高中生物选修一生物技术实践知识点归纳总结

1、高中生物选修一生物技术实践学问点总结专题一传统发酵技术的应用课题一果酒和果醋的制作1,发酵：通过微生物技术的培养来生产大量代谢产物的过程；2,有氧发酵：醋酸发酵 谷氨酸发酵无氧发酵：酒精发酵 乳酸发酵3,酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌酵母菌的生殖方式：出芽生殖主要 分裂生殖 孢子生殖4,在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大量 繁殖；C6H12O66O26H2O 6CO212H2O+能量5,在无氧条件下,酵母菌能进行 酒精发酵；C6H12O6 2C2H5OH2CO2+能量6,20 左右最适宜酵母菌繁殖 酒精发酵时一般将温度把握在 18 -25 7,在葡萄酒自然发酵的过程中 , 起主要作用的是附着

2、在葡萄皮表面的 野生型酵母菌. 在发酵过程中, 随着酒精浓度的提高 , 红葡萄皮的色素也进入发酵液 , 使葡萄酒显现深红色 . 在缺氧 呈酸性的发酵液中,酵母菌可以生长繁殖,而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约；8,醋酸菌是单细胞细菌 原核生物,代谢类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂9,当氧气,糖源都充分时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸；C6H12O62O22CH3COOH2CO22H2O C2H5OHO2CH3COOHH2O 10,把握发酵条件的作用醋酸菌对氧气的含量特殊敏捷,当进行深层发酵时,即使只是短时间中断通入氧气,

3、也会引起醋酸菌死亡；醋酸菌最适生长温度为32 ,把握好发酵温度,使发酵时间缩短,又削减杂菌污染的机会；有两条途径生成醋酸：直接氧化和以酒精为底物的氧化；11,试验流程：挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵果酒（醋酸发酵果醋）12,酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生,可以用重铬酸钾来检验；在酸性条件下,重铬酸钾与酒精反应显现灰绿色；先在试管中加入发酵液2L,再滴入物质的量浓度为3mol/L的H2SO43滴,振荡混匀,最终滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3 滴,振荡试管,观看颜色13,充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒 精发酵时用来排出二氧化碳的；出料口是用来取样的；排气口要通过一个长而弯曲

4、的胶管与瓶身相连接,其目的是防止空气中微生物的污染；开口向下的目的是有利于二氧化碳的排出；使用该装置制酒时,应当关闭充气口；制醋时,应当充气口连接气泵,输入氧气；疑难解答（1）你认为应当先冲洗葡萄仍是先除去枝梗？为什么？应当先冲洗,然后再除去枝梗,以防止除去枝梗时引起葡萄破旧,增加被杂菌污染的机会；（2）你认为应当从哪些方面防止发酵液被污染？如：要先冲洗葡萄,再除去枝梗；榨汁机,发酵装置要清洗干净,并进行酒精消毒；每次排气时只需拧松瓶盖,不要完全掀开瓶盖等；（3）制葡萄酒时,为什么要将温度把握在1825 ？制葡萄醋时,为什么要将温度把握在1第 1 页,共 20 页3035？温度是酵母菌生长和发

5、酵的重要条件；20左右最适合酵母菌的繁殖；因此需要将温度把握在其最适温度范畴内；而醋酸菌是嗜温菌,最适生长温度为32,因此要将温度把握在3035；课题二腐乳的制作1,多种微生物参与了豆腐的发酵,如青霉,酵母,曲霉,毛霉等,其中起主要作用的是毛霉；毛霉是一种丝状真菌；代谢类型是异养需氧型；生殖方式是孢子生殖；营腐生生活；2,原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸；3,试验流程：让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制 4,酿造腐乳的主要生产工序是将豆腐进行前期发酵和后期发酵；前期发酵的主要作用：1. 制造条件让毛霉生长；2.

