藤黄酸HPβCD包合物冻干粉针的质量标准初步研究

1、藤黄酸HP-CD包合物冻干粉针的质量标准初步研究【摘要】目的制备藤黄酸的HP-D包合物冻干粉针,并初步考察藤黄酸包和物冻干粉针的质量标准。方法采用冷冻枯燥法制备包和物，HPL分析藤黄酸的体外释放规律，并测定包合物冻干粉中藤黄酸的含量。结果优化的包合工艺制备的冻干粉针外观形态，溶解性好,用生理盐水稀释200毫升后在一个半小时内释放不超过20%,建立的含量测定方法重现性好、准确简便。结论含量测定方法可行，包合及冻干工艺优化合理。【关键词】藤黄酸包合物质量标准1藤黄酸的提取别离纯化工艺1.1.1藤黄酸的提取称取藤黄原料200g，加丙酮800l，温度控制在60左右，回流提取2h，倒出上清液后继续加60

2、0l，400l的丙酮，依次反响2h，1h回收多余溶剂，旋蒸提取物，再放置恒温水浴锅中蒸发至溶剂很少再置于真空枯燥仪中得藤黄酸粗提物的枯燥品132g。1.1.2藤黄酸吡啶盐的制备称取藤黄酸粗提物50g，参加吡啶85l，于70水浴上加热溶解，趁热抽滤，滤瓶等容器用少量吡啶洗涤，合并洗液，滤液，量筒量取共计140l。按以前探究的条件：100/13=140/X，X=18l，参加温热蒸馏水18l，搅拌，放置冰箱中过夜，析出沉淀，抽滤得到橙红色沉淀，70%吡啶洗3次共100l，水洗3次，于60烘箱中烘干，得藤黄酸吡啶盐40g。1.1.3藤黄酸的纯化称取藤黄酸吡啶盐粗品40g，参加甲醇:乙酸乙酯=16：1的

3、混合液85l，80回流至完全溶解后，趁热抽滤，滤液置冰箱中冷藏过夜，析出大量橘红色沉淀，抽滤，滤饼烘干，得藤黄酸吡啶盐精品21.5g。将重结晶得到的藤黄酸吡啶盐用H2l溶解，依次由1N盐酸,水洗至中性，合并有机层，无水Na2S4,枯燥，过滤，滤液于56旋蒸浓缩至少量，转移到蒸发皿中，于60真空枯燥，得藤黄酸5.91g。1.1.4自制藤黄酸的验证用熔点仪对制备的藤黄酸连续进展三次熔点测定分别为：82.483.1，82.683.0，82.183.7.与文献值:8083相符。2不同浓度的HPD对藤黄酸的增溶作用依次配成浓度为4、8、12、16、20、24、28、32、36、40、44、48的HP-D

4、2l的水溶液，另取1.2g藤黄酸溶于16l2H5H。温度控制在30-40，向上述不同浓度的HP-D的溶液中逐渐滴加0.8l藤黄酸的2H5H溶液，即每毫升溶液里面滴加30g的藤黄酸，反响24小时。温度分别为室温、40-50、50-60，其它条件不变进展同样的反响，经高效后观察5060的条件下增溶效果最好。50-60经HPL后结果。48637563增溶试验结果说明HP-D对藤黄酸有增溶作用,相溶解度图显示出典型的AN型特征。一般AN型特征的药物包合物的表观稳定常数不能计算或计算没有意义。尽管包合机理复杂,包合物主客分子比拟难以计算,但是可以肯定的是HP-D可以与藤黄酸在溶液中形成包合物，属于不稳定

