苦玄参药材有效成分含量积累动态的研究

1、苦玄参药材有效成分含量积累动态的研究【摘要】目的测定不同月份生育期的苦玄参中苦玄参苷A的含量，为苦玄参药材标准化种植提供实验根据。方法采用高效液相色谱法测定同一种植地采集实验样品中苦玄参苷A的含量，以18DS2柱为固定相，乙腈-0.3%磷酸溶液3664为流动相，检测波长为264n。结果苦玄参中苦玄参苷A的平均含量从当年6月份到次年1月份分别为0.25%，0.36%，0.36%，0.22%，0.16%，0.16%，0.07%，0.05%，以7、8月份含量较高。结论所建立的含量测定方法灵敏度高，专属性强，重复性好，以药材中苦玄参苷A的含量上下为标准，苦玄参最正确采收时间应为当年7、8月份。【关键词

2、】苦玄参苦玄参苷IA高效液相色谱法积累动态苦玄参，又名苦草、蛇总管，为玄参科植物苦玄参Piriafel-tarraeLur的枯燥全草，产于我国广西、广东、云南和贵州等地，该药已收载于?广西中药材标准?1990年版。苦玄参为一年生草本植物，在广西民间作为药用已有很长的历史，其性寒味苦，主治风热感冒、咽喉肿痛、痄腮、疖肿、泄泻痢疾、痔疮、湿疹，毒蛇咬伤、跌打损伤等，具有清热解毒，凉血消肿之成效1。本实验研究将为确定广西苦玄参药材的最正确采收期，深化研究该药材质量，制定和进步该药材的质量标准，进步相应中成药产品质量和市场竞争才能，标准化种植该药材提供实验根据。1材料与仪器1.2试剂甲醇、乙腈色谱纯，

3、其他试剂均为分析纯。1.3仪器Agilent1100高效液相色谱仪，含在线真空脱气机(G-1322A)，高压四元梯度泵(G-1311A)，标准自动进样器(G-1313A)，智能化柱温箱(G-1316A)，可变波长检测器(G-1314A)，二极管阵列检测器，Agilent1100series色谱工作站(美国安捷伦科技公司；G-16高速微量离心机北京医用离心机厂；SB3200-T超声波提取器上海必能信超声；illipreSipliity-185超纯水器美国密里博公司；BP211D电子分析天平德国赛多利斯。2方法2.1分析测定方法学研究2.1.1色谱条件色谱柱为18DS2柱(4.6250，5，大连依

4、利特公司)；检测波长264n；流动相为乙腈-0.3磷酸溶液3664；流速1l/in；柱温30；进样量10l；理论塔板数以苦玄参苷IA峰计应不低于3000。2.1.2对照品溶液制备精细称取苦玄参苷A对照品适量22.12g，置10l量瓶中，用适量甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为2.212g/l的对照品溶液。转贴于论文联盟.ll.2.1.3供试品溶液制备取苦玄参药材枯燥粗粉约2g，精细称定，置100l具塞锥形瓶中，精细参加75%甲醇25l，称定重量，超声处理30in，放冷，用75%甲醇补足损失的重量，滤过，滤液备用。取上述滤液1.5l置微型离心管中，以10000r/in速度离心10in，取上清

5、液备用，即得。2.1.4标准曲线制备分别精细汲取上述苦玄参苷A对照品溶液(2.212g/l)0.1，0.4，0.8，1.2，1.6和2.0l置10l量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，备用。分别取上述稀释溶液各10l，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定色谱峰面积值。以峰面积为纵坐标，对照品进样量(g)为横坐标，绘制标准曲线，并求出回归方程为：Y=814.25X+1.25，r=0.9999。结果说明苦玄参苷IA进样量在0.2214.424g间呈良好线性关系。结果见表1。色谱图见图1。表1苦玄参苷IA线性关系考察结果略2.1.5精细度实验取同一批供试品溶液20220910l，注入液相色谱仪，重复进样5

6、次，测定苦玄参苷IA峰面积值，RSD=0.11%。结果见表2。表2精细度实验结果略2.1.6重复性实验取同一批202209苦玄参药材枯燥粗粉约2g，精细称定，共取5份，按样品测定项下方法进展含量测定。结果RSD=1.3%。见表3。表3重复性实验结果略2.1.7稳定性实验取同一批供试品溶液202209在制备后0，2，4，8，12，24h分别进样10l，测定苦玄参苷IA峰面积值，RSD=0.29%，说明供试品溶液在24h内稳定。结果见表4。表4稳定性实验结果略2.1.8加样回收率实验取已测知苦玄参苷A含量的供试品202209枯燥粗粉约1g，精细称定。分别精细参加一定量的苦玄参苷A对照品溶液1.06

7、g/l2l，按供试品溶液制备方法制备待测溶液，按上述色谱条件测定，计算加样回收率。结果见表5。2.2样品测定与结果2.2.1样品测定分别取不同月份的苦玄参枯燥粉末约2.0g，精细称定，按供试品溶液制备方法制备，注入液相色谱仪，测定峰面积值。结果见表6。色谱图见图2。表5加样回收率实验结果略表6不同生长月份苦玄参中苦玄参苷IA含量略2.2.2结果分析本实验样品的搜集从苦玄参种植当年6月份起至次年1月，通过测定样品中苦玄参苷IA的含量，发现苦玄参苷IA的含量随月份的变化而变化：6月至7月含量增加很快，7月和8月含量到达最高。9月份后含量开场下降，10、11月含量继续下降但变化不大，12月至次年1月含量陡然下降，苦玄参苷IA含量缺乏0.1%。含量曲线图见图3。3讨论本实验研究初步说明，苦玄参苷IA的含量在7、8月份含量最高，7、8月份气温较高植株生长较快。进入10月份后，气温下降其含量也随之下降。因此，可初步确定苦玄参的最正确采收期应为7、8月份；目前，广西苦玄参药材产区采收期也在7、8月份，实验测定结果与实际消费相一致。苦玄参为一年生草本植物，一般采用春播，桂南以2月，桂北以3月间进展播种较为适宜。从播种期至苗期需历时一百多天，由于苦玄参在苗期植株矮孝产量少，不适宜进展采收，故本实验研究所用的药材样品从栽种当年的6月