6、使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型；后期发酵主要是酶与微生物协同参与生化反应的过程；通过各种辅料与酶的缓解作用,生成腐乳的香气；5,将豆腐切成3cm3cm1cm 的如干块；所用豆腐的含水量为70左右,水分过多就腐乳不易成形；* 水分测定方法如下：精确称取经研钵研磨成糊状的样品510g精确到0.02mg ,置于已知重量的蒸发皿中,均匀摊平后,在 100105电热干燥箱内干燥 4h,取出后置于干燥器内冷却至室温后称重,然后再烘 30min ,直至所称重量不变为止；样品水分含量（%）运算公式如下： 烘干前容器和样品质量-烘干后容器和样品质量 / 烘干前样品质量毛霉的生长：条件 : 将豆腐块平放在笼屉内

7、,将笼屉中的把握在 1518,并保持确定的湿度；来源：1. 来自空气中的毛霉孢子 时间：5 天,2. 直接接种优良毛霉菌种加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中,同时逐层加盐,随着层数的加高而增加 盐量,接近瓶口表面的盐要铺厚一些；加盐腌制的时间约为 8 天左右；用盐腌制时,留意把握盐的用量：盐的浓度过低,不足以抑制微生物的生长,可能导致豆腐腐败 变质；盐的浓度过高会影响腐乳的口味食盐的作用：1. 抑制微生物的生长,防止腐败变质2. 析出水分,使豆腐变硬,在后期制作过程中不易酥烂3. 调味作用,给腐乳以必要的咸味4. 浸提毛酶菌丝上的蛋白酶；配制卤汤：卤汤直接关系到腐乳的色,香,味；

8、卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的；卤汤中酒的含量一般把握在 12%左右； 酒的作用：1. 防止杂菌污染以防腐 2. 与有机酸结合形成酯,赐予腐乳风味 3. 酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系,酒精含量越高,对蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延长；酒精含量过低,蛋白酶的活性高,加快蛋白质的水解,杂菌繁殖快,豆腐易腐败,难以成块；香辛料的作用：1. 调味作用2. 杀菌防腐作用3. 参与并促进发酵过程防止杂菌污染：用来腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干净后要用沸水消毒；装瓶时,操作要快速小心；整齐地摆放好豆腐,加入卤汤后,要用胶条将瓶口密封；焰,防止瓶口被污染；2封瓶时,最好将瓶口通过酒精灯

9、的火第 2 页,共 20 页疑难解答（1）利用所学的生物学学问,说明豆腐长白毛是怎么一回事？豆腐生长的白毛是毛霉的白色菌丝；严格地说是 直立菌丝,在豆腐中仍有匍匐菌丝；（2）为什么要撒许多盐,将长毛的豆腐腌起来？盐能防止杂菌污染,防止豆腐腐败；（3）我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳？含水量为70%左右的豆腐适于作腐乳；用含水量高的豆腐制作腐乳,不易成形；（4）吃腐乳时,你会发觉腐乳外部有一层致密的“皮”；这层“皮”是怎样形成的呢？它对 人体有害吗？它的作用是什么？ “皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝）,对人 体无害；它能形成腐乳的“体”,使腐乳成形；课题三制作泡菜制作泡菜所

10、用微生物是乳酸菌,其代谢类型是异养厌氧型；在无氧条件下,将糖分解为乳酸分裂方式是二分裂；反应式为：C6H12 O6酶2C 3H6O3+能量含抗生素牛奶不能生产酸奶的原因是抗生素杀死乳酸菌；常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌；乳酸杆菌常用于生产酸奶；亚硝酸盐为白色粉末,易溶于水,在食品生产中用作食品添加剂；膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康,国家规定肉制品中不超过30mg/kg ,酱腌菜中不超过20mg/kg ,婴儿奶粉中不超过 2mg/kg ；亚硝酸盐被吸取后随尿液排出体外,但在适宜 pH ,温度和确定微生物作用下形成致癌物质 亚硝胺；亚一般在腌制 10 天后亚硝酸盐含量开头降低,故在 10

11、 天之后食用最好硝 测定亚硝酸盐含量的方法是：比色法酸 原理是在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对基苯磺酸发生重氮化反应盐后,与 N-1- 萘基乙二胺盐酸盐 结合形成玫瑰红色染料,与已知浓含量 度的标准显色液目测比较,估算泡菜中亚硝酸盐含量；发酵时间（d）专题二 微生物的培养与应用课题一 微生物的试验室培养 培养基：人们依据微生物对养分物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的养分基质,是进行微生物培养的物质基础；培养基依据物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基；在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖,在配制培养基中用作凝固剂）后,制成琼脂固体培养基；微生物在固体培养基表面生长,

