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文档简介
1、关于核酸的合成 (3)第一张,PPT共九十三页,创作于2022年6月RNA的生物合成第二节第二张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第三张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第四张,PPT共九十三页,创作于2022年6月概 念转录的不对称性:在RNA的合成中,DNA的二条链中仅有一条链可作为转录的模板,即转录的不对称性。反义链(antisense strand)及模板链(template strand) (无意义链,负链):在RNA的转录中,用作模板的DNA链。有意义链(sense strand)及编码链(coding strand) 或正链:在RNA的转录中,不作为模板的DNA链。第
2、五张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第六张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第七张,PPT共九十三页,创作于2022年6月RNA聚合酶:大肠杆菌的RNA聚合酶全酶由5种亚基2 组成,因子与其它部分的结合不是十分紧密,它易于与2分离,没有、 亚基的酶称为核心酶只催化链的延长,对起始无作用。一、 RNA聚合酶1.第八张,PPT共九十三页,创作于2022年6月行使多个功能寻找起始位点选择NTP检测终止信号第九张,PPT共九十三页,创作于2022年6月 五种亚基的功能分别为: 亚基:与启动子结合功能。 亚基:含催化部位,起催化作用,催化形成磷酸二酯键。 亚基:在全酶中存在,功能不清楚。
3、亚基:与DNA模板结合功能。 亚基:识别起始位点。 第十张,PPT共九十三页,创作于2022年6月全酶核心酶第十一张,PPT共九十三页,创作于2022年6月2.第十二张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第十三张,PPT共九十三页,创作于2022年6月 真核细胞的RNA聚合酶酶类分布产物-鹅膏蕈碱对酶的作用分子量反应条件I核仁核质核质rRNA5.8SrRNA18SrRNA28SrRNAmRNAtRNA 5SrRNA不抑制低浓度抑制高浓度抑制500 000700 000700 000_低离子强度,要求Mg2+或Mn2+高离子强度高Mn2+浓度3.第十四张,PPT共九十三页,创作于2022年6
4、月第十五张,PPT共九十三页,创作于2022年6月RNA聚合酶的特点: 反应底物-NTP,DNA为模板、Mg2+促进聚合反应。RNA聚合酶不需要引物,合成方向53 。4.第十六张,PPT共九十三页,创作于2022年6月RNA的转录过程:(以大肠杆菌为例) 起始位点的识别 转录起始 链的延伸 转录终止二、RNA的转录过程第十七张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第十八张,PPT共九十三页,创作于2022年6月1、起始位点的识别 体外实验证明,不含亚基的核心酶会随机地在一个基因的两条链上启动,当有亚基时就会选择正确的起点。 亚基起着识别DNA分子上的起始信号(启动子指RNA聚合酶识别、结合和
5、开始转录的一段DNA序列)的作用。第十九张,PPT共九十三页,创作于2022年6月起点启动子区第二十张,PPT共九十三页,创作于2022年6月启动子区序列特征起点第二十一张,PPT共九十三页,创作于2022年6月识别起点第二十二张,PPT共九十三页,创作于2022年6月启动子的结构至少由三部分组成:AACTGTATATTATTGACATATAAT+1转录起始点5335 35序列 10序列-35序列提供了RNA聚合酶全酶识别的信号-10序列是酶的紧密结合位点(富含AT碱基,利于双链打开)第三部分是RNA合成的起始点第二十三张,PPT共九十三页,创作于2022年6月同感保守序列第二十四张,PPT共
6、九十三页,创作于2022年6月启动子第二十五张,PPT共九十三页,创作于2022年6月启动子起点第二十六张,PPT共九十三页,创作于2022年6月2、转录起始 RNA聚合酶全酶扫描解链区,找到起始点,然后结合第一个核苷三磷酸。加入的第一个核苷三磷酸常是GTP或ATP,很少是CTP,不用UTP。所形成的启动子、全酶和核苷三磷酸复合物称为三元起始复合物,第一个核苷三磷酸一旦掺入到转录起始点, 亚基就会被释放脱离核心酶。第二十七张,PPT共九十三页,创作于2022年6月因子仅与起始有关,RNA的合成一旦开始,便被释放E-35-10pppG或pppA5533模板链(1)原核生物RNA聚合酶第二十八张,
