类风湿关节炎患者外周血CD4+CD25+CD127调节T细胞的检测及临床意

1、类风湿关节炎患者外周血CD4+CD25+CD127-调节T细胞的检测及临床意【摘要】目的讨论d4+d25+d127-调节t细胞treg在类风湿关节炎中的诊断价值及临床意义。方法选取42例类风湿关节炎ra患者和20正常安康者分为两组，采用流式细胞仪检测两组调节t细胞的表达频率，检测两组实验室指标，观察两组实验室指标与调节t细胞的关系。结果与正常对照组相比，ra组白细胞b、免疫球蛋白aiga、抗链球菌溶血素as、类风湿因子rf、糖酸蛋白1-agp、反响蛋白rp、血沉esr显著升高；血红蛋白hb、d25+t细胞、d4+d25+t细胞、d4+d25+d127-t细胞的表达频率降低p0.05。spear

2、an相关分析显示，d25+t细胞与hb、ig、esr呈正相关，d4+d25+d127-t细胞与ig呈正相关p0.01或p0.05；d25+t细胞与rb、iga呈负相关，d4+d25+t细胞与补体4呈负相关，d4+d25+d127-t细胞与as呈负相关p0.05。结论d4+d25+d127-treg在ra患者的外周血中显著降低，并且与疾病的活动性高度相关，说明调节t细胞可能参与了ra的发病，早期检测可能为ra的诊断及治疗提供根据。【关键词】类风湿关节炎d4+d25+d127-调节t细胞流式细胞术免疫学机制detetinfregulatryd4+d25+d127-tellsinasthapatie

3、ntsanditslinialsignifianeangqinba，liujian,anleiliniallabratryenterthefirstaffliatedhspitalfanhuillegeft,hefei230031，hinap0.05inragrup.spearanrrelatinanalysisshedthatd25+tellshadsignifiantlypsitiverelatinshipithhb,igandesr.d4+d25+d127-tellshadsignifiantlypsitiverelatinithig；d4+tellshadsignifiantlyneg

4、ativerelatinshipithrb,plt,iga,ig,rf,1-agpandesr.d25+tellshadsignifiantlynegativerelatinithrbandiga.d4+d25+tellshadsignifiantlynegativerelatinithpleent4.d4+d25+d127-tellshadsignifiantlynegativerelatinithas.nlusind4+d25+d127-tregassignifiantlylerintheperipheralbldfrapatients,andaslselyrelatedtthedisea

5、seativity.tellsaybeinvlvedinthepathgenesisfra,andearlydetetinfraayprvideabasisfrthediagnsisandtreatent.keyrdsrheuatidarthritis；d4+d25+d127-regulatingt-ell；flytetry；iunlgialehaniss类风湿关节炎(ra)是以慢性多发性关节炎为主要临床表现的自身免疫性疾病，其疾病的发生、开展与细胞免疫功能紊乱,细胞异常活化和细胞亚群的平衡失控亲密相关。ra源于免疫平衡失调,机体通过多种机制调控自身免疫应答,其机制非常复杂。调节性t细胞在免疫

6、平衡机制方面起着重要作用,但其在ra发病机制中的作用尚不清楚。本文研究了d4+d25+d127-调节t细胞在ra患者体内表达数量与疾病活动性、实验室指标关系，进而讨论ra在免疫学的发病机制。1对象与方法1.1研究对象42例ra患者来自我院风湿免疫等科室2021年7月至2021年8月住院和门诊患者，其中男性10例，女性32例，男女=13.2，年龄1968岁，平均47.211.6岁，病程0.527年，平均8.96.2年。所选病例在近2年内均未应用过免疫抑制剂或激素，排除合并其他疾玻根据ra疾病活动指数分为复发活动组30例和稳定期组12例。20例正常人对照为来我院体检者,体检结果无明显异常且年龄相匹

7、配，男性8例，女性12例，男女=23，年龄2264岁，平均40.214.7岁。两组年龄、性别的差异均无统计学意义p0.05。1.2诊断标准参照1987年美国风湿病学会(ara)修订的诊断标准1。所有纳入的患者均需符合以下全部条件：符合上述西医疾病诊断标准。年龄1770岁。1.3方法fit标记的鼠抗人d4单抗抗d4-fit单抗、藻红蛋白(pe)标记的鼠抗人d25单抗(抗d25-pe单抗)、藻红蛋白-青色素染料5(pe-y5)标记的鼠抗人d127单抗(抗d127-pe单抗)试剂盒，相应同型对照抗体为ap标记的小鼠igg1,fit标记的小鼠igg1、pe标记的小鼠igg1、pe-y5标记的小鼠igg

8、1，溶血素均购自美国bekanulter公司；rf、igg、iga、ig、3、4试剂盒及其配套试剂购自英国伯明翰公司；rp、p试剂盒均购自欧蒙医学实验诊断。美国bekanulter公司episxl流式细胞仪；全自动酶标仪680美国birad公司；全自动血细胞分析仪美国bekanulterlh-750；血沉仪上海迅达医疗仪器公司；微量加样器德国eppendrff公司。参加10ld4-fit、20ld25-pe、10ld127-pe-y5,抗体,平行设3管同型对照。室温下避光孵育1530in，参加红细胞裂解液1l，室温避光放置1520in，振荡混匀，1400r/in离心5in，弃上清，用2lpbs

