玉米蛋白粉的掺假检测

1、玉米蛋白粉中掺假的鉴别看外观闻气味： 正常的玉米蛋白粉颜色黄得均匀自然，掺假的颜色常常偏呆板；正常的玉米蛋白粉气味有特殊的发酵气味，而掺假的往往气味也不正常。镜检正常的玉米蛋白粉在显微镜底下为均匀的黄白状细颗粒；而掺假的有的有发亮的晶体状物，有的有较多淡黄色粉状颗粒，有的还掺有细小的深红色细颗粒（可能是染色剂）。常规指标对玉米蛋白粉所做的常规指标包括水分、粗蛋白质、脂肪和灰分。其中灰分亦为一重要衡量指标。好的玉米蛋白粉灰分一般小于2%，超过3%的常常要多注意，有的掺假的样品灰分甚至达到10%以上，而且并不是掺石粉引起的。检查是否掺石粉用1：1的稀盐酸滴加，看是否冒气泡。检查是否掺有尿素 生黄豆

2、粉中的脲素酶能将尿素分解成氨，氨溶在水中呈碱性，加入酚红后溶液呈红色。检测方法为：将玉米蛋白粉0.5克放在25ml的比色管中，加入少量的生黄豆粉约0.2g、3至5滴酚红指示剂（1g/L），加入20ml水，迅速盖好塞子，摇动片刻，静置数分钟，若溶液变成红色，则样品中含有尿素。六、检查是否掺有脲醛聚合物6.1、变色酸变色法1、 试剂配制 变色酸（ C10H8O8S2 ）0.1 g 溶于100 ml 浓硫酸。2、检测步骤镜检时若发现小球状颜色与周围颜色不一致，用探针轻压后会散开并呈晶体状为可疑物。将可疑物夹出放置于小烧杯或培养皿。滴入变色酸，微热，变成兰紫色。则证明其含有脲醛聚合物(又称蛋白精、蛋白

3、粉)。 3、反应原理（1）、尿醛树脂聚合物在加热情况下，与浓硫酸发生反应，分解出甲醛与氨。（2）、甲醛与变色酸进一步发生反应，生成一络合物，该络合物呈兰紫色。该方法配制的变色酸易光解，不宜久存；镜检挑选较难，直接用样品检验时，样品会炭化，对显色产生干扰，较难分辨。这时可用蒸馏方法进一步确认。6.2、蒸馏方法1、原理： 脲醛聚合物在硫酸作用下水解生成甲醛，甲醛与变色酸（ C10H8O8S2 ）反应形成一种蓝紫色的化合物，而蛋白质和脂肪均不发生干扰反应。2、检测方法(1)、将可疑原料称取约4至5克入消化管中,加入100ml20%的硫酸溶液在蛋白蒸馏仪上蒸馏1至2分钟，回收馏分。(2)、在小试管中加

4、入2ml75%的硫酸溶液,加少量的变色酸，再缓慢加入上述馏分,无需摇匀.(3)、放置约1-5分钟内观察,若试管中变色酸周围呈蓝紫色,则判断为掺有脲醛聚合物；否则,无脲醛聚合物.检查是否掺有铵盐用奈斯勒试剂（定性）试剂A配制： 3.5g的碘化钾(KI)加入1.25g的氯化汞(HgCl2)加入80ml水（H2O），搅拌均匀有红棕色沉淀，加入氢氧化钠（NaOH）12g，继续搅拌至红棕色消失，定容于100ml容量瓶中。2原理：碘化钾(KI)与氯化汞(HgCl2)反应生成红棕色沉淀。 HgCl2 + 2 KI HgI2 （红棕色） + 2KCl HgI2 溶于过量的KI HgI2 + 2 KI K2Hg

5、I4加入NaOH后若有铵根离子存在的情况下可发生如下反应 NH4+HgI42-+4OH-=Hg2ONH2I （红棕色） +7I-+3H2O 3检测步骤：称取原料样品5克于100ml 烧杯中，加80ml蒸馏水，然后搅拌放置23分钟，过滤备用。吸取上述滤液35滴，放入点滴盘（或试管）中，加23滴的混合指示剂A液。若样品中含有铵盐，溶液会出现红棕色沉淀，可观察沉淀的量，来判断铵盐的含量。检查是否掺有加入染色剂的有机氮将25g的玉米蛋白粉放入100ml小烧杯中，加入1：3的盐酸溶液10至20ml搅拌，如掺有经过染色后的有机氮，其混合液会变色，多数为浅红色，用滤纸过滤后干燥滤上物可见细小的粉红色小颗粒。

6、变红的混合液再加入40%的NaOH溶液，浅红色会恢复到浅黄色。九、快速测定叶黄素参考法 经验上来说，玉米蛋白粉颜色越黄叶黄素含量越高。一般正常玉米蛋白其叶黄素含量至少在150mg/kg以上，如果其含量低于120mg/kg，则要考虑有掺假。1、原理样品经有机溶剂，提取其中叶黄素定容，并在474nm波长下测定其吸光值，可推算出样品中叶黄素的含量。2、试剂： - 丙酮 分析纯 - 正已烷 分析纯 - 提取剂 正已烷：丙酮：无水乙醇：甲苯(10：7：6：7) - 甲苯 分析纯 - 40%氢氧化钾甲醇溶液：40gKOH溶解在100ml 甲醇中。 - 10% Na2SO4 水溶液（W/V）：100g无水N

7、a2SO4溶解在1000ml 水中。 - 苏丹I(分析纯的乙醇再结晶的标准品) 操作方法：1、粉碎样品过40目筛。 2、称取一定量的样品 （CGM 1g ，玉米、饲料成品3g，黄晶香0.1g）放入100ml棕色容量瓶中。 3、加入30ml提取剂，摇动约一分钟，加入2ml40%氢氧化钾甲醇溶液并摇动一分钟。 4、加上冷凝管(2mm*50cm的玻璃管)或直接用胶塞塞住，放进56水浴锅中加热20分钟。然后移入暗处放置一小时 (或冷皂化放置暗处过夜) 。 5、 加入30ml正已烷，摇动一分钟，再用10%硫酸钠水溶液定容，剧烈摇动一分钟后放入暗处一小时。 6、 取10ml上清液于100ml容量瓶中用正已

8、烷定容，晃匀。(叶黄素含量低的定容50ml或省去该步骤)。 7、 用正已烷做空白，于474nm处测定吸光度。 4、苏丹I标准工作液(0.04M)的制备：苏丹I标准品（用无水乙醇再次结晶的苏丹I）：称取8克的苏丹I，加300ml无水乙醇75完全溶解。真空过滤，除去杂质。冷却结晶，再次过滤。70烘箱中烘至恒重。苏丹I贮备液(1.0毫摩尔)：将苏丹I标准品0.1241g溶解于500ml丙酮异丙醇溶液(1+1)中，避光贮存。苏丹I标准工作液(0.04M)：吸取2ml贮备液，以丙酮异丙醇溶液(1+1)稀释至50ml，贮于暗处。 4、以苏丹I标准工作液测出仪器校正系数f(仪器偏差因素) f = 0.561/A474(苏丹I标准工作液吸光度) f=0.981.02之间 5、结果计算： 全叶黄素（mg/kg） = (A474*f*1000)/(236*b*d)