兽药用纳米混悬剂

1、目录 TOC o 1-5 h z HYPERLINK l bookmark0 o Current Document 一、“禁抗”背景 1 HYPERLINK l bookmark2 o Current Document 二、纳米混悬剂简介 2 HYPERLINK l bookmark4 o Current Document 三、纳米混悬剂的应用 2 HYPERLINK l bookmark6 o Current Document 3.1 口服给药 3 HYPERLINK l bookmark8 o Current Document 3.2 注射给药 4 HYPERLINK l bookmark

2、10 o Current Document 3.3吸入给药 5 HYPERLINK l bookmark12 o Current Document 四、纳米混悬剂的主要成分 6 HYPERLINK l bookmark14 o Current Document 五、纳米混悬剂的制备方法 7 HYPERLINK l bookmark16 o Current Document 5.1 介质研磨 7 HYPERLINK l bookmark18 o Current Document 5.2 高压均质 8 HYPERLINK l bookmark20 o Current Document 5.3 超临

3、界流体技术 8 HYPERLINK l bookmark22 o Current Document 5.4 沉淀法 10 HYPERLINK l bookmark24 o Current Document 5.5 纳米喷雾干燥法 10 HYPERLINK l bookmark26 o Current Document 5.6 乳化法和微乳化法 11 HYPERLINK l bookmark28 o Current Document 六、兽药用纳米混悬剂的制备 11 HYPERLINK l bookmark30 o Current Document 参考文献 13、“禁抗”背景畜牧行业的市场竞争

4、日趋激烈、“饲料禁抗”的形势已经非常明朗，为了保障动物 产品质量和公共生物安全，2017年 4月 30 日农业部发出通知禁止在饲料中添加硫酸 黏杆菌素，6 月份指明要实施“退出行动”，中国兽药典委员会也在 6 月份发布通知， 建议停止使用氨苯砷酸、洛克沙胂、喹乙醇等。2017 年9 月13 日和 2017 年 11月 17 日，农业部先后两次向社会公开征求饲料添加剂安全使用规定，明确抗生素在饲 料使用中的规范规定，“禁抗”问题日益突出1。独业揷裳干虫師冬*:云童祛即規蔽5楼订童尺的if抑1frKBUi :1-|$ 弄. FJJ iSftJiiiSSraWMJlfeWHffla稅蓟 咼恂周H；知

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6、部相关通知I农业紺讦眾二轮性开征枣 HdTira frif 炉J tMJFy吊!1腕木 i诵则耳曲評片逬一會油間用問册陌揖卜伽希易怜:旳*怒:離JT媲表t罠址目器甘 mi224r GFti粘毎転阳 iHJil&iT. lEJ?BdfilW?MTft!11. Sr 就羞俎护KA耳歸九監如 詩尊见对肝I；辭谴讦745曲兑旺况再S：阿社仝开陌如L诣干李丄月卫日帥丸书西曦电初兽盏Etg IflE：址5阖1迪删吐回阳彳审薛电比E室皐币建话K件皐1 s。呼於礎阳i仇6破凹34MLWMMhEKJbDiTFE,虱話祥卒聊hsr裂射申遇腮住号衣盘胡泌司阿懂邮常忆诲吐审fi%EE住于超旬負田討躯趣吧评冠韻殳办仝加

7、tf*8iriwRW= 的帶回嗟堂曲则御珠电见期图1农业部相关通知II早在 1986 年瑞典便已率先宣布全面禁止抗生素作为饲料添加剂，规定畜禽饲料 中全面禁用AGPs邙阿拉伯半乳糖蛋白）；1999年丹麦自愿停止在体重35kg以下猪只 使用药物饲料添加剂；1999年至2006年欧盟只允许在饲料中使用莫能菌素、盐霉素、 阿维拉霉素、黄霉素，2006 年欧盟成员国在法律上全面停止使用抗生素促张剂； 2013 年美国食品药品监督局发布了权威的行业指导性文件兽药饲料指令，它指出抗生 素只能在兽医监督下合理使用，只可用于治疗，并从2014 年起用三年时间禁止牲畜 饲料中使用预防性抗生素，从而最大限度地避免