7、PPT共九十三页,创作于2022年6月RNA聚合酶第一个核苷三磷酸常是GTP或ATP第二十九张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第三十张,PPT共九十三页,创作于2022年6月RNA聚合酶因子GTP或ATP第三十一张,PPT共九十三页,创作于2022年6月(2)第三十二张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第三十三张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第三十四张,PPT共九十三页,创作于2022年6月Pol第三十五张,PPT共九十三页,创作于2022年6月Pol所需的蛋白因子第三十六张,PPT共九十三页,创作于2022年6月结合蛋白第三十七张,PPT共九十三页,创作于2022年6
8、月3、RNA链的延伸 DNA分子和酶分子发生构象的变化,核心酶与DNA结合比较松弛,可沿DNA模板移动,并按模板顺序选择下一个核苷酸,将核苷三磷酸加到生长的RNA链的3-OH端,催化形成磷酸二酯键。转录延伸方向从53第三十八张,PPT共九十三页,创作于2022年6月核心酶GTP或ATP第三十九张,PPT共九十三页,创作于2022年6月核心酶第四十张,PPT共九十三页,创作于2022年6月核心酶RNA第四十一张,PPT共九十三页,创作于2022年6月延伸第四十二张,PPT共九十三页,创作于2022年6月4、转录终止 在DNA分子上(基因末端)提供转录停止信号的DNA序列称为终止子(termina
9、tors),它能使RNA聚合酶停止合成RNA并释放出RNA。 第四十三张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第四十四张,PPT共九十三页,创作于2022年6月需要因子,因子能与RNA聚合酶结合但不是酶的组分,它的作用是阻止RNA聚合酶向前移动,于是转录终止,并释放出已转录完成的RNA链。不依赖于因子。强终止子序列有两个明显的特征:( 1 )在终止点之前具有一段富含G-C的回文区域。(2)富含G-C的区域之后是一连串的dA碱基序列,它们转录的RNA链的末端为一连串U(连续6个)。弱终止子:缺少回文结构强终止子:有回文结构第四十五张,PPT共九十三页,创作于2022年6月依赖因子的终止因子第四
10、十六张,PPT共九十三页,创作于2022年6月因子参与的RNA合成终止第四十七张,PPT共九十三页,创作于2022年6月发夹式结构和寡聚U的共同作用使RNA从三元复合物中解离出来。第四十八张,PPT共九十三页,创作于2022年6月小 结第四十九张,PPT共九十三页,创作于2022年6月三、RNA的复制1第五十张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第五十一张,PPT共九十三页,创作于2022年6月2第五十二张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第五十三张,PPT共九十三页,创作于2022年6月两个阶段(1)其单链RNA可充当mRNA,利用寄主中的核糖体合成外壳蛋白和复制酶的亚基。(2)复
11、制酶的亚基可与来自寄主细胞的亚基自动装配成RNA复制酶,可进行RNA的复制. 3 RNA的复制第五十四张,PPT共九十三页,创作于2022年6月 5 RNA-5 3 3 RNA+释放释放35 3 3 5 5 RNA+RNA+RNA-RNA的复制第五十五张,PPT共九十三页,创作于2022年6月 四、RNA的转录后加工 在细胞内,由RNA聚合酶合成的原初转录物(primary transcript)往往需要一系列的变化,包括链的裂解、5和3末端的切除和特殊结构的形成、核苷的修饰、以及拼接和编辑等过程,才转变为成熟的RNA分子。此过程总称为RNA的成熟或称为RNA的转录后加工。第五十六张,PPT共
12、九十三页,创作于2022年6月加上特殊序列第五十七张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第五十八张,PPT共九十三页,创作于2022年6月1、mRNA前体的加工: 原核生物的mRNA转录后一般不需要加工,转录的同时即进行翻译(半寿期短)。 真核生物mRNA(半寿期较长)原初转录物很大,在加工过程中形成许多分子大小不等的中间物,它们被称为核内不均一RNA(heterogeneous nuclear RNA, hnRNA)第五十九张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第六十张,PPT共九十三页,创作于2022年6月加工包括:(1)hnRNA被剪接,把内含子(DNA上非编码序列)转录序列剪掉
13、,把外显子(DNA上的编码序列)转录序列拼接上(真核生物一般为不连续基因)。(2)3端添加polyA “尾巴”;(3)5端连接“帽子”结构(m7G5ppp5NmpNp-);(4)分子内部的核苷酸甲基化修饰。第六十一张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第六十二张,PPT共九十三页,创作于2022年6月【例】剪切内含子卵清蛋白第六十三张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第六十四张,PPT共九十三页,创作于2022年6月10-30nt切除加尾巴加尾巴AAUAAA第六十五张,PPT共九十三页,创作于2022年6月平均半衰期第六十六张,PPT共九十三页,创作于2022年6月 2、tRNA前体
