DNA的粗提取与鉴定生物选修一高考考点总结

1、DNA的粗提取与鉴定生物选修一高考考点总结 理解了东西才记得准，记得牢。所以必需“先懂后记”。这是最基本的记忆方法。下面是小偏整理的DNA的粗提取与鉴定生物选修一高考考点总结，感谢您的每一次阅读。 DNA的粗提取与鉴定生物选修一高考考点总结 一、DNA的提取思路 提取生物大分子的基本思路是选用肯定的物理或化学方法分别具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。 二、DNA的理化性质 1.DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。利用这一特点，选择适当

2、的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使_杂质_沉淀，或者相反，以达到分别目的。随着NaCl溶液浓度的增大，DNA的溶解度_先减小后增大_。在_0.14mol/L_浓度下，DNA的溶解度最小，要使DNA充分溶解，一般采纳_2mol/L_浓度的NaCl溶液。 此外，DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精溶液。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分别。 2.DNA对酶、高温柔洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60-80的高温，而DNA在80以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。 3.DNA的鉴定：在沸水浴条件下，DNA遇

3、二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 三、试验设计 1.试验材料的选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是选用DNA含量较高的生物组织，胜利的可能性更大。你认为教材供应的材料中哪些不适合提取DNA?哺乳动物的红细胞、在液体培育基的大肠杆菌。(材料：鱼卵、猪肝、菜花(花椰菜)、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培育基的大肠杆菌) 2.破裂细胞，猎取含DNA的滤液：动物细胞的破裂比较简单，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入肯定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。提取花椰菜的DNA时，在捣碎的花椰菜中加入肯定的洗涤剂和食盐，进行充分

4、的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。 教材问题 为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞裂开? 蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂。 加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么? 洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA的释放;食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。 假如研磨不充分，会对试验结果产生怎样的影响? 研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量变少，影响试验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。 此步骤获得的DNA滤液中可能含有哪些细胞成分? 可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质 3.去除滤液中的杂质： 方案一：利用DNA

5、在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，通过掌握NaCl溶液的浓度去除杂质。详细做法是：在滤液中加入NaCl，使NaCl溶液物质的量浓度为2mol/L，过滤除去不溶的杂质，再调整NaCl溶液物质的量浓度为0.14mol/L,析出DNA，过滤去除溶液中的杂质，再用物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液溶解DNA。 方案二：直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10-15min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。 方案三：将滤液放在60-75的恒温水浴箱中保温10-15min，留意严格掌握温度范围。目的是除去担蛋白质等杂质。 教材问题 为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质? 用高浓度的盐溶液溶解DN

6、A，能除去高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。 方案二与方案三的原理有什么不同? 方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开;方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分别。 4.DNA的析出与鉴定： 将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液(体积分数为95%)，静置2-3min，溶液中会消失白色丝状物，这就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分。 取两支20ml的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml，将丝状物放入其中一支试管中，

7、用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合匀称后，将试管置于沸水浴中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。 四、操作提示 1.以血液为试验材料时，每100ml血液中需要加入3g柠檬酸钠，防止血液凝固。 2.加入洗涤剂后，动作轻缓、严厉，否则简单产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。 3.二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。 高中学习生物的最佳方法 1、理解记忆 理解了东西才记得准，记得牢。所以必需“先懂后记”

8、。这是最基本的记忆方法。 2、联系实际记忆 常说“学以致用”，反过来“用也可促学”。把生活实践中的阅历学问应用到课堂学习中来，激发学习乐观性的同时，也会记得更坚固。例如：“管理农作物时进行松土，可以促肥”记“植物的根部汲取矿质元素离子必需要氧气促进根的有氧呼吸”;“氧气疗法驱除蛔虫”记“蛔虫的异化作用方式是厌氧型”。 3、形象记忆 内容形象、直观、记忆就深刻、难忘。把学问形象化能关心记忆。例如：U(象尿桶)脲嘧啶C(象半圆包过来)胞嘧啶A(象线飘起来)腺嘌呤T(象胸前的十字架)胸腺嘧啶DNA的结构特点可以借助DNA的实物模型或多媒体形象显示关心记忆。 4、英汉互译记忆 抽象的生物字符借助英语记起来就便利易懂。例如：HHear(canthear听不懂H区受损表现为“听觉性失语症”)SSpeak(cantspeak不能讲S区受损表现为“运动性失语症”)ADP中的DDouble“双倍”;所以ADP称“二磷酸腺苷” 5、口诀记忆 将生物学学问编成“顺口溜”，生动好玩，印象深刻，不易遗忘。例如推断遗传病的显性或隐性关系“无(病)中生有(病)为(该遗传病为)隐性(遗传病)”“有(病)中生无(病)为(该遗传病为)显性(遗传病)”;大量元素他(C)请(H)杨(O)丹(N)