基因工程、蛋白质工程和细胞工程课件

1、考点28基因工程、蛋白质工程和细胞工程专题10 现代生物科技专题考点28基因工程、蛋白质工程和细胞工程专题10 现代静悟与梳理栏目索引排查与特训静悟与梳理栏目索引排查与特训静悟与梳理依纲静悟静悟与梳理依纲静悟1.基因工程常考的3种基本工具(1)限制性核酸内切酶：识别特定核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA分子。(2)DNA连接酶：Ecoli DNA连接酶只能连接黏性末端；T4 DNA连接酶能连接黏性末端和平末端。(3)载体：能在宿主细胞内稳定存在并大量复制；有一个至多个限制酶切割位点，便于外源DNA片段(基因)插入其中；具有特殊的标记基因以便对含目的基因的受体细胞进行筛选。核心梳理1.基因工程

2、常考的3种基本工具核心梳理2.基因工程的4大操作程序(1)目的基因的获取从基因文库中获取。PCR技术扩增a.原理：DNA双链复制。b.条件：模板DNA、引物、游离的脱氧核苷酸、热稳定的DNA聚合酶。 2.基因工程的4大操作程序用化学方法直接人工合成。(2)基因表达载体的构建基因表达载体模式图 用化学方法直接人工合成。基因表达载体的构建过程(3)将目的基因导入受体细胞导入植物细胞：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法。导入动物细胞：显微注射法。导入微生物细胞：感受态细胞法(用Ca2处理)。基因表达载体的构建过程(3)将目的基因导入受体细胞(4)目的基因的检测与鉴定插入检测：DNA分子杂交。转录检

3、测：DNARNA分子杂交。翻译检测：抗原抗体杂交。个体水平检测：抗性接种实验。(4)目的基因的检测与鉴定3.图解记忆蛋白质工程3.图解记忆蛋白质工程4.比较记忆植物组织培养与动物细胞培养项目植物组织培养动物细胞培养取材植物幼嫩部位动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织过程4.比较记忆植物组织培养与动物细胞培养项目植物组织培养动物细结果获得植株个体，可以体现全能性新的细胞，不形成个体，不体现全能性条件无菌；营养；适宜条件无菌、无毒；营养、血清等；温度和pH；气体环境：O2、CO2结果获得植株个体，可以体现全能性新的细胞，不形成个体，不体现5.植物体细胞杂交与单克隆抗体制备过程比较步骤植物体细胞

4、杂交过程单克隆抗体制备过程第一步原生质体的制备(酶解法)正常小鼠免疫处理第二步原生质体融合(物理、化学法)动物细胞融合(物理、化学、生物方法)第三步杂种植株的筛选与培养杂交瘤细胞的筛选与培养第四步杂种植株的诱导与鉴定单克隆抗体的提纯相同点两种技术手段的培养过程中都进行有丝分裂，都是无性繁殖，都可称为克隆，都不涉及减数分裂；均为无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件5.植物体细胞杂交与单克隆抗体制备过程比较步骤植物体细胞杂交(1)诱导融合的方法分别有哪些？融合的细胞类型有哪几种(仅考虑两两融合的细胞)?提示诱导植物体细胞的原生质体融合的方法主要有离心、振动、电激或用聚乙二醇作为诱导剂。动物细胞融合

5、常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒(诱导动物细胞融合的特有因素)、电激等。融合的细胞类型：前者AA、BB、AB。后者瘤瘤、B瘤、BB。(2)各自的原理分别有哪些？提示前者有细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，后者有细胞膜的流动性和细胞增殖。(1)诱导融合的方法分别有哪些？融合的细胞类型有哪几种(仅考6.掌握克隆动物培育的流程6.掌握克隆动物培育的流程7.理清单克隆抗体制备的过程7.理清单克隆抗体制备的过程排查与特训12345678910题组一基因工程和蛋白质工程1.(2017全国，38)真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机