12、可以形成肉眼可见的菌落；依据菌落的特点可以判定是哪一种菌；液体培养基应用于工业或生活生产,固体培养基应用于微生物的分别和鉴定,半固体培养基就常用于3第 3 页,共 20 页观看微生物的运动及菌种保藏等；依据成分培养基可分为 人工合成培养基和自然培养基；合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成,其中成分的种类比例明确,常用于微生物的分别鉴定；物质配制而成,常用于实际工业生产；自然培养基是用化学成分不明的自然依据培养基的 用途,可将培养基分为 挑选培养基和鉴定培养基；挑选培养基是指在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物生长,促进所需要的微生物的生长；鉴别培养基是依据微生物的特点,在培养基

13、中加入某种指示剂或化学药品配制而成的,用以鉴别不同类别的微生物；培养基的化学成分包括 水,无机盐,碳源,氮源（生长因子）等；碳源：能为微生物的代谢供应碳元素的物质；如CO2,NaHCO 3等无机碳源；糖类,石油,花生粉饼等有机碳源；异养微生物只能利用有机碳源；单质碳不能作为碳源；氮源：能为微生物的代谢供应氮元素的物质；如-+ N2,NH3,NO3,NH4（无机氮源）蛋白质,氨基酸,尿素,牛肉膏,蛋白胨（有机氮源）等；只有固氮微生物才能利用 N2；培养基仍要中意微生物生长对 PH,特殊养分物质以及氧气的要求；例如,培养 乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素,培养霉菌时须将培养基的pH 调至酸性,培

14、养细菌是需要将pH 调至中性或微碱性,培养厌氧型微生物是就需要供应无氧的条件 无菌技术获得纯洁培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,要留意以下几个方面：对试验操作的空间,操作者的衣着和手,进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿,接种用具和培养基等器具进行灭菌；为防止四周环境中微生物的污染,试验操作应在酒精灯火焰邻近进行；试验操作时应防止已经灭菌处理的材料用具与四周的物品相接触；无菌技术除了用来防止试验室的培养物被其他外来微生物污染外,仍有什么目的？答：无菌技术仍能有效防止操作者自身被微生物感染；消毒与灭菌的区分消毒指使用较为温存的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽

15、孢和孢子）；消毒方法常用 煮沸消毒法,巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）仍有 化学药剂（如酒精,氯气,石炭酸等）消毒,紫外线消毒；灭菌就是指使用猛烈的理化因素杀死物体内外全部的微生物,包括芽孢和孢子；灭菌方法有 灼烧灭菌,干热灭菌,高压蒸汽灭菌；灭菌方法：接种环,接种针,试管口等使用灼烧灭菌法；玻璃器皿,金属用具等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱；培养基,无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅；表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯；比较项 理化因素的作用强度 毁灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被毁灭消毒 较为温存 部分生活状态的微生物 不能灭菌 猛烈 全部微

16、生物 能4第 4 页,共 20 页制作牛肉膏蛋白胨固体培养基（1）方法步骤：运算,称量,溶化,灭菌,倒平板；（2）倒平板操作的步骤：将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶,将瓶口快速通过火焰；用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基（约 1020mL）倒入培养皿,左手马上盖上培养皿的皿盖；等待平板冷却凝固,大约需 在上；倒平板操作的争辩510min ；然后,将平板倒过来放置,使培养皿盖在下,皿底1.培养基灭菌后,需要冷却到 50 左右时,才能用来倒平板；你用什么方法来估量培养基的温度？提示：可以用手触摸盛有培养

17、基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚 不烫手时,就可以进行倒平板了；2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答：通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基；3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置？答：平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,将平板倒置,既可以防止培养基表面的水分过度地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染；4.在倒平板的过程中,假如不当心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板仍能用来培养微生物吗？为什么？答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物；纯化大肠杆菌（1）微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法；（2）平板划线法是

18、通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作；将集合的菌种 逐步稀释分散到培养基的表面；在数次划线后培养,可以分别到由 这就是菌落；一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养；分为系列（4）用平板划线法和稀释涂布平板法接种的稀释操作和涂布平板操作两步；目的是：使集合在一起的微生物分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落,以便于纯化菌种；（5）平板划线法操作步骤：将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红；在火焰旁冷却接种环,并打开棉塞；将试管口通过火焰；将已冷却的接种环伸入菌液中蘸

19、取一环菌液；将试管通过火焰,并塞上棉塞；左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接种环快速 伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖；留意不要划破培养皿；灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线的末端开头往其次区域内划线；重复以上操作,在三,四,五区域内划线；留意不 要将最终一区的划线与第一区相连；将平板倒置放入培养箱中培养；5第 5 页,共 20 页平板划线操作的争辩1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作终止时,仍然需要灼 烧接种环吗？为什么？答：操作的第一步灼烧接种环是为了防止接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线终止后,接种环上