8、致病菌的抗药性问题2。“禁抗”并不是全面禁止抗生素的使用，而只是明确了抗生素不能作为饲料添加 剂，在动物出现病症后仍能作为治疗药品使用，使抗生素从原来的“主动预防”角色 向“被动治疗”角色转变。这将对兽用抗生素的用量、用法、剂型等产生重大影响， 因此在现有抗生素基础上研发新剂型，或研发新型保健类兽用药品成为目前亟需解决 的问题。二、纳米混悬剂简介高通量筛选等新技术的广泛应用使新药的开发效率大幅提高，然而开发的新药约 有 90为水难溶性药物3 。因难溶性药物在胃肠道的溶出速率较慢，致使其吸收受限、 生物利用度低4。所以，增加难溶性药物的溶解度、提高其生物利用度，一直是药剂 学研究领域的一项重要内

9、容。为提高难溶性药物的溶解度和溶出速度，常规办法有：共溶剂增溶、环糊精包合 技术、固体分散技术、脂质纳米载体系统或微粉化等5-8。但这些方法均有其局限性， 如共溶剂可能会引发毒性反应，环糊精包合物对药物分子大小和形状有特殊要求，脂 质纳米载体系统物理稳定性差、包封率低，微粉化只能加快药物溶出速率而无法提高 溶解度等9,10。而将微粉化药物进一步破碎得到的纳米级颗粒制成纳米混悬剂 (nanosuspensions) 则可同时提高药物的溶解度和溶出速度。纳米混悬剂通常是指纯药物以晶态或无定形 形式，在稳定剂的稳定下分散在液体中的纳米或亚微米团胶态分散体系，其中药物粒 径为11000nmii,其几乎

10、适用于所有难溶性药物，该制剂既可以作为一种中间剂 型，也可以作为最终剂型应用，进一步加工成各种口服制剂或注射剂、以及适合其他 给药途径的最终制剂。纳米混悬剂具有改善难溶性药物的生物利用度、降低给药剂量、 减少毒副作用、给药途径多 12等优点。同时，药物颗粒达到纳米级别后，可使其具 备不同于普通制剂的理化性质13。三、纳米混悬剂的应用相对于粒径为数十微米的传统制剂，粒径为纳米的纳米晶具有高表面界面效应、 量子隧道效应、限域效应和小尺寸效应，这是介于宏观系统和微观系统之间的介观系 统特有的效应，并由此派生出传统药物所不具有特殊的理化性质和体内外生物特征。 因此，纳米晶不仅可实现多途径给药，更具备传

11、统药物传输系统无法比拟的优越性。 提高难溶性药物的饱和溶解度和溶出速率，提高生物利用度，实现静脉输注给药，减 少用药剂量，降低不良反应，提高药物治疗指数，增加临床用药安全性和制剂顺应性， 是纳米晶主要优点。表 1 为近年来部分实现纳米混悬的成功药剂。表 1 部分混悬剂制剂适应证合柞制药公司结药逵耗ABRAXANE甘榕性乳腺摊美国先箱科为美園制药合作伙伴(/ndijclpsed抗感染、抗传染百特无抗压百特无西界莫司兔疫抑舸刑礼来憲氐靜注阿瑞毗坦丨1皿北礼来默克细胞肉F抑制剂礼垛CytokineIW礼来Phjtcgcn I静注丁 hymetiaciiL抗ffi礼*NewRiotics静注半诺贝特调

12、脂釦斯基制药Undisposed靜注醋酸甲地孕酮礼来帕尔赭药口胆门消安抗癌斯基制妁SlEp迥卿布地奈穗礼来Sheffield肺部给雳湿疑皮肤炎Nu tryst无同部给商磷脱钙痢唐粘膜疫苗址刑RioSameJ；糟尿病BiaS-anic：无口服3.1 口服给药口服给药是药物制剂最先考虑的给药途径，也是当前上市或处于临床研究阶段的 纳米混悬剂的主要给药途径。因纳米晶具有巨大的表面积和显著减小的粒径，使药物 的溶出速率和溶解度急剧增大，延长胃肠道滞留时间，减少进食与非进食对生物利用 度的影响，提高口服生物利用度。将溶出度差的药物制成纳米混悬剂后，不仅能够大 大提高药物的溶解度以及溶出速率，而且也可显著