6、制。已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答下列问题：(1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A，以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A，其原因是_。解析答案 基因A有内含子，在大肠杆菌中，其初始转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，无法表达出蛋白A 排查与特训12345678910题组一基因工程和蛋白质工程12345678910解析细菌是原核生物，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制，将完整的基因A导入大肠杆菌后，无法表达出蛋白A。12345678910解析细菌是原核生物，原核生物没有真核12345678910(2)若用家蚕作为表

7、达基因A的载体，在噬菌体和昆虫病毒两种载体中，不选用_作为载体，其原因是_。解析噬菌体是细菌病毒，专门寄生在细菌体内；家蚕是动物。因此用家蚕作为表达基因A的载体，不选用噬菌体作为载体。解析答案噬菌体噬菌体的宿主是细菌，而不是家蚕12345678910(2)若用家蚕作为表达基因A的载体，在12345678910(3)若要高效地获得蛋白A，可选用大肠杆菌作为受体，因为与家蚕相比，大肠杆菌具有_(答出两点即可)等优点。解析原核生物常作为基因工程中的受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌。解析答案繁殖快、容易培养12345678910(3)若要高效地获得蛋白A

8、，可选用大肠12345678910(4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A，可用的检测物质是_(填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”)。解析检测目的基因A是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原抗体杂交。解析答案蛋白A的抗体12345678910(4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A，12345678910(5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献，也可以说是基因工程的先导，如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示，那么，这一启示是_。解析艾弗里实验表明加热杀死的S型细菌的DNA可转入R型菌中，这充分显示“DNA可以从一种生物个体转移

9、到另一种生物个体，”因此，可为基因工程理论的建立提供启示。解析答案DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体12345678910(5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为2.(2017全国，38) 几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：(1)在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA，常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料，原因是_。提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是_。12345678910解析嫩叶组织细胞壁较薄，较易破碎，所以常用嫩叶为实验材料。提取RNA时，提

10、取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是防止提取的mRNA被RNA酶降解。解析答案嫩叶组织细胞易破碎防止RNA降解2.(2017全国，38) 几丁质是许多真菌细胞壁的重要(2)以mRNA为材料可以获得cDNA，其原理是_。12345678910解析以mRNA为材料可以获得cDNA，原理是mRNA可根据碱基互补配对原则逆转录为cDNA。解析答案 在逆转录酶的作用下，以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA (2)以mRNA为材料可以获得cDNA，其原理是_(3)若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是_(答出两点即可)。123456789

11、10解析若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是：质粒载体中有启动子、终止子，便于目的基因的表达；质粒中有标记基因便于筛选；质粒中含有复制原点等。解析答案目的基因无复制原点；目的基因无表达所需启动子(3)若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能(4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是_。12345678910解析DNA连接酶催化形成的化学键是磷酸二酯键。解析答案磷酸二酯键(4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的(5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能

12、力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是_。12345678910解析基因表达包括转录和翻译两个步骤，若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高，其可能的原因是几丁质酶基因没有转录或转录的mRNA没有翻译。解析答案目的基因的转录或翻译异常(5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组123456789103.(2017全国，38)编码蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五个片段组成，编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成，如图1所示。 图1图2123456789103.(2017全国，38)编码蛋白回答下列问题：(1)现要

13、通过基因工程的方法获得蛋白乙，若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCTCAGGAAGGA)，则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙，原因是_。12345678910解析答案图1图2 在启动子的下游接上的编码蛋白乙的DNA序列起始端无ATG,转录出的mRNA无起始密码子,不能启动翻译过程 回答下列问题：12345678910解析答案图1图2 解析因为编码乙的DNA序列起始端无ATG，转录出的mRNA无起始密码子，因此所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙。 12345678910解析因为编码乙的DNA序列起始端无ATG，转录出的mRNA(2)某同学在用