9、洗涤1次，参加400lpbs重新浮悬细胞，上流式细胞仪检测。1.4统计学方法采用spss11.5软件，计量资料用s表示，成组资料比较采用t检验，配对资料比较采用配对t检验，相关分析采用spearan相关分析法,检验水准为0.05。2结果2.1ra患者与正常安康者实验室指标的比较在42例ra患者中p抗体阳性者30例,阳性率71.2%；rf阳性者34例，阳性率80.4%。与正常对照组相比，ra组白细胞b、免疫球蛋白aiga、抗链球菌溶血素as、类风湿因子rf、糖酸蛋白1-agp、反响蛋白rp、血沉esr显著升高，差异有统计学意义；血红蛋白hb降低，差异有统计学意义p0.05；ra组血小板计数plt

10、升高，但两者差异无统计学意义p0.05。见表1。表1ra患者与正常安康者的实验室指标的比较略2.2ra患者与正常安康者treg表达频率的比较图1，2与正常对照组比较，ra组的d25+treg、d4+d25+treg、d4+d+d127-treg的百分率明显降低，差异有统计学意义p0.01。见表2。表2ra组和正常组treg表达频率的比较略2.3不同性别、临床分期ra患者treg表达频率的比较d4+d25+d127-treg在性别之间无明显差异，随着病程的延长treg频率呈降低趋势，患者处于急性活动期其treg表达频率明显低于缓解期，两者之间差异有统计学意义p0.01。见表3。表3ra患者tre

11、g在性别、临床分期的比较略2.4ra患者treg表达频率与b等实验室指标的相关分析ra患者treg与实验室指标的spearan相关分析显示，d25+t细胞与hb、ig、esr呈正相关，d4+d25+d127-t细胞与ig呈正相关，相关结果有统计学意义p0.01或p0.05；d25+t细胞与rb、iga呈负相关，d4+d25+t细胞与补体4呈负相关，d4+d25+d127-t细胞与as呈负相关，相关结果有统计学意义p0.05。见表4。表4ra患者treg与实验室指标等的相关分析略3讨论ra是一种累及周围关节为主的多系统性自身免疫疾病,其特征为对称性、周围性多关节慢性炎性病变,病程常呈持续反复发作

12、,其病因和发病机制尚未清楚。血沉(esr)、反响蛋白(rp)、类风湿因子(rf)均已被认为与本病活动性有一定关系。近年来研究发现血小板不仅具有凝血和止血功能,而且参与了ra的炎症和免疫反响2。同时一群具有抑制免疫反响作用的调节性t细胞参与了ra的发生3。本组研究显示，与正常安康者相比，ra患者iga、as、rf、1-agp、rp、esr显著升高；ra患者的d25+t细胞、d4+d25+t细胞、d4+d25+d127-t细胞的百分率明显低于安康者，并且随着病程的延长treg表达频率有降低趋势，在急性活动期，treg表达频率明显低于缓解期。相关分析可知，d25+t细胞与hb、ig、esr，d4+d

13、25+d127-t细胞与ig均呈正相关p0.01或p0.05；d25+t细胞与rb、iga，d4+d25+t细胞与补体4，d4+d25+d127-t细胞与as均呈负相关p0.05。提示调节说明在ra的发生、开展中细胞因子和免疫复合物发挥着重要作用，疾病的进一步加重可能跟免疫耐受的降低有关。d4+d25+调节性t细胞不但参与对自身抗原外周耐受的主要t细胞群,而且还作为对外来抗原应答的调节性t细胞，对于维持外周免疫耐受有重要意义4。最近研究发现,在新颖别离的正常人外周血t细胞中d127和fxp3表达呈负相关，87%的d25+d127-treg高表达fxp3,自身活化的效应t细胞高表达d127，因此

14、可用d127区分这两种细胞，现今认为d4+d25+d127-t是天然产生treg细胞最好的细胞膜标志5，6。已有研究说明，自身免疫病的易感性与d4+d25+调节性t细胞的数量或功能有关7，同时发现，d4+d25+d127-t细胞在ra患者中数量和功能都发生了很大改变8。我们研究发现，d4+d25+d127-t在ra患者的血液中减少，减少原因可能与外周血d4+d25+d127-t细胞转移至受累关节中有关。详细的减少机制还将进一步研究，从而为临床诊断提供重要的根据。【参考文献】1arnettf,edrthys,blhda,etal.the1987revisedarariteriafrrheuati

15、darthritis(ra).arthritisrheu,1987,30(12):17.2021，24(7):593-596.3主鸿鹄,陈复兴,徐开林,等.d4+d25+调节性t细胞:一类新被认识的免疫调节细胞.国外医学免疫学分册,2022,27(2):87-90.4rizzellv,liuzzg,brugalettas,etal.dulatinfd4+d28nulltlyphytesbyturnersisfatr-alphablkadeinpatientsithunstableangina.irulatin,2022,113(19):22-27.5liu,putnaal,xu-yuz,etal.d127expressininverselyr-relatesithfxp3andsuppressivefuntinfhuand4+tregells.jexped,2022,203