13、加快其吸收速率。王治平等14通过高压均质法制备葛根总黄酮纳米混悬液，并以甘露醇为冻干保护 剂制备了口服葛根总黄酮纳米混悬液(PF-NS)冻干粉，以人工胃液为溶出介质，考察 PF-NS 冻干粉及其物理混合物中葛根素、3-羟基葛根素、大豆苷和大豆苷元的溶出度。 结果表明 PF-NS 冻干粉在 15min 时几乎全部溶出，而其物理混合物的累积溶出率不 足50%。PF-NS冻干粉可显著提高总黄酮中葛根素等4种成分的释放速率，4种成分 基本为同步释放，其溶出速率显著优于其物理混合物。BORHADE等15通过纳米沉淀-高压均质法制备了一种粒径约为375.1nm的阿托 伐醌纳米混悬液，并通过冻干粉针技术进一

14、步将其制备成口服制剂，通过观察大鼠体 内药动学指标及建立小鼠 4d 抑制试验模型评价其口服抗疟疗效。实验结果表明，阿 托伐醌纳米混悬液通过减小药物粒径大大增加了阿托伐醌的水溶性以及体外溶出速 率。制备成片剂后，与玛拉隆相比，极大缩短药物达峰时间，大大提高峰值浓度，其 药-时曲线下面积(AUC)增加了 3.24.6倍。通过纳米混悬液技术，甚至是以1/4的低 浓度用药仍良好地抑制寄生虫生长与存活。此外，口服药物在胃肠道中的吸收是影响药物体内外相关性的重要因素。将药物 制成纳米混悬液后可减小药物的粒径，从而使药物对胃肠道黏膜具有一定的黏附性， 延长药物在胃肠道内的滞留时间，增加了胃肠道对药物的吸收，

15、进而提高了药物的生 物利用度。黄芩素由于其溶解性差，存在肝肠循环和首关效应导致其生物利用度低， 高缘等16用反溶剂重结晶结合高压匀质法将黄芩素制备成纳米混悬剂后，增强了黄芩 素对胃肠黏膜的黏附，延长了在胃肠道内的吸收时间。以黄芩素原料做参比，黄芩素 纳米混悬液经口给药后的相对生物利用度为 166.1%，显著提高了黄芩素口服给药的 生物利用度。又如感染小球隐孢子虫后容易引起严重的腹泻，导致药物在胃肠道中的 保留时间不长，药物生物利用度不高。 JACOBS 等17通过高压均质法制备了布帕伐醌 (buparvaquone)纳米混悬剂用于治疗小球隐抱子虫的感染，制剂服用后较好地附着于 胃肠道黏膜从而延

16、长药物在胃肠道中的停留时间，取得了很好的疗效。3.2 注射给药静脉注射给药静脉注射用纳米混悬剂不仅具有起效迅速、辅料用量少、毒性降低 等特点，而且因其药物以固体粒子分散于介质中，药物浓度高，给药体积小，可减少 给药频率。李林穗等Ml采用沉淀一高压匀质法制备平均粒径为(18480)nm的静脉注射用多 烯紫杉醇纳米混悬剂，药物浓度可达到5mgmL-1，其饱和溶解度经测定为每毫升 20.4腿，是药物粗颗粒的3.15倍，48h的体外累积溶出百分率是药物粗颗粒的3倍以 上，极好地改善药物的体外溶出速率，增加载药量，提高了制剂的生物安全性。郭东 杰等19通过反溶剂结合高压均质法制备了牡荆苷纳米混悬液及其冻