14、PCR技术获取DNA片段B或D的过程中，在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等，还加入了序列甲作为_，加入了_作为合成DNA的原料。12345678910解析答案图1图2模板DNA四种游离的脱氧核苷酸(2)某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中，在P解析PCR技术扩增目的基因的条件需要：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶)。序列甲作为模板DNA，DNA的原料为四种游离的脱氧核苷酸。12345678910解析PCR技术扩增目的基因的条件需要：模板DNA、四种脱氧度不再增加，此时若要使T淋巴细胞继续增殖，可采用的方法是_。细胞培养过程中，培养箱中通常

15、要维持一定的CO2浓度，CO2的作用是_。12345678910解析答案图2(3)现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白，要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用，某同学做了如下实验：将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组，其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一组作为对照，培养并定期检测T淋巴细胞浓度，结果如图2。由图2可知：当细胞浓度达到a时，添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓细胞培养(传代培养)维持培养箱中的pH度不再增加，此时若要使T淋巴细胞继续增殖，可采用的方法是_12345678910解析动物细胞可以通过细胞培养(传代培养)继续增殖。细胞培养过程中，需要气体环境，其

16、中气体CO2的作用是维持培养箱中的pH。12345678910解析动物细胞可以通过细胞培养(传代培12345678910仅根据图1、图2可知，上述甲、乙、丙三种蛋白中，若缺少_(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段，则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。解析答案图1图2C12345678910仅根据图1、图2可知，上述甲、乙、丙12345678910解析分析坐标图：对比甲和乙蛋白刺激T淋巴细胞增殖情况发现：最终效果相当，只是增殖时间不同，可以推断出A、E片段编码的肽段不会降低T淋巴细胞增殖效果。将丙蛋白分别与甲和乙蛋白刺激T淋巴细胞增殖情况比较发现：丙蛋白降低了T淋巴细胞增殖。丙

17、序列与甲和乙序列相比较，缺少了C片段，也就是说若缺少C片段所编码的肽段，则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。12345678910解析分析坐标图：对比甲和乙蛋白刺激T(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有_(答出两点即可)，而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。123456789104.(2016全国乙，40)某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH酶切后，与用BamH酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得

18、到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：解析答案能自我复制、具有标记基因(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有_12345678910解析作为载体必须具备如下特点：能自我复制，从而在受体细胞中稳定保存；含标记基因，以供重组DNA的鉴定和选择；具有一个至多个限制性核酸内切酶酶切位点以便外源DNA片段插入。12345678910解析作为载体必须具备如下特点：能自12345678910(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌

19、细胞中，未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是_；并且_和_的细胞也是不能区分的，其原因是_。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有_的固体培养基。解析答案二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长含有质粒载体含有插入了目的基因的重组质粒(或答含有重组质粒)二者均含有氨芐青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长四环素12345678910(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行12345678910解析在含有氨苄青霉素的培养基上，只有具有Ampr的大肠杆菌才能够生长。而Ampr位于质粒上，故未被转化的和仅含环状目的基因的大

20、肠杆菌细胞中无Ampr，故不能在培养基中生长，而仅含有质粒载体的和含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌均具有Ampr因而能在培养基中生长。目的基因的插入破坏了质粒载体的Tetr，故含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌不能在含有四环素的平板上生长，从而与仅含有质粒载体的大肠杆菌得以区分。12345678910解析在含有氨苄青霉素的培养基上，只有12345678910(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于_。解析噬菌体是病毒，无细胞结构，无法自主合成DNA，需借助受体细胞完成DNA复制。解析答案受体细胞12345678910(3)基因工程中，某些噬菌体经

21、改造后可123456789105.(2016全国丙，40)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoR、BamH和Sau3A三种限制性核酸内切酶的识别序列与切割位点，图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoR、Sau3A的切点是唯一的)。解析答案根据基因工程的有关知识，回答下列问题：(1)经BamH酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被_酶切后的产物连接，理由是_。Sau3A两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端123456789105.(2016全国丙，40)图(a)12345678910解析由于限制性核酸内切酶Sau3A与BamH切割后形成的黏性末端相同，所以经BamH酶切割