20、残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐步削减,以便得到菌落；划线终止后灼烧接种环,能准时杀死接种环上残留的菌种,防止细菌污染环境和感染操作者；2.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线？答：以免接种环温度太高,杀死菌种；3.在作其次次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开头划线？答：划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开头,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步削减,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落；（6）涂布平板操作的步骤：将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中；取少量菌

21、液,滴加到培养基表面；将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却 810s；用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面；涂布平板操作的争辩涂布平板的全部操作都应在火焰邻近进行；结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,第2 步应如何进行无菌操作？提示：应从操作的各个细节保证“无菌 ”；例如,酒精灯与培养皿的距离要合适,吸管头不要接触任何其他物体,吸管要在酒精灯火焰四周；等等；菌种的储存（1）对于频繁使用的菌种,可以接受 临时保藏的方法；临时保藏方法 将菌种接种到试管的固体斜面培养基上,在合适的温度下培养；当菌落长成后,将试管放入 4 的冰箱中保藏；以后每 36 个月,都要重新将菌种从

22、旧的培养基上转移到新颖的培养基上；缺点：这种方法储存的时间不长,菌种简洁被污染或产生变异；（2）对于需要长期储存的菌种,可以接受 甘油管藏的方法；在3mL 的甘油瓶中,装 1mL 甘油后灭菌；入 将匀后,放在20 的冷冻箱中储存；疑难解答（1）生物的养分1mL 培养的菌液转移到甘油瓶中,与甘油充分 混养分是指生物摄取,利用养分物质的过程；养分物质是指保护机体生命活动,保证发育,生殖 所需的外源物质；人及动物的养分物质：水,无机盐,糖类,脂质,蛋白质,维生素六类；植物的养分物质：矿质元素,水,二氧化碳等三类；微生物的养分物质：水,无机盐,碳源,氮源及特殊养分物质五类；6第 6 页,共 20 页（

23、2）确定培养基制作是否合格的方法将未接种的培养基在恒温箱中保温 需要重新制备；12 天,无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否就课题二土壤中分解尿素的细菌的分别与计数 尿素 是一种重要的农业氮肥,尿素并不能直接被农作物吸取；只有当土壤中的细菌将尿 素分解成氨之后,才能被植物利用；土壤中的细菌之所以能分解尿素,是由于他们能合成 脲酶尿素最初是从人的尿液中发觉的挑选菌株（1）试验室中微生物的挑选应用的原理人为供应有利于目的菌株生长的条件（包括养分,温度,物生长；（2）挑选性培养基pH 等）,同时抑制或阻挡其他微生在微生物学中,将答应特定种类的微生物生长,同时抑制或阻挡其他种类微生物生长的培养基,

24、称作挑选培养基；（3）配制挑选培养基的依据依据挑选培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到挑选的目的；例如,培养基中不加入有机物可以挑选培养自养微生物；培养基中不加入氮元素,可以挑选培养能固氮的微生物；加入高浓度的食盐可挑选培养金黄色葡萄球菌等；统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数；（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌；通过统计平板上的菌落数,就能估量出样品中大约含有多少活细菌；为了保证结果精确,一般设置35 个平板,挑选菌落数在30300 的平板进行计数,并取平均值

25、；统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,因此,统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示；接受此方法的留意事项：1.一般选取菌落数在 30300 之间的平板进行计数2.为了防止菌落扩散,影响计数,可在培养基中加入 TTC （在计数琼脂中加入适量的 TTC0.5% TTC 1ML 加到100ML 琼脂中,细菌菌落长成红颜色 ,对去除食品本底颗粒物干扰特殊有意义）. 3.本法仅限于形成菌落的微生物设置对比设置对比的主要目的是排除试验组中非测试因素对试验结果的影响,提高试验结果的可信度；对比试验是指除了被测试的条件以外,其他条件都相同的试验,其作用是比照试验组,排除任何其他可能缘由的干扰,证明的确是所测试

26、的条件引起相应的结果；7第 7 页,共 20 页试验设计 试验设计包括试验方案,所需仪器,材料,用具和药品,具体的实施步骤以准时间支配等的综 合考虑和支配；（1）土壤取样：同其他生物环境相比,土壤中的微生物,数量最大,种类最多；在富含有机质的土壤表层,有更多的微生物生长；从富含有机物,潮湿,地表约38cm 的土壤层取样；pH 7 的土壤中取样；铲去表层土,在距（2）样品的稀释：样品的稀释程度将直接影响平板上生长的菌落数目；在实际操作中,通常选用确定稀释范畴的样品液进行培养,以保证获得菌落数在30300 之间,适于计数的平板；测定土壤中细菌的数量,一般选用31045 10 106测定放线菌的数量

