超高压水射流对葛根中葛根素含量的影响

1、超高压水射流对葛根中葛根素含量的影响【摘要】目的研究超高压水射流对葛根有效成分葛根素的影响。方法通过150350Pa不同压力的水射流处理葛根醇提液，采用薄层色谱法和高效液相色谱法定性鉴别和测定葛根的化学成分种类及含量变化。结果不同压力水射流处理葛根提取液后，葛根的薄层图谱中斑点个数、大小及Rf值无明显差异；葛根的液相图谱中峰个数及形状亦无明显差异，但经150350Pa压力的水射流处理后，葛根素的含量依次增加，尤其在350Pa时葛根素的含量增加率到达5.68%。结论该研究可为超高压水射流对中药有效成分的影响提供根底实验数据，对科学加工处理和合理利用葛根药材有着重要的意义。【关键词】超高压水射流；

2、高效液相色谱法；薄层色谱法；葛根；葛根素Abstrat:bjetiveTinvestigatetheeffetfultrahighpressureaterjetntheeffetivepnentspuerarinfRadixpuerariae.ethdsTheextratinfRadixpuerariaeastreatedbyvariuspressurefr150Pat350Pa,pnentsandntentsasidentifiedanddeterinedbyTLandHPL.ResultsThereerenbviusdifferenesinthenuber,sizeandRfvaluefs

3、ptsnTLhratgraphy,andbasiallythesaenthenuberandshapefpeaksnHPLhratgrasbeteentheslutintreatedundervariuspressure,butthententfpuerarinintheslutinstreatedby150Pat300Paasinreased,partiularlyinthe350Pa,theinreasingratefpuerarinntentreahed5.68perent.nlusinThisinvestigatinayprvideseusefulexperientalinfratin

4、frtheultrahighpressureaterjetntheipatftheativeingredientsfthehineseediine.ItisveryiprtantfrpressingtreatentandutilizatinfRadixpuerariae.Keyrds:Ultrahighpressureaterjet；HPL；TL；RadixPuerariae；Puerarin超高压水射流技术是近几十年开展起来的一项新技术，它是指普通水经过超高压加压器，将水加压至100400Pa，根据加工需要，可参加金刚砂磨料，然后通过一个直径约为0.2的细小宝石喷嘴，产生一道6001000/

5、s的水箭，可用来切割各种材料，也可对各种物体外表进展清洗，甚至用来食品灭菌，以到达食品保鲜的目的1。葛根具有解肌退热、生津、透疹、升阳止泻成效，用于治疗外感发热头痛、项背强痛、口渴、消渴、麻疹不透、热立泄泻、高血压颈项强痛等2，素有“亚洲人参的美誉，是我国卫生部认定的药食同源植物3。现代研究证实，葛根中的主要有效成分为葛根素等异黄酮类化合物，具有抗炎解热、扩张冠状动脉血管、增加冠状动脉血流量的作用，同时也有降低血压的作用4。葛根素含量的上下，成为评价葛根药材及其制剂质量的重要指标。本文利用超高压水射流技术的瞬时卸压、高速撞击和高剪切等综合作用产生膨化的原理，研究该技术对葛根药材主要化学成分的影

6、响，并讨论其主要有效成分发生变化的可能机理，为超高压水射流对中药有效成分的影响提供根底实验数据，为探究新的中药加工处理方法提供参考。1仪器与材料L-20AT高效液相色谱仪，包括L-20AT泵、SPD-20A紫外检测器、AT-330柱温箱、lass-VP数据处理系统、7725i进样阀日本岛津公司；DPSB-3040型超高压水射流系统南京大地水刀股份。葛根为市售，经本院王盛民教授鉴定为豆科植物野葛Puerarialbatahi的枯燥根；葛根素对照品购自中国药品生物制品检定所，批号：110752-202211；甲醇为HPL级美国Fisher公司；所用水为超纯水；其余试剂均为分析纯。2方法与结果2.1

7、供试品溶液的制备称取葛根药材粗粉约500g，精细称定，10倍量80%的乙醇回流提取3次，2h/次，合并提取液，过滤，减压浓缩，回收乙醇至无醇味，溶液定容至2000l。量取葛根提取液200l，用超纯水稀释至20L，分别在150，200，250，300和350Pa压力条件下，经超高压水射流处理，将各溶液摇匀、静置，分别取未经处理和各处理液的上清液过0.45微孔滤膜，标号为0，1，2，3，4，5号，作为供试品溶液。2.2对照品溶液的制备精细称取葛根素对照品12.0g，置25l容量瓶中，加甲醇溶解，稀释至刻度，摇匀；精细量取2l，置10l量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得每毫升含葛根素96g。2.3葛根

8、的薄层色谱鉴别照薄层色谱法实验2，吸劝2.1和“2.2项制备的供试品溶液和对照品溶液各10l，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，使成条状，以三氯甲烷-甲醇-水72.50.25为展开剂，展开，取出晾干，置日光灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显一样颜色斑点。斑点较为圆整，别离效果好，各供试品斑点大小及Rf值无显著差异。2.5线性关系考察分别精细吸劝2.2项下制备的葛根素对照品溶液2，4，6，8，10l进样测定，记录各峰面积。以葛根素进样量g为横坐标X，峰面积为纵坐标Y，得回归方程Y=704877.60X-653.88，r=0.9999。结果说明葛根素在0.1

9、920.960g浓度范围内与峰面积有良好的线性关系。转贴于论文联盟.ll.2.6精细度实验精细汲取葛根素对照品溶液10l，重复进样5次，测定峰面积，得RSD为1.65%。结果见表1。表1精细度实验结果次序峰面积略2.7稳定性实验劝2.1项未经超高压水射流处理的供试品溶液，同法分别于2，4，6，8，24h测定，进样10l/次，结果RSD为1.37%，说明样品在24h内稳定。结果见表2。表2稳定性实验结果略2.8重复性实验取同一批样品粉末，按样品含量测定法同法测定5次，RSD为2.38%，说明该测定方法重复性比拟好。结果见表3。表3重复性实验结果略2.9加样回收实验采用加样回收法，称取含量的葛根药

10、材5份，精细称定，再分别精细参加葛根素对照品溶液0.20gl-120l，按“2.1项下方法制备供试品溶液，在上述色谱条件下进样10l，记录色谱图，结果葛根素平均回收率为96.1%，RSD为1.14%n=5。结果见表4。表4葛根素回收率实验结果略2.10样品的测定精细吸劝2.1项和“2.2项下制备的供试品溶液和对照品溶液各10l分别进样5次，按上述色谱条件测定葛根素含量。结果见表5。表5样品测定结果样品号葛根素含量略3讨论本文研究结果说明，不同压力的水射流处理葛根醇提液后，处理液的温度由进样温度19.8随压力的升高上升至51.8；葛根的薄层图谱中斑点的个数、大小及Rf值无明显差异；葛根的液相图谱中峰的个数及形状亦无明显差异，作为葛根药材的指标性成分葛根素，其含量均符合药典规定。经过150，200，250，300和350Pa不同压力水射流处理液中葛根素的含量都较原液升高，尤其以经350Pa压力水射流处理液中葛根素含量最高，其原因可能是，由于葛根素本来就存在于葛根最外部的木栓层下的外部薄壁组织中，经过超高压水射流技术的瞬时卸压、高速撞击、高剪切和热协同作用产生膨化效应，破坏了药材中微生物的细胞壁及细胞膜，同时引发对压力敏感的非共价键氢键、离子键、疏水键等的破坏5，使得葛根素更容易浸出。另外250Pa以上的压力处理葛