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文档简介
1、Department of Microbiology, Harbin Medical UniversityMedical Microbiology医 学 微 生 物 学Department of Microbiology, GMC第9章 呼吸道传播的病原微生物Department of Microbiology, Ha第8节呼吸道途径传播的其他细菌第9章 呼吸道传播的病原微生物第8节呼吸道途径传播的其他细菌第9章 呼吸道传播的病原微1、棒状杆菌属Corynebacterium白喉棒状杆菌(Cdephtheriae)类白喉杆菌(diphtheroid bacilli) 1、棒状杆菌属Coryne
2、bacterium白喉棒状杆菌(白喉棒状杆菌Corynebacterium. dephtheriae白喉棒状杆菌Corynebacterium. dephthe形态与染色革兰阳性,细长弯曲,一端或两端膨大呈棒状美蓝或奈瑟染色,菌体两端或一端可见着色较深的异染颗粒形态与染色革兰阳性,细长弯曲,一端或两端膨大呈棒状培养特性需氧或兼性厌氧吕氏培养基亚碲酸钾(K2TeO23H2O)血琼脂平板培养特性需氧或兼性厌氧变异、抵抗力变异形态、菌落和毒力S型变为R型抵抗力较其他无芽孢细菌强对青霉素及广谱抗生素敏感,对磺胺不敏感变异、抵抗力变异致病物质白喉毒素(diphtheria toxin)索状因子(cord
3、 factor)K抗原致病物质白喉毒素(diphtheria toxin)呼吸道传播的病原微生物其他细菌课件白喉棒状杆菌(鼻咽腔)飞沫、污染物品鼻 咽喉气管局部细菌和毒素的作用灰白色假膜粘膜水肿及假膜脱落,引起呼吸道阻塞,甚至窒息死亡。外毒素入血毒血症心肌肝肾上腺外周神经内脏出血心肌炎软腭麻痹 声嘶 肾上腺功能障碍2-7天潜伏期所致疾病:白喉白喉棒状杆菌(鼻咽腔)飞沫、污染物品鼻 咽喉气管局部细菌和呼吸道传播的病原微生物其他细菌课件免疫性抗毒素免疫锡克试验(Schick test) 原理:毒素和抗毒素的中和试验 免疫性抗毒素免疫微生物学检查法标本直接涂片镜检分离培养毒力试验微生物学检查法标本防
4、治原则人工自动免疫 人工被动免疫抗菌治疗防治原则人工自动免疫 2、鲍特菌属(Bordelella)革兰阴性小球杆菌常寄居于人和动物的上呼吸道引起人类百日咳和急性呼吸道感染百日咳鲍特菌(B. pertussis)人类百日咳的病原体2、鲍特菌属(Bordelella)革兰阴性小球杆菌分类百日咳鲍特菌(B.pertussis)副百日咳鲍特菌(B.parapertussis)支气管鲍特菌(B.branchiseptica)鸟鲍特菌(B.avium)欣氏鲍特菌(B.hinzii)霍氏鲍特菌(B.holmesii)分类临床意义是百日咳的致病菌一年四季均可发病,冬春季多发,小儿多于成人传播途径:飞沫传染源:
5、病人潜伏期:12周致病因素:百日咳毒素(PT)、丝状血细胞凝集素 (FHA)腺嘌呤环酶毒素(ACT)、气管细胞毒素、 皮肤坏死毒素临床意义是百日咳的致病菌临床表现:1.卡他期:12周,明显卡他症状,传染性强,感染标本培养阳性率高2.痉挛期:14周,阵发性剧烈咳嗽,直至咳出粘稠的痰液或呕吐为止3.恢复期:12周,阵咳减轻,渐趋停止临床表现:生物学特性革兰阴性短小杆菌无芽孢,有荚膜支气管鲍特菌、鸟鲍特菌有鞭毛专性需氧,最适温度35 , 最适pH6.87.0百日咳鲍特菌革兰染色 生物学特性革兰阴性短小杆菌百日咳鲍特菌革兰染色 O抗原为共同抗原,K抗原的因子7为百日咳、副百日咳和支气管炎鲍特菌所共有。
6、经多次传代后,菌落变为粗糙而呈多形性;失去荚膜变为无毒株。变异:相位变异等抵抗力弱,但在低温能生存,对紫外线敏感,日光照射60分钟可死亡。 O抗原为共同抗原,K抗原的因子7为百日咳、副百日咳和支气管 培养:B-G培养基,菌落特点有珠光色泽的菌落。引起百日咳检查:鼻咽拭子或咳碟法防治:DPT三联疫苗我国目前采用百日咳杆菌死菌苗与白喉、破伤风类毒素进行人工主动免疫,取得良好预防效果 培养:B-G培养基,菌落特点有珠光色泽的菌落。3、军团菌属(Legionella)3、军团菌属(Legionella)呼吸道传播的病原微生物其他细菌课件军团菌是引起军团菌病的病原体首发于1976年的美国一次军人聚会,故