27、,一般选用10104105测定真菌的数量,一般选用102103104（3）微生物的培养与观看不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和培养时间；放线菌2528 57 天霉菌2528 34 天细菌3037 12 天每隔24 小时统计一次菌落数目,选取菌落数目稳固时的记录作为结果,这样可以防止因培养时间 不足而导致一楼菌落的数目；一般来说,在确定的培养条件下（相同的培养基,温度及培养时间）,同种微生物表现出稳固的菌落特点；形状,大小,隆起程度,颜色疑难解答（1）如何从平板上的菌落数估量出每克样品中的菌落数？统计某一稀释度下平板上的菌落数,最好能统计3 个平板,运算出平板菌落数的平均值每克样品中的菌

28、落数=（C/V ）*M 其中,C 代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V 代表涂布平板时所用的稀释液的体积（ml ）,M 代表稀释倍数课题三分解纤维素的微生物的分别纤维素,一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物,是地球上含量最丰富的多糖类物质；纤维素与纤维素酶（1）棉花是自然界中纤维素含量最高的自然产物,木材,作物秸秆等也富含纤维素；（2）纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1 酶,CX 酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成 纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖；纤维素最终被水解成葡萄糖,为微生物的生长供应养分；纤维素分解菌的挑选（1）挑选方法：刚果红染色法；能够通

29、过颜色反应直接对微生物进行挑选；（2）刚果红染色法挑选纤维素分解菌的原理刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应；当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基8第 8 页,共 20 页中的纤维素形成红色复合物；当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红纤维素的复合物就无法形成,培养基中会显现以纤维素分解菌为中心的透亮圈；这样,我们就可以通过是否产生透亮圈来挑选纤维素分解菌；分别分解纤维素的微生物的试验流程土壤取样 挑选培养（此步是否需要,应依据样品中目的菌株数量的多少来确定） 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基

30、上挑选产生透亮圈的菌落（1）土壤采集 挑选富含纤维素的环境；（2）刚果红染色法分别纤维素分解菌的步骤（3）刚果红染色法种类倒平板操作,制备菌悬液,涂布平板一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,另一种是在倒平板时就加入刚果红；课题延长对分解纤维素的微生物进行了初步的挑选后,只是分别纯化的第一步,为确定得到的是纤维素分解菌,仍需要进行发酵产纤维素酶的试验,纤维素酶的发酵方法有 液体发酵和固体发酵两种；纤 维素酶的测定方法,一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定；疑难解答（1）为什么要在富含纤维素的环境中查找纤维素分解菌？由于生物与环境的相互依存关系,在富含纤维素的环

31、境中,纤维素分解菌的含量相对提高,因 此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于一般环境；（2）将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应当埋进土壤多深？将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集合,实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境；一般应将纸埋于深约 10cm 左右腐殖土壤中；（3）两种刚果红染色法的比较 方法一是传统的方法,缺点是操作繁琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这 样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用；方法二的优点是操作简便,不存在菌落混杂问 题,缺点是由于纤维素和琼脂,土豆汁中都含有淀粉类物质,可以使能够产生淀粉酶的微生物显现 假阳性反应；但这种只产生淀粉

32、酶的微生物产生的透亮圈较为模糊,由于培养基中纤维素占主要地 位,因此可以与纤维素酶产生的透亮圈相区分；方法二的另一缺点是：有些微生物具有降解色素的 才能,它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成明显的透亮圈,与纤维素分解菌不易区分；（4）为什么挑选培养能够“浓缩”所需的微生物？在挑选培养的条件下,可以使那些能够适应这种养分条件的微生物得到快速繁殖,而那些不适应这种养分条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“浓缩”的作用；专题三植物的组织培养技术 课题一菊花的组织培养9第 9 页,共 20 页植物组织培养的基本过程细胞分化：在生物个体发育过程中,细胞在形状,结构和生理功能上显现稳固性差异的过程；离