14、的加工:原核与真核生物的tRNA转录后都需要加工。包括:(1)内切酶切除前体上3和5端上多余的核苷酸;(2)外切酶逐个在3切去附加序列,进行修剪。(3)3端添加CCAOH序列,由核苷酰转移酶催化。 (4)核苷的一些特定的碱基和戊糖进行修饰。第六十七张,PPT共九十三页,创作于2022年6月酵母酪氨酸tRNA前体的加工早转录本成熟tRNA加工第六十八张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第六十九张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第七十张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第七十一张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第七十二张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第七十三张
15、,PPT共九十三页,创作于2022年6月tRNA加工过程第七十四张,PPT共九十三页,创作于2022年6月P16P23P516S23S5S(一般不含甲基化)28S18S5.8S3、 rRNA前体的加工:45S或38S37S26S17S5.8SrRNA原初转录物研究四膜虫rRNA前体的拼接时发现 ribozyme原核:刚转录的rRNA为30S,先在特定的碱基上进行甲基化(核糖2-羟基)修饰,后逐步裂解(核酸酶的切割)。真核:45S(哺乳动物)、38S(果蝇)、37S(酵母)第七十五张,PPT共九十三页,创作于2022年6月原核生物中rRNA前体的加工甲基化作用专一核酸内切酶30S前体17StRN
16、A25S专一核酸外切酶16S rRNAtRNA23S rRNA5S rRNA专一核酸外切酶第七十六张,PPT共九十三页,创作于2022年6月真核生物rRNA前体加工45s第七十七张,PPT共九十三页,创作于2022年6月五、第七十八张,PPT共九十三页,创作于2022年6月第七十九张,PPT共九十三页,创作于2022年6月吖啶/10-N杂蒽/苯并吡啶第八十张,PPT共九十三页,创作于2022年6月END第八十一张,PPT共九十三页,创作于2022年6月问答题 1、比较DNA复制与RNA转录的异同。 2、比较DNA聚合酶与RNA聚合酶催化作用的异同。3、DNA复制的高度准确性是通过什么来实现的?
17、4、肽链合成后的加工处理主要有哪些方式?5、何谓基因工程?简述其基本理论、基本过程及应用价值名词解释中心法则 半保留复制 转录 反转录翻译有意义链反意义链内含子外显子冈崎片段 突变 第八十二张,PPT共九十三页,创作于2022年6月1、下列有关TATA盒(Hognessbox)的叙述,哪个是正确的: A.它位于第一个结构基因处B.它和RNA聚合酶结合C.它编码阻遏蛋白D.它和反密码子结合 B 第八十三张,PPT共九十三页,创作于2022年6月 2. 转录需要的原料是: dNTPB. dNDP C. dNMP D. NTP E . NMPD第八十四张,PPT共九十三页,创作于2022年6月3、D
18、NA模板链为 5-ATTCAG-3 , 其转录产物是: A. 5 -GACTTA-3 B. 5 -CTGAAT-3 C. 5 -UAAGUC-3 D. 5 -CUGAAU-3 D第八十五张,PPT共九十三页,创作于2022年6月4、 DNA复制和转录过程有许多相同点,下列描述哪项是错误的? A.转录以DNA一条链为模板,而以DNA两条链为模板进行复制 B. 在这两个过程中合成均为5-3方向 C. 复制的产物通常情况下大于转录的产物 D. 两过程均需RNA引物 D第八十六张,PPT共九十三页,创作于2022年6月 5、真核生物的mRNA加工过程中,5端加上( ),在3端加上( ),后者由( )催化。如果被转录基因是不连续的,那么,( )一定要被切除,并通过( )过程将( )连接在一起。帽子结构、多聚腺苷酸尾巴、poly(A)聚合酶、内含子、拼接、外显子第八十七张,PPT共九十三页,创作于2022年6月6、10位的( )区和35位的( )区是RNA聚合酶与启动子的结合位点,能与因子相互识别而具有很高的亲和力。 TATA、TTGACA第八十八张,PPT共九十三页,创作于2022年6月7、原核生物 RNA 聚合酶核心酶由( )组成,全酶由 ( )组成。2、2第八十九张,PPT共九十三页,创作于2022年6月8、下面那一项不属于原核生物mRNA的特征( ) A:半衰期短 B:存在多顺反
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