22、得到的目的基因可以与上述表达载体被Sau3A酶切后的产物连接。12345678910解析由于限制性核酸内切酶Sau3A12345678910(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图(c)所示，这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有_，不能表达的原因是_。解析答案甲、丙 甲中目的基因插入在启动子的上游，丙中目的基因插入在终止子的下游，二者的目的基因均不能被转录 12345678910(2)若某人利用图(b)所示的表达载体12345678910解析在基因表达载体中，启动子应位于目的基因的首端，终止子应位于目的基因的尾端，这样目的基因才能表达

23、。图中甲、丙均不符合，所以不能表达目的基因的产物。12345678910解析在基因表达载体中，启动子应位于目12345678910(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有_和_，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是_。解析常见的DNA连接酶有Ecoli DNA连接酶和T4DNA连接酶，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是T4DNA连接酶。解析答案Ecoli DNA连接酶T4DNA连接酶T4DNA连接酶12345678910(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连123456789106.(2015全国，40)已知生物体内有一种蛋白质(P)，该蛋白质是一种转运蛋白，由305个

24、氨基酸组成。如果将P分子中第158位的丝氨酸变成亮氨酸，第240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质(P1)不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列问题：(1)从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的_进行改造。解析对蛋白质的氨基酸序列(或结构)进行改造，可达到改变蛋白质功能的目的。解析答案氨基酸序列(或结构)(其他答案合理也可)123456789106.(2015全国，40)已知生物12345678910(2)以P基因序列为基础，获得P1基因的途径有修饰_基因或合成_基因，所获得的基因，表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括_的复制，以及遗传信息在不同分

25、子之间的流动，即：_。解析以P基因序列为基础，获得P1基因，可以对P基因进行修饰改造，也可以用人工方法合成P1基因；中心法则的全部内容包括 ，即：DNA、RNA的复制、DNARNA、RNADNA、RNA蛋白质(或转录、逆转录、翻译)。解析答案PP1DNA和RNA(或遗传物质)DNARNA、RNADNA、RNA蛋白质(或转录、逆转录、翻译) 12345678910(2)以P基因序列为基础，获得P1基因12345678910(3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过_和_，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质

26、的生物_进行鉴定。解析蛋白质工程的基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过设计蛋白质结构和推测氨基酸序列，推测相对应的脱氧核苷酸序列，并获取基因。经表达的蛋白质，要对其进行生物功能鉴定。解析答案设计蛋白质的结构推测氨基酸序列功能12345678910(3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程12345678910题组二细胞工程7.(2016全国甲，40)下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。解析答案回答下列问题：(1)图中A表示正常细胞核，染色体数为2n，则其性染色体的组成可为_。过程表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用_的方法。代表的过程是

27、_。XX或XY显微操作(去核法)胚胎移植12345678910题组二细胞工程解析答案回答下列问题：12345678910解析提供体细胞的供体可能为雌性，也可能为雄性，因此图中A(正常体细胞核)的性染色体组成为XX或XY。常采用显微操作去核法来去除卵母细胞的细胞核。过程表示将早期胚胎移入受体，其过程为胚胎移植。12345678910解析提供体细胞的供体可能为雌性，也可12345678910(2)经过多次传代后，供体细胞中_的稳定性会降低。因此，选材时必须关注传代次数。解析取供体动物的体细胞培养，一般选用传代10代以内的细胞，因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传

28、基础。超过10代继续培养，则其遗传物质(或核型)的稳定性会降低。解析答案遗传物质12345678910(2)经过多次传代后，供体细胞中_12345678910(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是_。解析克隆动物的细胞核基因来自供体细胞，因此大部分性状与供体相同，但细胞质基因来源于受体(或提供卵母细胞的个体)，即卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响，这就决定了克隆动物的性状与供体不完全相同。解析答案卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响12345678910(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不12345678910(4)