33、体的植物组织或细胞,在培养了一段时间以后,会通过细胞分裂,形成愈伤组织,愈伤组织的细 胞排列疏松而无规章,是一种高度液泡化的呈无定形状状的薄壁细胞；由高度分化的植物组织或细 胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化,或者叫做去分化；脱分化产生的愈伤组织连续进 行培养,又可以重新分化成根或芽等器官,这个过程叫做再分化；再分化形成的试管苗,移栽到地 里,可以发育成完整的植物体；植物细胞工程具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞,都具有发育成 完整个体的才能,即每个生物细胞都 具有全能性；但在生物体的生长发育过程中并不表现出来,这是由于在 特定的时间和空间 条件下,通过基因的挑选性表达,构成不同

34、组织和器官；植物组织培养技术的应用有：实现优良品种的 新品种以及细胞产物的工厂化生产等；快速繁殖；培养脱毒作物；制作人工种子；培养作物细胞分化是一种长期性的变化,它有什么生理意义？使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向特地化,有利于提高各种生理功能的效率；比较根尖分生组织和愈伤组织的异同组织类型细胞来源细胞形状细胞结构细胞排列细胞去向根尖分受精卵正方形无液泡紧密分化成多种细生组织胞组织再分化高度分化细胞无定形高度液泡化疏松成新个体愈伤组织相同点都通过有丝分裂进行细胞增殖影响植物组织培养的条件材料：不同的植物组织,培养的难易程度差别很大；植物材料的挑选直接关系到试验的成败；植物 的种类,材料的年龄和

35、储存时间的长短等都会影响试验结果；菊花组织培养一般挑选未开花植物的 茎上部新萌生的侧枝作材料；一般来说,简洁进行无性繁殖的植物简洁进行组织培养；选取生长旺 盛嫩枝进行组培的是嫩枝生理状态好,简洁诱导脱分化和再分化；养分：离体的植物组织和细胞,对养分,环境等条件的要求相对特殊,需要配制适宜的培养基；常用的培养基是MS 培养基,其中含有的大量元素是N ,P,S,K ,Ca,Mg ,微量元素是Fe,Mn ,B ,Zn,Cu,Mo ,I,Co,有机物有甘氨酸,烟酸,肌醇,维生素,蔗糖等；激素：植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂,脱分化和再分化的关键性激素；在生长素 存在的情形下,细胞分裂素的作

36、用显现加强趋势；在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物 激素,其浓度,使用的先后次序,用量的比例等都影响结果；使用次序试验结果生长素细胞分裂素比值与结果比值高时促根分化,抑芽先生长素,后有利于分裂但不分化细胞分裂素先形成促芽分化,细胞分裂素,细胞既分裂也分化比值低时抑根形成后生长素促进愈伤组织生长同时使用分化频率提高比值适中10 第 10 页,共 20 页+ 环境条件：PH,温度,光等环境条件；不同的植物对各种条件的要求往往不同；进行菊花的组织培养,一般将 把握在1822,并且每日用日光灯照射 12h. 4,操作流程pH 把握在左右,温度配制MS 固体培养基：配制各种母液：将各种成分按配方

37、比例配制成的 浓缩液（培养基母液）；使用时依据母液的浓缩倍数,运算用量,并加蒸馏水稀释；配制培养基：应加入的物质有琼脂,蔗糖,大量元素,微量元素,有机物和植物激素的母液,并用蒸馏水定容到 1000 毫升； 在菊花组织培养中,可以不添加植物激素缘由是菊花茎段组织培养比较简洁；灭菌：实行的灭菌方法是高压蒸汽灭菌； MS 培养基中各种养分物质的作用是什么？与肉汤培养基相比,MS 培养基有哪些特点？大量元素和微量元素供应植物细胞所必需的无机盐；蔗糖供应碳源,保护细胞渗透压；甘氨酸,维生素等物质主要是为了中意离体植物细胞在正常代谢途径受到确定影响后所产生的特殊养分需求；微生物培养基以有机养分为主,MS

38、培养基就需供应大量 无机养分；外植体的消毒 外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段；选取菊花茎段时,要取生长旺盛的嫩枝；菊花茎段用流水冲洗后可加少许洗衣粉,用软刷轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗 20min 左右；用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体积分数为 70% 的酒精中摇动23 次,连续67s,立即将外植体取出,在无菌水中清洗；取出后仍用无菌吸水纸吸干外植体表面水分,放入质量分数为0.1% 的氯化汞溶液中12min ；取出后,在无菌水中至少清洗3 次,漂洗消毒液；留意：对外植体进行表面消毒时,就要考虑药剂的消毒成效,又要考虑植物的耐受才能；接种：接种过程中插入外植体时形状学上端朝上,每