17、干制剂并通过红 外光谱检测结果证实，牡荆苷纳米粒化学结构与原药相比无明显改变，不影响其药性。 体外溶出度结果表明，与牡荆苷原药比较，牡荆苷纳米混悬剂冻干粉的体外溶出度得 到显著提高，5min内其体外累计溶出量为(77.141.52)%,是药物原粉的4.5 倍,有效 提高牡荆苷原粉的水溶性和体外溶出度。3.3 吸入给药吸入给药是目前气管疾病的主要给药途径，与口服用药相比，它具有见效快、剂 量小、使用和携带方便、毒副作用小等优点，因此成为大家公认的理想给药方法。目 前市售的剂型主要有气雾剂以及干粉吸入剂。但因为个体吸入量的差异，干粉吸入剂 在剂量控制方面很难确保有足量的药物吸入；气雾剂的吸收效果虽

18、好，但其抛射剂氟 利昂会对大气环境造成严重的污染，存在一定的安全隐患。因此通过改进和提高给药系统的制剂工艺，找寻一种新型安全高效的药物传递系 统是医师以及患者的共同需求。若将此类难溶性药物制成纳米混悬液后，可通过纳米 混悬液技术大大降低药物的粒径，增大药物的比表面积，从而可以避免部分药物在口 腔、咽喉、食道等呼吸道之外的部位沉积，增强药物的疗效。张源等2以 HPMC、SLS 为基质材料，采用高压乳匀技术制备了一种粒径均值为 122.5nm 的新型布地奈德纳米 混悬吸入剂，实验表明此纳米混悬剂对豚鼠无变态反应，能明显控制哮喘发作并呈剂 量依赖性，能提高药物在体内吸收程度，显著抑制气道内炎性细胞浸

19、润，是一种适合 哮喘患者吸入的新剂型混悬剂。此外，王言才21系统研究了水飞蓟宾纳米晶释药体系，应用活塞一缝隙式高压均 质法制备了供口服和静脉给药的水飞蓟宾纳米晶，并以甘露醇为保护剂进行冷冻干燥 提高其稳定性，水飞蓟宾晶型保持不变，粒度分布均匀，溶解度和溶出速率增加，具 备良好的制剂学特性。纳米晶可提高水飞蓟宾的口服生物利用度，增加一细胞跨膜转 运系数延长静脉滴注给药时水飞蓟宾半衰期，并增加肝脏靶向效率。纳米晶可增强水 飞蓟宾口服和静脉给药时对犬急性肝损伤的保护作用。结果表明，纳米晶可提高水飞 蓟宾口服生物利用度和并实现静脉被动肝脏靶向传输给药，纳米晶技术是改善包括水 飞蓟宾在内诸多难溶性药物体

20、内外功效的重要途径。李明璐22以替米考星为原料药，研制出溶解度较高、疗效强、可减少给药次数的 替米考星长效混悬剂，并对其进行质量评价。替米考星长效混悬剂最佳处方为：替米 考星原料药2.5g/100mL，有机溶媒（1,2-丙二醇:乙醇=9:1）占比65%,润湿剂（吐温 -80） 0.3%，助悬剂（羟丙甲纤维素） 5%，抗氧剂（无水亚硫酸钠） 0.03%；含量测 定结果为合格；影响因素试验发现替米考星长效混悬剂对高温和强光照敏感，对湿度 不敏感；加速试验和长期试验发现替米考星长效混悬剂稳定性良好；药动学试验发现 替米考星长效混悬剂和实验室自制替米考星溶液的AUC分别为43.1649 pghmL-1

21、 和26.2065ghmL-1，替米考星长效混悬剂的相对生物利用度为164.71%。四、纳米混悬剂的主要成分纳米混悬剂的组成通常为分散介质(通常为水)、药物和稳定剂，有时也加入一 些缓冲剂、盐类和糖。纳米混悬剂药物处于纳米或亚微米粒径状态，由于纳米粒子独 特的理化性能，纳米混悬剂存在的主要问题就是稳定性，影响稳定性的主要因素有四 个：沉降、聚集、结晶和转晶。混悬剂的沉降速度可由 Stokes 公式来表征：式中r为粒径，耳和p2分别为药物和分散介质的密度，g为重力加速度，为体系粘 度，可以看出，减小药物粒径、减小药物和分散介质密度差，增大分散介质粘度可改 善混悬剂的沉降性能。纳米粒的粒径小，布朗

