丹参对幼年大鼠癫痫持续状态学习记忆及海马ChAT、AChE活性的影响

1、丹参对幼年大鼠癫痫连续状态学习影象及海马ChAT、AChE活性的影响【摘要】目的：不雅察丹参(RS)对幼年大鼠癫痫连续状态(SE)学习影象及海马胆碱乙酰转移酶(hAT)和乙酰胆碱酯酶(AhE)活性的影响。要领：戊四氮(PTZ)诱导大鼠SE,丹参(RS)举行干预,苯巴比妥钠(PB)作为比较，接纳rris水迷宫不雅察大鼠空间影象的改变，应用匀浆比色法检测大鼠海马hAT、AhE活性。效果：rris水迷宫测试中PTZ组躲避暗藏期延伸(P0.05),有用搜刮计谋百分比低落(P0.01)，平台象限游泳时间百分比低落(P0.01)，海马hAT、AhE活性低落(P0.01)；RS组SE后落落的hAT、AhE活

2、性有所进步，均匀暗藏期较PTZ组明显收缩，目的象限停顿时间明显高于PTZ组，第13天有用搜刮计谋百分比高于PTZ组，第23天高于PB组(P0.05)；PB组仅进步AhE活性，PB组均匀暗藏期较PTZ组有收缩趋势，但仅第1天有统计学意义，PB组目的象限停顿时间明显高于PTZ组。结论：SE可使幼年大鼠学习影象受损,hAT、AhE大概到场这一变革的病理生理历程。丹参用药大概通过修复海马胆碱能体系改进幼年大鼠SE学习影象损伤。【关键词】丹参癫痫连续状态学习影象胆碱乙酰转移酶乙酰胆碱酯酶水迷宫30%50%的癫痫患儿伴有差异程度的学习影象减退、留意力疏散及社会顺应本领落落等认知成效停滞，直接影响患儿生存质

3、量。大量研究证明，癫痫爆发尤以癫痫连续状态(statusepileptius，SE)，不但可引起临时性脑成效停滞，且可致严峻的器质性脑损伤，进而引起学习影象及举动非常等严峻效果。本实行探究了丹参(radixsalviaeiltirrhizae，RS)对幼年SE大鼠学习影象损伤的改进作用。1质料与要领1.1质料及仪器1.2SE模子制备及实行分组参照文献要领2创立动物模子：戊四氮(pentylenetetrazle，PTZ)20gkg-1大鼠腹腔注射,然后每10in注射10gkg-1,直至到达充足强度和SE连续爆发。SE尺度:0级，无惊厥爆发；级，颔首，瞬间，颈动或湿狗样颤抖；级，节律性颔首；级，

4、头部抽搐加前肢颤抖；级，第级加后肢站立；级，惊厥致跌倒，满身强直性抽搐。、级爆发即为满身性惊厥大爆发，连续30in及以上者为SE。将乐成SE模子48只随机分为模子比较组(PTZ组)24只，苯巴比妥组(PB组)12只，丹参组(RS组)12只。另设生理盐水比较组(NS组)12只，NS组大鼠腹腔注射划一容量雷同次数的生理盐水。惊厥停顿爆发后12hRS组腹腔注射复方丹参注射液10gkg-1，PTZ组、NS组腹腔注射6lkg-1生理盐水，PB组赐与PB60gkg-1腹腔注射，每隔24h重复给等量药1次，连续7d。各组动物混淆豢养，逐日测体质量以调解注射剂量。1.3大鼠rris水迷宫实行于7d给药竣事后开

5、始举行rris水迷宫实行,步伐包罗：(1)定位飞行实行(plaenavigatintask)用于丈量大鼠对水迷宫学习和影象的本领。实行历时4.5d,天天禀上、下战书2个时段,共9个时段,每时段练习4次。练习时随机选择1个象限(本实行选择S)开始,按逆时针标的目的,将大鼠从各象限边沿中点位置面向池壁放入水中,不雅察并记载在120s内寻到平台的时间(躲避暗藏期,esapelateny)。假设大鼠在120s内未能寻到平台那么报酬引导至平台停顿10s后移开,暗藏期记为120s；隐匿平台躲避暗藏期反响动物空间影象的得到环境,即空间学习影象本领。(2)空间搜刮实行(spatialprbetest)用于丈量

6、大鼠学会探求平台后,对平台空间位置影象的本领。即在第5天第5次练习时撤消平台,任选一个入水点(本实行选择S)将大鼠面向池壁放入水中,记载120s内动物在目的象限(原平台地点象限,targetquadrant)活动时间。(3)征采计谋(seahstrategy)。大鼠征采站台的计谋分直线式、趋向式、随机式和边沿式。不雅察并记载9个时段的练习期间大鼠每次探求站台所需的暗藏期和接纳的计谋。直线式和趋向式游泳轨迹为有用搜刮计谋,盘算逐日有用搜刮计谋百分比3。1.4AhE、hAT活性测定大鼠rris水迷宫实行完毕后直接断头取双侧海马，匀浆比色法测定AhE、hAT活性。hAT的测定是以乙酰辅酶A为底物，在