39、个锥形瓶接种 细菌接种相像,操作步骤相同,而且都要求无菌操作；培养：应当放在无菌箱中进行,并定期进行消毒,保持适宜的温度（78 个外植体；外植体接种与1822）和光照（12h）移栽：栽前应先打开培养瓶的封口膜,让其在培养间生长几日,然后用流水清洗根部培养基；然后将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍宝岩等环境中生活一段时间,进行壮苗；最终进行露天栽培；栽培外植体在培养过程中可能会被污染,缘由有外植体消毒不完全；培养基灭菌不完全；接种中被杂菌污染；锥形瓶密封性差等；专题二月季的花药培养被子植物的花粉发育被子植物的雄蕊通常包含 花丝,花药两部分；花药为 囊状结构,内部含有许多花粉；花粉是由 花粉母细胞经过减

40、数分裂而形成的,因此,花粉是 单倍体的生殖细胞；被子植物花粉的发育要经受 小孢子四分体时期,单核期和双核期等阶段；在小孢子四分体时期,4 个单倍体细胞连在一起,进入单核期时,四分体的 4 个单倍体细胞彼此分别,形成 4 个具有单细胞核的花粉粒；这时的细胞含深厚的原生质,核位于细胞的中心（单核居中期）；随着细胞不断长大,细胞核由中心移向细胞一侧（单核靠边期）,并分裂成 1 个生殖细胞核和 1 个花粉管细胞核,进而形成两个细胞,一个是生殖细胞,一个是养分细胞；生殖细胞将在分裂一次,形成两个精子；11 第 11 页,共 20 页留意：成熟的花粉粒有两类,一类是二核花粉粒,其花粉粒中只含花粉管细胞核和

41、生殖细胞核,二核花粉粒的精子是在花粉管中形成的；另一类是三核花粉粒,花粉在成熟前,生殖细胞就进行一次有丝分裂,形成两个精子,此花粉粒中含有两个精子核和一个花粉管核（养分核）花粉发育过 程中的四分体和动物细胞减数分裂的四分体不同；花粉发育过程中的四分体是花粉母细胞经减数分裂形成的4 个连在一起的单倍体细胞；而动物细胞减数分裂过程中的四分体是联会配对后的一对同 源染色体,由于含有四条染色单体而称为四分体；同一生殖细胞形成的两个精子,其基因组成完 全相同；产生花粉植株的两种途径通过花药培养产生花粉植株（即单倍体植株）一般有两种途径,一种是花粉通过胚状体阶段发育为植物,另一种是花粉在诱导培养基上先形成

42、愈伤组织,再将其诱导分化成植株；这两种途径之间并没有确定的界限,主要取决于培养基中 激素的种类及其浓度配比；留意：无论哪种产生方式,都要 先诱导生芽,再诱导生根 胚状体：植物体细胞组织培养过程中,诱导产生的形状与受精卵发育成的胚特殊类似的结构,其发育也与受精卵发育成的胚类似,有胚芽,胚根,胚轴等完整结构,就像一粒种子,又称为细胞胚；影响花药培养的因素诱导花粉能否成功及诱导成功率的高低,受多种因素影响,其中 材料的选择与培养基的组成是主要的影响因素亲本的生理状况：花粉早期是的花药比后期的更简洁产生花粉植株,挑选 月季的初花期；合适的花粉发育时期：一般来说,在 率最高花蕾：挑选 完全未开放的花蕾单

43、核期,细胞核由中心移向细胞一侧的时期,花药培养成功 亲本植株的生长条件,材料的低温预处理以及接种密度等对诱导成功率都有确定影响材料的选取：挑选花药时,一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期；确定花粉发育时期的最常用的方法是 醋酸洋红法；但是,某些植物的花粉细胞核不易着色,需接受 焙花青- 铬矾法,这种方法能将 花粉细胞核染成蓝黑色材料的消毒接种和培养：灭菌后的花蕾,要在无菌条件下除去萼片和花瓣,并马上将花药接种到培养基上；在剥离花药时,要尽量不损耗花药（否就接种后简洁从受伤部位长生愈伤组织）,同时仍要 完全去 除花丝,由于与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成,通常每瓶接种花