7、称作军团病 1982年,在我国南京首次证实了军团菌病。 军团菌是引起军团菌病的病原体分类军团菌属(Legionella) 属于军团菌科(Legionellaceae)常见的与人类疾病有关的军团菌:嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)米克戴德军团菌(L. micdadei)长滩军团菌(L. longbeachae)杜莫夫军团菌(L. dumoffii)波兹曼军团菌(L. bozemanii) 分类军团菌属(Legionella) 属于军团菌科(Leg形态染色革兰阴性,但不易被着色球杆菌,形态有多形性Gimenen染色,菌体呈红色,背景为绿色用Dieterle镀银法染成黑褐色
8、不形成芽孢,无荚膜 ,有端生或侧生鞭毛形态染色革兰阴性,但不易被着色呼吸道传播的病原微生物其他细菌课件培养特性营养要求高专性需氧需2.55CO2生长缓慢常用培养基及菌落特征 BCYE培养基:灰白色、圆形光滑湿润菌落 F-G培养基:针尖大小、黄色荧光培养特性营养要求高军团菌菌落形态(CYE琼脂培养基)军团菌菌落形态(CYE琼脂培养基)抗原结构抗原:具有型特异性 军团菌病约90%的是由嗜肺军团菌所致,已发现15个血清型 ,其中以Lp1血清型最常见, Lp6次之。抗原结构抗原:具有型特异性 抵抗力分布广泛、抵抗力强水中存活时间长军团菌病的主要污染源是供水系统及冷却塔和空调系统 抵抗力分布广泛、抵抗力
9、强临床意义致病物质:内毒素、外毒素、侵袭性酶传染途径:呼吸道(吸入含有军团菌的气溶胶)所致疾病:军团菌病引起肺炎型和非肺炎型(庞蒂亚克热Pontiac fever)感染 肺炎型:多器官损害,肺部、消化道及神经系统症状及体征,致死率高。医院感染可高达23% 。 非肺炎型(类似感冒)慢性心、肺、肾病变、艾滋病或接受免疫抑制剂者 易发本病,且死亡率高达45%免疫性:感染者血清中出现特异性IgG、 IgM抗体临床意义致病物质:内毒素、外毒素、侵袭性酶临床意义引起肺炎型和非肺炎型(庞蒂亚克热Pontiac fever)感染肺炎型:多器官损害,肺部、消化道及神经系统症 状及体征,致死率高医院感染可高达23
10、% 慢性心、肺、肾病变、艾滋病或接受免疫抑制剂者 易发本病,且死亡率高达45%临床意义引起肺炎型和非肺炎型(庞蒂亚克热Pontiac fe临床意义 空气乳胶微粒传播 发病机制:内毒素和细胞产生的多种酶 裂解红细胞 消化卵黄囊临床意义 空气乳胶微粒传播定期清洗空调 预防军团菌病定期清洗空调 预防军团菌病标本采集:临床标本:痰、气管分泌物、胸水和血液为主。病理组织标本:必须制成悬液,再进行涂片和分离培养。环境污染标本:应先浓缩再接种。微生物学检验标本采集:临床标本:痰、气管分泌物、胸水和血液为主。微生物学检验程序 标本(痰、支气管分泌物、血液、) 涂片染色镜检 (Giemsa染色) 分离培养(BE
11、YE琼脂)鉴定试验结果报告形态染色菌落特征氧化酶、触酶荧光抗体染色等检验程序 标本 分离培养:营养要求苛刻,生长缓慢生长温度为35最适pH6.77.0初次分离必须采用(BCYE)35天可形成12mm直径的光泽菌落微生物检验 分离培养:微生物检验核酸检测:是快速特异的方法,采用DNA探针及PCR扩增rRNA的方法均可用于军团菌的快速诊断抗体检测:是检测军团菌感染临床常用手段,常采用方法:IFA、MAA、TAT、ELISA法等核酸检测:是快速特异的方法,采用DNA探针及PCR扩增rRN血清学试验检测指标:检测患者血清中特异性抗体方法:ELISA意义: 检测特异性IgM:诊断军团菌病 检测特异性Ig
12、G:军团菌病流行病学调查血清学试验检测指标:检测患者血清中特异性抗体军 团 菌 感 染 诊 断 试 验试验敏感性(%)特异性(%)评注培养70100参考方法直接免疫荧光257095不推荐常规应用间接免疫荧光709099只用于嗜肺军团菌血清群1酶标记免疫709099乳胶凝集55908599血清学(间接免疫荧光)708095辅助培养 军 团 菌 感 染 诊 断 试 验敏感性(%)特异性(%)评适 应 症:军团菌病、肺炎支原体肺炎、肺炎衣原体肺炎、沙眼衣原体结膜炎、厌氧菌所致口腔感染、空肠弯曲菌肠炎、百日咳等。军团菌病、肺炎支原体肺炎、肺炎衣原体肺炎、沙眼衣原体结膜炎、4、嗜血杆菌属(Haemoph
13、ilus)嗜血杆菌属是一类革兰阴性短小杆菌、常呈多形态性、无鞭毛、无芽胞,可形成荚膜,营养要求高,需要特殊物质才能生长的一类细菌。4、嗜血杆菌属(Haemophilus)嗜血杆菌属是一类分类嗜血杆菌属(Haemophilus)隶属于巴斯德菌科,嗜血杆菌属流感嗜血杆菌(H.influenzae)副流感嗜血杆菌(H.parainfluenzae)溶血嗜血杆菌(H.haemolyticus)副溶血嗜血杆菌(H.parahaemolyticus)克雷嗜血杆菌(H.ducreyi)埃及嗜血杆菌(H.aegyptius)嗜沫嗜血杆菌(H.aphrophilus)副嗜沫嗜血杆菌(H.paraphrophil