22、运动强烈，影响微粒在介质中保持聚集稳定性的主要因素 是，静电排斥作用和空间稳定作用。这两种作用可以通过加入离子或非离子稳定剂来 实现。纳米混悬剂中的药物微粒大小不一，在静置时，微粒的粒径大小和分布将不断变 化，这一规律可用 OstwaldFreundlich 方程进行描述:log 寫昇呂)=(I 2 I /f J /pRT可见，若r2S，即小粒径微粒比大粒径微粒的溶解度要高。如果某一稳 定剂加入纳米混悬剂中，不影响药物的溶解度，其分子将吸附在微粒的表面，从而抑 制晶体的生长。药物之间的晶型不同，其理化性质会有所不同。在某些条件下，药物晶型之间可 以发生转化。药物的稳定性、溶出度和生物利用度，以

23、及其安全性和有效性都会受到 晶型的影响。纳米混悬剂主要是无定型态和结晶态之间的转化，稳定剂将会影响其转 化。传统稳定剂包括聚合物、离子型表面活性剂和非离子型表面活性剂。聚合物包括 聚维酮、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、TPGS、聚乙二醇、聚乙烯醇、微晶纤 维素等。离子型表面活性剂包括十二烷基硫酸钠、硫酸月桂酯钠(SLS)、 poly(ethyleneimine)(PEI)、壳聚糖等。非离子表面活性剂包括吐温、泊洛沙姆、PEO PPOPEO 等。新型稳定剂主要有食物蛋白、水溶性糖类和黏土。食物蛋白相对于传统稳定剂更 安全，常用食物蛋白有大豆蛋白(SPI)、乳清蛋白(WPI)、卩一乳球蛋白(卩一

24、lg)。食物蛋白变性后具有更好的稳定效果23。水溶性糖类主要包括甘露醇、乳糖和海藻糖，在固 化过程中能有效抑制药物纳米粒的聚集。黏土主要使用蒙脱土 (montmorillonite)，其 具有较好的吸附性和流变学性质并且能控制药物的释放。Dong等Bl研究表明以蒙脱 土为稳定剂能够有效抑制非洛贝特纳米粒聚集，固化后纳米粒仍然具有较高的溶出度 为了克服纳米粒间的相互吸引力及减少微粒相互之间碰撞的机会，需要在微粒间 增加排斥力，通常使用适量的稳定剂来达到抑制纳米微粒的成长速率。一般可选择离 子型和非离子型表面活性剂，离子型表面活性剂可使纳米微粒间产生静电排斥；非离 子型表面活性剂则使纳米微粒间产生

25、立体排斥。研究显示，合用两种类型表面活性剂 可以使制剂具有更好的长期稳定性25。目前稳定剂的筛选工作主要包括稳定剂的单独使用和联合使用两种，此过程需筛 选大量有效候选稳定剂，难度较高。故深入了解药物纳米粒间的作用机制并掌握高通 量筛选技术将有利于稳定剂的高效筛选26。五、纳米混悬剂的制备方法目前国内外用于制备水不溶性药物的纳米混悬剂主要采用“ top - down ”与 “bottomup ”的方法。“ top-down ”即自上而下，是将粒径较大的粒子通过机械 力的作用破坏成小颗粒的方法，也称为分散法，主要包括介质研磨和高压均质。“bottomup ”即自下而上，是指从药物分子水平组建纳米粒

26、子，由分子聚集成长为 纳米级颗粒的方法，也称为凝聚法，主要包括超临界流体、沉淀和纳米喷雾干燥。还 有第三种方法称为乳化法。5.1 介质研磨介质研磨法是先将药物与加有稳定剂的分散介质混匀，再一起放入介质研磨 机的研磨室内，研磨机快速运转，使药物粒子与研磨介质、研磨室内壁、药物粒子 之间发生猛烈的碰撞，从而得到纳米级别的药物粒 27。混合物中的小颗粒药物粒子 通过滤网进入再循环室，大颗粒和研磨介质则留在研磨室内。再循环室内的药物粒 子一旦达到所需的纳米级别就被取出，否则应继续研磨。研磨介质一般为高交联聚 苯乙烯树脂、超致密陶瓷介质、玻璃28、氧化锆珠或氧化钇稳定的氧化锆29。研磨介 质的尺寸及数量