5、包合，需要考虑稀释稳定性，所以参加L精氨酸助溶1。2.2藤黄酸的包合依次配制浓度为10%、20%、30%、40%、50%、60%的2lHPD水溶液。另取藤黄酸0.3g，用8l无水乙醇溶解，温度控制在5060，分别向上述不同浓度的HPD溶液滴加0.8l藤黄酸乙醇溶液，即每份溶液中加了30g的藤黄酸，搅拌反响24小时。反响完毕后将反响液倒入小安瓿瓶中，再用少量蒸馏水洗圆底烧瓶，一并倒入小安瓿瓶中，置冰箱中冷冻结冰2.3藤黄酸成盐后的包合称取L-精氨酸0.6g于小锥形瓶中，参加4l蒸馏水，搅拌溶解后，再分批参加藤黄酸0.12g，使之完全溶解。另取HPD0.9g、0.6g、0.3g于25l圆底烧瓶中，

6、参加2l蒸馏水使溶解，缓缓滴加上述L精氨酸的藤黄酸溶液1l，即HPD的浓度为30%、20%、10%的溶液，于5060水浴中反响89小时，反响完毕后将反响液转移至小安瓿瓶中，置冰箱中冷冻结冰2。2.4冻干粉中藤黄酸含量测定的研究2.4.1藤黄酸成盐后最大吸收波长确实定取藤黄酸盐溶液适量,加甲醇溶解并稀释制成浓度约为10ug/l，按分光光度法,在200400n波长范围内进展扫描,测定其最大吸收波长为365n。2.42条件与系统适用性试验色谱柱：HypersilDS18色谱柱4.6250，25)；流动相：甲醇-0.1%H3P4(91)；检测波长365n；流速1.0Lin-1；进样体积20L；柱温为室

7、温。甘露糖衍生物峰理论塔板数计算不低于50000。2.4.3藤黄酸成盐的标准曲线配制2l10、20、30的HPD溶液，再配制15的L精氨酸溶液，使每毫升中含有30g的藤黄酸，配制成盐。在5060条件下反响8小时3，在反响过程中缓缓参加上述盐溶液1l，反响完毕将反响液稀释100倍。转贴于论文联盟.ll.2.4.2.4.4黄酸的含量测定分别取3批号的冻干粉各五份，再用甲醇溶解并稀释成适宜的浓度超声3次，每次20分钟4，进样分析。2.4.5精细度试验取一批片剂样品用甲醇稀释并超声后连续进样6次，结果RSD=0.65%。2.4.6重现性试验对同一批片剂样品按2.4.4中的方法重复平行测定5次，RSD=

8、0.91%。2.4.7回收率取样品两份，一份用甲醇稀释并超声3次后定量参加藤黄酸对照品后测定含量，另一份不加对照品测定含量，计算回收率。结果回收率分别为100.67%和98.34%，RSD分别为2.74%和3.22%(n=5)。2.5冻干粉用生理盐水稀释后藤黄酸体外释放的规律研究配置质量分数为10%、15%、20%、25%、30%的HP-D的水溶液，分别滴加藤黄酸盐溶液各1毫升含藤黄酸30毫克，温度控制在5060下反响8小时,反响液用生理盐水稀释成200l之后，在一个半小时内连续进样7针，HPL分析结果。第1针进样根本反映出反响的包合率，当HP-D的质量分数大于20%时，包合率到达90%以上，

9、在一个半小时内从HP-D中释放出来的藤黄酸的量不超过25%,并且HP-D的质量分数越大释放得越少。以体外释放情况作为对包合工艺的评价标准，最终确定了包合的优化工艺条件为：HP-D的质量分数为30%，温度5060，反响时间8小时。3结果与讨论HPD对藤黄酸有增溶作用，通过分析当HPD的浓度在016时，藤黄酸溶解度与HPD的质量分数成正比，当HPD的浓度在大于16时，对藤黄酸的增溶作用增加不明显。优化的包合工艺的冻干粉在一个半小时内从HP-D中释放出来的藤黄酸的量不超过20%，根本到达试验设计的目的。本实验建立的含量测定方法精细度高、重现性好。参考文献1于大海,高坤,孙英华,等.那格列奈-2-羟丙基-环糊精包合物的制备及其理化性质J.沈阳药科大学学报,2022,24(8):465-469.2殷殿书,蒋建兰.紫杉醇透明质酸注射用冻干制剂的研究J.中国药学杂志,2022,39(1