7、hAT的作用下，反响的天生物和显色剂结合，在324n处测定吸光度，以此盘算hAT的活力。酶单元界说为：在pH7.2条件下，2530时每克构造湿质量每分钟转移1nl乙酰基给胆碱的本领界说为一个酶活力单元。详细操纵按试剂盒说明书举行。1.5统计学处置惩罚2效果2.1PTZ诱导惊厥的举动特性6只大鼠应用40gkg-1、28只50gkg-1、16只60gkg-1PTZ即开始出现惊厥,重要表示为肌阵挛,伴有前肢阵挛的后肢站立,连续13s。随着PTZ每10in注射1次,进入全面性强直紧缩阶段的大鼠表示为失去姿势操纵,前、后肢伸肌猛烈紧缩,并伴有发绀。强直阶段后出现全面性强直阵挛惊厥,大鼠SE连续时间在30

8、90in,7只大鼠应用PTZ60gkg-1、34只70gkg-1、9只80gkg-1产生SE，2只大鼠死于SE。幸存的大鼠主动规复到根本活动程度。PTZ处置惩罚大鼠殒命率为10%。2.2rris水迷宫实行PTZ组定向飞行实行均匀暗藏期延伸(P0.01),RS组均匀暗藏期较PTZ组明显收缩1、2、4、5d(P0.01)，PB组均匀暗藏期较PTZ组有收缩趋势，但仅第1天有统计学意义表1。PTZ组空间探究试验原平台地点象限停顿时间较NS组变短P0.05,别离为41.08.3、57.516.3s；RS及PB组目的象限停顿时间明显高于PTZ组P0.05，别离为59.218.9、(55.613.0)s。各

9、组第25天有用搜刮计谋百分比均高于第1天P0.01。第13天PTZ组有用搜刮计谋百分比低于NS组，RS、PB组均高于PTZ组，且第23天RS组高于PB组P0.05(表2)。表1各组定向飞行实行均匀暗藏期效果与PTZ组比力，1)P0.05；与NS组比力，2)P0.05；与PB组比力，3)P0.05表2各组有用搜刮计谋与PTZ组比力，1)P0.05；与NS组比力，2)P0.05；与PB组比力，3)P0.052.3AhE、hAT活性测定PTZ组AhE、hAT活性较NS组明显削弱P0.01，RS组AhE、hAT活性明显高于PTZ组(P0.01)，与NS组无明显差异P0.05，PB干预使SE后AhE活性

10、升高P0.01,hAT活性较SE组无显着改进P0.05。见表3。表3AhE、hAT活性测定效果3讨论Ah是中枢神经体系(NS)中紧张神经递质,对NS有快乐和按捺双重作用,以快乐为主,到场大脑皮层的叫醒、感情和活动的和谐等成效的调治,特殊是学习和认知等方面被以为是关键环节之一。神经末梢胞浆中的胆碱和乙酰辅酶A在AhT的作用下天生Ah，并进入囊泡贮存。AhT是Ah合成的限速酶。在钙离子的到场下，囊泡与突触前膜相交融，开释Ah至突触间隙。然后Ah作用于突出后膜的Ah受体，介导信息的通报，并到场多种生理成效的完成。Ah一旦和受体分开，就敏捷被突触间隙内的AhE落解为胆碱和乙酸。大量的研究证明中枢胆碱能

11、递质在学习和影象举动中有紧张的调治作用,保持其成效正常是维持哺乳动物学习影象的需要条件。以往的研究多侧重于药物对老年痴呆中枢胆碱能体系的影响,对付药物治疗癫痫大爆发伴智力低下后中枢胆碱能体系变革的报道较少。徐格林等证着实大鼠发育期诱导癫痫爆发可损害大鼠的空间认知本领,而出生前后胆碱增补可以减轻这种损害8。Serra等报道PTZ点燃使自由活动的大鼠海马中乙酰胆碱含量落落至比较组的52，并维持这一程度达4周，至制止PTZ注射后30d规复至比较组程度9。经当代工艺提取的丹参化学身分包罗丹参酮、丹参酮a、丹参酮b,隐丹参酮及原儿茶醛、丹参素、丹参酸乙等。当代药理研究证明，丹参具有改进缺血再灌注损伤，调治免疫，低落血液黏稠度，改进微循环的作用，改进脑损伤造成的认知成效停滞。本研究效果表现，丹参可显着收缩模子大鼠rris水迷宫定向飞行实行