27、、研磨速度、研磨时间等因素大都会影响药物粒子的粒 30-32。本法具有适用范围广、制备过程简单、适用于工业生产、所制粒子粒径分布窄、 制备过程温度可控等优点。缺点是在研磨过程中有可能混入一定量的研磨介质，用药 后，可能会产生严重的不良后果，所以该法不适用于制备注射用纳米混悬剂，已上 市的基于介质研磨法的纳米晶药物都是口服给药。 在工业化大生产中，为了获得平 均粒径小于200nm且分散均匀的分散体系，研磨时间一般为060min33。在现有的 研磨介质中，氧化锆珠在研磨的过程中造成的污染较小，但成本较高。一般应根据药 物性质、球磨机的线速度及运行时间来选择经济有效的研磨介质。高压均质第一代高压匀质

28、机有穴蚀喷嘴型和碰撞阀体型。应用较多的是碰撞阀体型，即先 将药物微粉化制成混悬液，然后在高压匀质机高压泵的作用下强行高速通过匀化阀的 狭缝，瞬间失压的药物混悬液以极高的流速喷出，碰撞在冲击环上，利用其产生的空 穴效应、撞击效应和剪切效应制得纳米混悬剂。第二代高压匀质机采用了对射流的原 理，使药物混悬液快速流经 Y 型匀质腔，自相碰撞而制得纳米混悬剂。本法可一步 完成，也可分两步完成，即经过两个串联的均化阀，第一个均质阀的压力降较大，主 要起分散混悬剂的作用，第二个均化阀的压力降小于第一个，以提高纳米混悬液的稳 定性34。高压均质法不仅具有介质研磨法的优点，还可避免研磨介质的参入，但第一代高 压

29、匀质机会引入残落的惰性金属，对人体产生一定的毒性，也不适合制备注射用纳米 混悬剂。第二代高压匀质机解决了金属残留的问题，可以用来制备注射用无菌纳米混 悬剂，同时提高了腔体的使用寿命，但不适用于浓度和黏度较高的药液，并且匀质次 数相对较多，得到的纳米晶粒径分布较宽。在使用高压匀质机匀质之前，要预先将药 物微粉化为粒径不大于25“m的微粒，并且不同药物的匀质压力和匀质次数也会不一 样，需要通过预试验筛选出适于该药物的匀质压力和匀质次数。超临界流体技术在超临界状态下，药物的溶解度会随着温度和压强在较大范围内波动。利用超临 界流体如二氧化碳等与药物溶液混匀后经喷嘴喷出，在几十微秒内快速形成药物纳米 粒

30、子。根据超临界流体在药物结晶过程中的不同作用，可将结晶法分为快速膨胀技术 和超临界反溶剂技术35。5.3.1快速膨胀技术（RESS）先将药物溶解于一定温度和压力的超临界流体中，然后使超临界流体经过特定的 喷嘴喷出，瞬间减压膨胀，致使药物溶解度降低达到过饱和状态，从而析出纳米级别 的晶体。药物浓度、超临界流体压力及膨胀室的温度都会影响药物粒径。 Thakur36 用RESS法制备了苯妥英钠纳米晶体。在196bar和45C下，药物在超临界C02中的 溶解度为0.02mg/g，加入薄荷醇作为固体助溶剂后，溶解度为8.9mg/g，可能是因为 薄荷醇与苯妥英钠之间的相互作用致使苯妥英钠的溶解度增强了 4