14、us)迟缓嗜血杆菌(H.segnis)分类嗜血杆菌属(Haemophilus)隶属于巴斯德菌科,临床意义菌种常栖部位及所致疾病流感嗜血杆菌 原发化脓性感染及继发性感染,包括脑膜炎、鼻咽炎、关节炎、心包炎、鼻窦炎及中耳炎等。副流感嗜血杆菌口腔及阴道正常菌群,偶尔可引起心内膜炎、尿道炎。溶血嗜血杆菌鼻咽部正常菌群,常引起儿童上呼吸道感染。副溶血嗜血杆菌口腔、咽部正常菌群,偶可引起咽炎、化脓性口腔炎和心内膜炎杜克雷嗜血杆菌软下疳,为性传播病菌。常引起外阴脓疱、溃疡、淋巴结肿大。埃及嗜血杆菌急性亚急性结膜炎、儿童巴西紫癜热嗜沫嗜血杆菌咽部正常菌群、牙菌斑中常见菌、偶致心内膜炎和脑脓肿副嗜沫嗜血杆菌咽部
15、及阴道正常菌群,偶可引起亚急性细菌性心内膜炎、败血症、甲沟炎、脑脓肿、脑膜炎。 几种主要嗜血杆菌常栖部位及所致疾病临床意义常栖部位及所致疾病流感嗜血杆菌 原发化脓性感染及继发生物学特性 G-短小球杆菌呈双球形或短丝状或多形性无芽孢、无鞭毛有毒菌株形成荚膜以流感嗜血杆菌(H.influenzae)为例1.形态与染色 生物学特性 以流感嗜血杆菌(H.influenzae)为例流感嗜血杆菌培养基中需加入血液,以提供X因子和V因子(巧克力色培养基) X因子血红素 V因子辅酶或辅酶菌落光滑、无色透明、露滴状初次培养需要CO2培养“卫星现象”流感嗜血杆菌培养基中需加入血液,以提供X因子和V因子(巧克力卫星
16、现象流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同孵育时,由于后者能合成较多的V因子,在金黄色葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌的菌落较大,离金黄色葡萄球菌菌落越远的越小。卫星现象流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同孵育时,由致病性呼吸道常见菌对人有致病作用的代表菌种是流感嗜血杆菌杜克嗜血杆菌、埃及嗜血杆菌也是致病其余菌种多为条件致病菌致病性呼吸道常见菌根据荚膜抗原分ABCDEF六型,B型毒力最强可产生自溶酶致病物质:荚膜、菌毛、内毒素、 IgA蛋白酶所致疾病 原发感染:脑膜炎、鼻咽炎等,多见于儿童 继发感染:鼻窦炎等,多见于成人根据荚膜抗原分ABCDEF六型,B型毒力最强微生物学检查标本采
17、集检验程序抗原检测及核酸检测分离培养与鉴定药物敏感试验微生物学检查标本采集标本采集原则在疾病早期采取标本,立即送检。在取标本时以肉汤湿润,防止干燥。对心内膜炎、患者取血液标本。痰液标本,应洗涤、消化,再接种。标本采集原则在疾病早期采取标本,立即送检。DNA探针杂交(快速检测)血液脑脊液脓汁痰 分离培养(巧克力琼脂) 涂片、镜检荚膜肿胀试验(初步报告)标记抗体检测抗原涂片、荚膜肿胀试验(初步报告)菌落形态、卫星现象、血清学现象报告结果 嗜血杆菌的检验程序增菌培养35 5-10%CO2X、V因子需求试验吲哚、尿素酶、鸟氨酸脱羧酶(生物分型)DNA探针杂交血液脑脊液脓汁痰 分离培养 涂片、镜检荚膜肿
18、胀分离培养培养条件:需要X、V因子营养要求高生长温度为35血琼脂平板培养基巧克力琼脂培养基分离培养培养条件:菌落特征:巧克力琼脂培养基小、无色透明菌落 流感嗜血杆菌巧克力琼脂养基菌落 菌落特征:巧克力琼脂培养基小、无色透明菌落 流感嗜血杆菌巧克鉴定 培养需要X、V因子菌落形态卫星现象卫星现象(satellite phenomenon) 鉴定 卫星现象(satellite phenomenon)卫星现象流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同孵育时,由于后者能合成较多的V因子,在金黄色葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌的菌落较大,离金黄色葡萄球菌菌落越远的越小。卫星现象流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同孵育时,由嗜血杆菌因子溶血发酵XV葡萄糖蔗糖乳糖甘露醇木糖触酶CO2生长ONPG流感嗜血杆菌+-+-D+-副
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