭菌12h。6.4接种室消毒同6.5。6.5原种接种6.5.1操作方法在超净工作台或层流罩内，按照无菌操作要求，用接种工具将母种切取成8mm10mm的菌种块后迅速转转移到原种培养料

13、表面上，或放入培养料接种孔内，盖上封口物，转接结束。1支母种管转接不超过20瓶（袋）原种。接种后应及时贴上菌种标签，注明菌种名称（代号）、接种人、接种日期。6.5.2培养及保存原种应在241，空气相对湿度55%65%，CO2浓度2000ppm50ppm下避光培养。满瓶后的原种应尽快使用，在不超过25、空气相对湿度50%70%、避光室内存放不超过14d。4下贮存不超过45d。7栽培种制作5DB50/T12452022宜在超净工作台或层流罩内，按照无菌操作要求，用接种工具将瓶（袋）口的老化菌种块去掉，取出2cm见方的菌种块迅速转转移到栽培种培养料上，盖上封口物，转接结束。依次操作剩余的菌种袋。1瓶

14、（袋）原种的转接量不应超过50瓶（袋）。接种后应及时贴上标签，注明菌种名称（代号）、接种人、接种日期。栽培种应尽快使用，在温度不超过25、相对湿度50%70%、避光的室内存放不超过15d。在16下贮存时，贮存期不超过45d。8液体菌种制作8.1菌种活化取5mm见方秀珍菇母种接种于90mmPDA培养平板中央，于25恒温培养7d。8.2一级液体菌种培养250mL三角瓶内分装100mL液体培养基，灭菌冷却。取1.5cm见方母种分割成为1mm见方菌种块，通过无菌操作接种于前述三角瓶内，于25、150r/min200r/min下振荡培养7d。培养基配方：马铃薯200g、葡萄糖20g、蛋白胨1g2g、KH

15、2PO40.1g0.2g。8.2二级液体菌种培养按10%接种量将一级液体菌种接种于发酵罐内，通气量4.0L/min，转速200r/min350r/min，25下培养7d。液体菌种宜现做现用。培养基配方同8.2。9菌种质量要求应符合GB19172-2003的规定。10抽样及菌种质量检验各级菌种的检验规程按NY/T1846-2010的规定进行。各级菌种中杂菌及害虫的检验按NY/T1846-2010的规定进行。11菌种的标签、标志、包装、运输及贮存按GB19172-2003的规定进行。12栽培技术要求12.1菌种选择宜选用种性明确，经过两个以上生产周期试验，适合于当地气候条件的秀珍菇品种。12.2产

16、地环境秀珍菇产地环境场地环境应符合NY/T391-2013的规定。生产用水应符合GB5749-2006的规定。6DB50/T1245202212.3栽培季节具有周年生产条件的，其栽培季节不限。不具备周年生产条件的，菌包制作季节宜在每年1月4月，出菇季节为5月10月。12.4栽培基质栽培基质配方参照附录C执行，基质原料要求应符合NY5099-2002和NY/T1935-2010的规定。添加剂的种类、用量和使用方法应符合NY5099-2002和NY/T1935-2010的规定。12.5制袋12.5.1拌料先将栽培基质各原料（干）混合均匀，再按料水比11.11：1.3充分拌料，使培养料的含水量为60

17、%70%，pH值调节为7.08.0。12.5.2装袋宜选用36cm18cm0.005cm聚丙烯或聚乙烯塑料袋，使用装袋机或手工填充栽培基质，高度20cm，重量1500g100g（湿重）。装袋完成后将菌袋外壁擦拭干净后，用套环、无纺布过滤片和透气盖封口。栽培基质应在4h内完成装袋，避免时间过长导致培养料酸化。12.6灭菌和接种12.6.1灭菌装袋完成后应立即灭菌。宜按以下程序进行高温蒸汽灭菌：排气2次后，10530min，11530min，121120min，焖置30min（意思不清楚？多少温度条件下）。若灭菌器满负荷时，121保压延长至180min。若采用常压灭菌，温度应在4h内达到100，并

18、100保温16h18h。12.6.2接种接种前应对接种室、接种箱采用药物、紫外线或臭氧进行消毒处理。药物选用及消毒方法见附录B。栽培料温度应降到28以下方可接种。操作按NY/T528-2010规定进行。每瓶（袋）栽培种的转接量不宜超过50袋。液体菌种接种量为10mL/袋。12.7菌丝培养12.7.1培养环境培养室应保持清洁、干燥、遮光、通风，保温性能好。12.7.2培养方法宜采用层架式发菌。培养条件同7.7。接种后每5d7d检查一次，污染的菌包应及时无害化处理。菌丝满袋后应继续在同等条件下后熟10d。12.8出菇12.8.1菇房要求菇房应清洁干净，通风良好，有散射光，可调节温度和空气湿度，1m

19、范围内不得有杂草。7DB50/T12452022菇房两侧安装出菇网格架，中间宜设置1m宽主通道；在主通道垂直方向设置菇架，每排菇架前后间距宜不少于1m。12.8.2出菇条件出菇房温度宜控制在1630，最适温度22；CO2浓度不宜超过2000ppm；空气相对湿度80%90%。宜用LED灯带（白光）每8h补光1次、每次时长30min。12.8.3催蕾与出菇管理12.8.3.1催蕾菌包后熟后，移至菇房环割开袋，采用低温和水分刺激进行催蕾。先将菇房温度调节至141处理24h后将菇房温度调节至251，用雾状水喷洒袋口，直至有水滴滴下。保持菇房湿度75%85%，CO2浓度1000ppm以下，用LED（白光

20、）每8h补光1次、每次时长30min。12.8.3.2出菇管理袋口出现牙签大小的菇蕾时，将CO2浓度调至2000ppm3000ppm。菇柄长度达到3cm后，将CO2浓度调至1000ppm50ppm。菌盖达到1.5cm时，应雾状补水至水滴滴下。菌盖达到4cm时即可采收。期间补光，方法同12.8.2。12.8.4转潮期管理待前一潮菇出菇结束后，清除菇根，雾状补水至水滴滴下。转潮期菌丝培养条件同7.7。菌包经过10d25d的菌丝再培养后方可以进行下一菇潮的催蕾出菇，催蕾条件同 12.8.3.1，出菇条件同12.8.3.2。13病虫害防治13.1主要病虫害常见病虫害主要有黄枯病、木霉、毛霉、链孢霉和菇

21、蝇、菇蚊。13.2对病虫害的防治在生产管理过程中，做好场地清洁消毒处理的同时，对木霉、毛霉和链孢霉感染菌包应及时无害化处理；加大菇房的通风量和菇房内部的空气循环，减轻黄枯病危害；悬挂黄色粘虫板或蓝色粘虫板诱杀菇蝇和菇蚊。14采收与分级当菌盖达到4cm即可采收，按表2所列标准进行分级。表2秀珍菇鲜品感官要求项目色泽指标AA级A级B级菌盖灰白色至灰褐色8DB50/T12452022气味形态具有秀珍菇特有的菇香，无异味菌盖呈匙形至扇形，菌柄菌盖近匙形或呈扇形，菌柄菌盖呈扇形至半球形，菌柄稍直，菌盖厚实，边缘稍有稍直，菌盖较厚实，边缘平直，菌盖薄，边缘稍有上翻，内卷，不开裂展，不开裂有少量开裂4.0，8.03.0菌盖直径，cm菌柄长度，cm碎菇，%4.06.07.08.04.06.03.05.0无无无无无无无5.0附着物，%虫伤菇，%杂质0