31、00倍。并且，固体 助溶剂阻碍了药物颗粒的生长，从而形成更小的纳米晶体，比如，在96bar和45C条 件下，不加和加入固体助溶剂得到的终产品平均粒径分别为200、120nm；在196bar 和45C条件下，则所得终产品平均粒径分别为105、75nm。RESS 法操作简单，流程短、耗能小，无有机溶剂污染，在制备药物纳米晶体方 面有广阔的应用前景。缺点是 CO2 消耗量大，并且大多数药物在超临界流体中几乎 不溶或溶解度很小，使得此项技术使用受限。5.3.2超临界反溶剂技术（SAS）SAS法主要用于不溶于超临界CO2流体的药物，应用更广泛。先将难溶性药物 溶解于相应溶剂中，再通过喷嘴与超临界流体混匀

32、，药物遇到该反溶剂析出，形成纳 米结晶。YangX等1为解决黄芩素糖苷的溶解度和膜通透性问题，以N, N-二甲基甲酰 胺（DMF）和甲醇为溶剂使药物溶解。采用SAS法，在喷嘴处装有功率为150W的 超声装置，制备出粒度为（342.618.2） nm的黄芩素糖苷纳米混悬剂，其多分散系数 （PDI）值为0.320.06，溶出速率有明显提高，口服给药后，其血药峰值浓度cmax 为原料药的 12倍。喷嘴的几何形状、溶液的注入速率、超临界流体的压力、有机溶剂的种类等条件 都会影响纳米粒的粒径和晶型。该法还会伴有有机溶剂残留的问题。传统的SAS法 制备出的药物晶体粒径一般在微米级别，若在喷嘴部位装上超声装

33、置，可促进液滴和超 临界流体的分散作用，可制得纳米级药物晶体38，但此技术很难应用于工业化大生 产。5.4 沉淀法先把难溶性药物溶解，再把含有难溶性药物的溶液滴加到反溶剂中，药物浓度达 到过饱和而析出结晶。通过控制析晶温度和机械搅拌速度，使晶核的形成快而生长慢， 从而得到理想的纳米混悬液。在使用该法制备难溶性药物纳米晶时，不仅需要筛选出 恰当的有机溶剂及其比例，还要选出适当的析晶温度和搅拌速度，以使析出的药物晶 体粒度达到要求。DasS等利用此技术制备出的粒径范围在150290nm的两性霉素B纳米混悬 剂，其在 30min 体内释放度可以达到 60，且动物实验结果显示，该纳米混悬剂对 眼球无任

34、何刺激HeSN等40采用反溶剂超声沉淀法，以乙醇为良溶剂，水为反溶剂， 将 1ml 溶有药物的有机相在搅拌速度为 1000r/min 的条件下加至 20ml 水中，然后用 超声波处理器处理以减小粒径，整个过程控制温度在48C。结果，制备出的替尼 泊苷纳米混悬剂粒径为（15111） nm，PDI值为0.138，分散性较好。对携带有C6 肿瘤细胞的大鼠体内抗肿瘤实验表明，与市售替尼泊苷注射液（V UMO N）相比，该 混悬剂对肿瘤细胞抑制率比 VUMON 高 12，且其冻干制剂的稳定性良好。应用沉淀法的前提条件有两点：其一，药物至少能溶解于一种溶剂；其二，这一 溶剂与反溶剂应能混溶。所以沉淀法的缺

35、点在于不能应用于既不溶于水又不溶于非水 溶剂的药物。另外，沉淀法中很多情况下都要用到有机溶剂溶解药物，而有机溶剂会 残留在药物制剂中，影响人体使用的安全 41，但该法的设备便宜、程序简单，易于 工业化生产。5.5 纳米喷雾干燥法先将难溶性药物溶解，再使该药物溶液通过特定的喷嘴进行喷雾干燥，所得药物 颗粒以含有稳定剂的水相分散即得纳米混悬剂。XuY 等42利用纳米喷雾干燥工艺制备了难溶性药物阿立哌唑的纳米粒，测得粒 径为357nm，并比较了阿立哌唑原料药、与稳定剂的物理混合物和纳米粒在不同pH 介质中的溶解度。结果显示，在水、pH7.0和4.0介质中，上述三者的溶解度（g/ml） 分别为 0.2