29、与克隆羊“多利”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了_。解析克隆动物的培育采用的是核移植技术，核移植技术的原理是：已经分化的动物体细胞的细胞核具有全能性。解析答案已经分化的动物体细胞的细胞核具有全能性12345678910(4)与克隆羊“多利”培养成功一样，其123456789108.(2014新课标，40改编)某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，结果如下图所示。若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目为40条)，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞

30、(染色体数目为60条)按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。123456789108.(2014新课标，40改编)某解析据图分析可知，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗体效价几乎都达到16 000以上，小鼠Y的血清抗体的效价最高，最适合用于制备单克隆抗体。12345678910回答下列问题：(1)制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16 000以上，则小鼠最少需要经过_次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是_小鼠，理由是_。解析答案4YY小鼠的血清

31、抗体效价最高解析据图分析可知，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗体效价12345678910(2)细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交廇细胞外，可能还含有_，体系中出现多种类型细胞的原因是_。解析融合体系中除了未融合的细胞和杂交瘤细胞之外，还有骨髓瘤细胞的自身融合细胞和B淋巴细胞的自身融合细胞。细胞的融合是随机的，并且不可能所有细胞都融合，故体系中会出现多种类型的细胞。解析答案B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到100%12345678910(2)细胞融合实验完成后，融合体系中除12345678910(3)杂交瘤细胞中有_

32、个细胞核，染色体数目是_条。解析动物细胞融合后形成的是具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。杂交瘤细胞的细胞核中的染色体数目为4060100(条)。解析答案110012345678910(3)杂交瘤细胞中有_个细胞核，染色12345678910(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是_。解析正常细胞的分裂次数是有限的，且经过免疫的B淋巴细胞高度分化，不能无限增殖，经多次传代培养后逐渐衰老死亡。解析答案不能无限增殖12345678910(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养解析植物细胞细胞壁的成分是纤维素和果胶，因此可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。123456789109.

33、(2017临汾三模)亲本A为易受黑腐病菌的危害而患黑腐病的花椰菜，亲本B为具有黑腐病抗性基因的野生黑芥。用生物工程技术获得抗黑腐病杂种植株，流程如图。回答下列问题：解析答案(1)去除细胞壁而不损伤细胞可用_处理。纤维素酶和果胶酶(酶解法)解析植物细胞细胞壁的成分是纤维素和果胶，因此可用纤维素酶和12345678910(2)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其目的是_。促进原生质体融合常用的促融剂有_。融合的原生质体再生出_，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。解析适宜浓度的甘露醇可以维持原生质体的形态。诱导原生质体融合的化学试剂是聚乙二醇；融合的原生质体再生出细胞壁标志着融

34、合成功。解析答案维持原生质体的形态聚乙二醇(PEG)细胞壁12345678910(2)原生质体培养液中需要加入适宜浓度12345678910(3)融合处理后的细胞可能包含_种类型(只考虑细胞的两两融合)，其中杂种细胞的遗传物质组成是_。解析原生质体融合时，有AA、BB、AB三种类型；杂种细胞融合了前两种植物的遗传物质。解析答案3A、B植物的遗传物质之和12345678910(3)融合处理后的细胞可能包含_种12345678910(4)杂种细胞经人工诱导培养，逐渐发育成C植株。此过程应用了细胞工程的_技术。对杂种植株进行_接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。解析杂种细胞经过植物组织培养技术可以培养发育成C植株。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，若要筛选出具有获得抗黑腐病杂种植株，可对以上杂种植株分别进行黑腐病菌接种实验。如果能够抵抗黑腐病菌侵染，说明实验成功；如果不能抵抗，说明实验不成功。解析答案植物组织培养黑腐病菌12345678910(4)杂种细胞经人工诱导培养，逐渐发育1234567891010.(2017白城二模)科学家培育转乳糖分解酶基因奶牛的过程如图所示。请回答下列问题：解析答案(1)图中