无菌操作原则注意事项

1、无菌操作原则及注意事项无菌操作原则：1、环境要洁净，进行无菌操作前半小时，须停止打扫地面等工作。防止不用要的人群流动，防备灰尘飞扬。治疗室应每日用紫外线消毒一次。2、在履行无菌操作时，一定明确物件的无菌区和非无菌区。3、履行无菌操作前，先戴帽子、口罩、洗手，并将手擦干，注意空气和环境洁净。4、夹取无菌物件，一定使用无菌持物钳。?无菌操作间四、进行无菌操作时，凡未经消毒的手、臂、均不行直接接触无菌物件或超过无菌区取物。5、无菌物件一定保留在无菌包或灭菌容器内，不行裸露在空气中过久。无菌物与非无菌物应分别搁置。无菌包一经翻开即不可以视为绝对无菌，应尽早使用。凡已拿出的无菌物件虽未使用也不行再放回无

2、菌容器内。6、无菌包应按消毒日期次序搁置在固定的柜橱内，并保持洁净干燥，与非灭菌包分开搁置，并常常检查无菌包或容器能否过期，此顶用物能否适当。7、无菌盐水及酒精、新洁尔灭棉球罐每周消毒一次，容器内敷料如干棉球、纱布块等，不行装得过满，免得取用时碰在容器外面被污染。无菌操作技术及注意事项1、玻璃器皿的消毒和洁净新购玻璃器皿的办理新购玻璃器皿应用热肥皂水洗漱，流水冲刷，再用1%2%盐酸溶液浸泡，以除掉游离碱，再用水冲刷。对容量较大的器皿如试剂瓶、烧瓶或量具等，经清水洗净后应注入浓盐酸少量，慢慢转动，使盐酸充满容器内壁数分钟后倾出盐酸，再用水冲刷。污染玻璃器皿的办理一般试管或容器可用3%煤酚皂溶液或

3、5%石炭酸浸泡，再煮沸30分钟，或在3%5%漂白粉澄清液内4小时，有的亦可用肥皂或合成清洗剂洗漱使尽量产生泡沫，而后用清水冲刷至无肥皂为止。最后用少量蒸馏水冲刷。细菌培育用的试管和培育皿可先行集中，用1kg/cm2高压灭菌1530分钟，再用热水清洗后，用肥皂洗漱，流水冲刷。吸管使用后应集中于3%煤酚皂溶液中浸泡24小时，逐支用流水频频冲刷，再用蒸馏水冲刷。油蜡沾污的器皿，应独自灭菌清洗，先将沾有油污的物质弃去，倒置于吸水纸上，100烘干半小时，再用碱水煮沸，肥皂清洗，流水冲刷。必需时可用二甲苯或汽油去油污。染料沾污的器皿，可先用水冲刷，后用洁净或稀盐酸洗脱染料，再用清水冲刷。一般染色剂呈碱性，

4、所以不宜用肥皂的碱水清洗。玻片可置于3%煤酚皂溶液中浸泡，拿出后流水冲刷，再用肥皂或弱碱性煮沸，自然冷却后，流水冲刷。被结核杆菌污染或不易洗净的玻片，可置于洁净液内浸泡后再冲刷。2、无菌器材和液体的准备将玻璃用具中的培育皿、培育瓶、试管、吸管等按上述方法洗净烘干后，用一干净纸包好瓶口并把吸管尾端塞上棉花，装入干净的铝盒或铁盒中，于120的干燥箱中干燥灭菌2小时，拿出备用。关于手术器材、瓶塞、工作服以及新配制的PBS洗液，则采纳高压蒸气灭菌法，即在15磅的条件下，加热20分钟。而关于MEM培育液、小牛血清和消化液等需用G5或G6滤器负压抽滤后使用。3、无菌操作过程在无菌操作过程中，最重要的是要保

5、持工作区的无菌、洁净。所以，在操作前2030分钟要先启动超净台和紫外灯，并仔细洗手和消毒。在操作时，禁止吵闹，禁止用手直接拿无菌物件，如瓶塞等，而一定用消毒的止血钳、镊子等。培育瓶应在超净台内操作，而且在开启和加盖瓶塞时需频频用酒精灯烧。关于吸管应先用手拿后1/3处，戴上胶皮乳头，并用酒精灯烧烤以后再吸液体。4、常用洁净液的配制法重铬酸钾洁净液：可依据不一样需要，采纳以下的任何一种浓度。先将重铬酸钾溶于水中，再慢慢加入浓硫酸。注意，此时可产生高热，应防备容器破碎。重铬酸钾洁净液除污力强，腐化性大，应防止接触皮肤和衣服。为防备汲取空气的水分而变质，此液应储存于带盖的容器中。如洁净效劳较差，可再加入少量重铬酸钾及浓硫酸，还可持续使用。直到液体变蓝绿色，即不可以再用。配制重铬酸钾洁净液时，宜用耐高温的陶瓷缸或耐酸搪瓷或塑料容器。使用玻璃器皿时，应特别注意防备产生高热而破碎，切忌用量筒来配制。磷酸三钠将其配成5%10%水溶液，可用于清洗玻璃器皿上的油污，但经常使用腐化玻璃，使器皿表面模糊、毛糙。硝酸洁净液将其配成50%水溶液，可用于洁净微量滴定筒。乙二