36、5、 0.8、 2.5， 0.2、 0.3、 3.2 和 120、 280、 400。这说明本工艺制备的纳米 粒溶解度明显高于原料药和混合物。KumarS等43采用喷雾干燥法，将100ml混悬液制剂以7.5ml/min的速度经0.5mm 的喷嘴喷出，控制入口温度为150C，保持雾化气体压力恒定在40mmHg，制备出粒 径为 114nm 的萘普生纳米混悬剂，其溶出度达到原来的 2 倍。在纳米喷雾干燥技术 应用过程中，喷雾干燥温度、喷帽孔径大小及料液组成和浓度对于药物颗粒的大小、 形貌、分散性、流动性及热敏性物质的保护等至关重要。因此，各工艺参数需要不断 探索和优化。此法操作简单、药物粒径可控，但

37、是对于比重特小的药物来说，再次用 水相分散不易形成稳定且均一的混悬液44；另外，该法也不适于制备对热不稳定的药 物。5.6 乳化法和微乳化法乳化法是先将难溶性药物溶解于有机溶剂中制成 O/W 型乳剂，乳滴内相包裹难 溶性药物，再通过减压蒸馏、超声破碎、对流均质等方法使有机溶剂挥发，药物析出 形成纳米混悬剂，通过超速离心得纳米级药物或进行浓缩。通过控制乳滴大小可调节 药物粒径。有机溶剂一般选择乙酸乙酯、乙酸甲酯等45。微乳化法制备纳米混悬剂的原理同上，只是选用的有机溶剂是与水部分互溶的有 机溶剂（如乳酸丁酯、三乙酸甘油酯等），使其作为内相制备乳剂，然后用水稀释， 使内相的有机溶剂被水溶解而析出药

38、物，再通过超速离心分离出药物的纳米粒子或浓 缩得到纳米混悬液46。采用此法制备纳米混悬剂，简单易行，但需要筛选出合适的乳化剂，但目前对乳化 剂的筛选还停留在依据经验和大规模试验筛选的基础上，工作量大。并且，乳液中还 会存在一些未被包封的游离药物，这些游离药物会随着时间延长而在水相中凝结成 较大颗粒，所以该法制备出的纳米混悬剂常会伴有稳定性差的问题。六、兽药用纳米混悬剂的制备目前大部分兽用抗生素在水中的溶解度都不是很好，例如金霉素，盐酸金霉素， 替米考星，莫能菌素，氟苯尼考等，受此限制，抗生素目前大部分使用预混剂作为饲 料添加剂使用，随着饲料“禁抗”期限的到来，开发新剂型成为当务之急，而首先要

39、解决的问题就是提高该类物质在水中的溶解度，纳米混悬剂是目前国内外研究较多， 技术也较为成熟的一种工艺。上述几种抗生素在有机溶剂中的溶解度都相对较高，例如金霉素、盐酸金霉素、 莫能菌素在甲醇中的溶解性较好，氟苯尼考在乙腈中的溶解性较好，而替米考星在酸 中的溶解性较好，这些溶剂均与水能完全互溶，因此可以考虑采用化学沉淀法制备该 类抗生素的纳米晶体。首先制备含抗生素的饱和有机溶剂，然后将该溶剂加入纯净水中，由于抗生素在 水中溶解度差，水的存在使抗生素在有机溶剂中形成过饱和溶液，沉淀析出，控制析 出速率等条件，可以制备纳米级抗生素颗粒。过滤，干燥，溶剂进行分离回收。然后 选取合适的稳定剂、抗氧化剂等助

40、剂，可以制备相应的纳米混悬剂。如果采用高压均 质法，制备过程基本相似。其具体工艺流程如图 2 所示。否合格否沉转降分团降散聚解晶性性性性性制备纳米颗粒添加助剂性能检测纳米粒度检测否合格否沉转降分团降散聚解晶性性性性性制备纳米颗粒添加助剂性能检测纳米粒度检测参考文献 HYPERLINK http:/www.sohu.eom/a/205739125_180559 http:/www.sohu.eom/a/205739125_180559 HYPERLINK /technology/voice/wukang/2016-07-18/2016634.html /technology/voice/wuka

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