44、药 710 个, 培 养温度把握在 25 左右, 不需要光照. 幼小植株形成后才需要光照 . 一般经过2030 天培养后, 会发 现花药开裂, 长出愈伤组织或形成胚状体；将愈伤组织准时转移到分化培养基上,以便进一步分化 出再生植株；假如花药开裂释放出胚状体,就一个花药内就会产生大量幼小植株,必需在花药开裂 后尽快将幼小植株分开,分别移植到新的培养基上,否就这些植株将很难分开；仍需要对培养出来 的植株做进一步的鉴定和挑选；植物组织培养技术与花药培养技术的相同之处是：培养基配制方 法,无菌技术及接种操作等基本相同；两者的不同之处在于：花药培养的选材特殊重要,需事先 摸索时期适宜的花蕾；花药裂开后释

45、放出的愈伤组织或胚状体也要准时更换培养基；花药培养对 培养基配方的要求更为严格；这些都使花药培养的难度大为增加；专题 4 酶的争辩与应用学问点 课题1 果胶酶在果汁生产中的作用12 第 12 页,共 20 页由水果制作果汁要解决两个主要问题：一是果肉的出汁率低,耗时长；二是榨取的果汁浑浊,黏度高,简洁发生沉淀；1,植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分有 中,既影响出汁率,又使果汁浑浊；纤维素和_果胶_；并且两者不溶于水,在果汁加工2,果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一,它是由 半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物,不溶于水；在果汁加工中,果胶不仅会影响出汁率,仍会使果汁浑浊；果胶酶的作

46、用是能够将果胶_分解成可溶性的_半乳醛酸,瓦解植物的细胞壁及胞间层,并且使果汁变得澄清；3,果胶酶是一类酶总称,包括 _果胶分解酶,多聚半乳糖醛酸酶,果胶酯酶_等；4,酶的活性是指 酶催化确定化学反应的 的才能；酶活性的高低可以用在确定条件下,酶所催化的某一化学反应的 反应速度 来表示；在科学争辩与工业生产中,酶反应速度用单位时间内,单位体积中反应物的减小量或产物的增加量来表示；5,影响酶活性的因素包括：温度,PH ,酶的抑制剂等；（二）试验设计设计一探究温度对酶活性的影响当酶处于最适温度或最适 pH 时,酶的活性最高；如温度过高,过酸或过碱,就导致酶变性失活；在确定范畴内,果肉的出汁率和果汁

47、的澄清度与果胶酶的活性成正比；此试验的自变量是 温度_；依据单一变量原就,你应确保各试验组相同的变量有 _PH 底物浓度底物量试验器材 酶的用量 等等_；设计二探究 PH 对酶活性的影响探究pH 对果胶酶活性的影响,只须将温度梯度改成pH 梯度,并选定一个适宜的温度进行水浴加热；反应液中的pH 可以通过体积分数为0.1%的氢氧化钠或盐酸溶液进行调剂；设计三探究果胶酶的用量探究果胶酶的用量是建立在探究最适温度和pH 对果胶酶活性影响的基础之上的；此时,争辩的变量是果胶酶的用量,其他因素都应保持不变；试验时可以配制不同浓度的果胶酶溶液,也可以只配 制一种浓度的果胶酶溶液,然后使用不同的体积即可；需

48、要留意的是,反应液的 pH 必需相同,否 就将影响试验结果的准 旁栏摸索题 1为什么在混合苹果泥和果胶酶之前,要将果泥和果胶酶分装在不同的试管中恒温处理？提示：将果泥和果胶酶分装在不同的试管中恒温处理,可以保证底物和酶在混合时的温度是相同的,防止了果泥和果胶酶混合时影响混合物的温度,从而影响果胶酶活性的问题；2在探究温度或 pH 的影响时,是否需要设置对比？假如需要,又应当如何设置？为什么？提示：需要设置对比试验,不同的温度梯度之间或不同的 称为相互对比；pH 梯度之间就可以作为对比,这种对比3A 同学将哪个因素作为变量,把握哪些因素不变？为什么要作这样的处理？B 同学呢？提示：A 同学将温度

49、或 pH 作为变量,把握不变的量有苹果泥的用量,果胶酶的用量,反应的时间和过滤的时间等；只有在试验中保证一个自变量,试验结果才能说明问题；B 同学对于变量的处理应当与A 同学相同,只是观看因变量的角度不同；4想一想,为什么能够通过测定滤出的苹果汁的体积大小来判定果胶酶活性的高低？提示：果胶酶将果胶分解为小分子物质,小分子物质可以通过滤纸,因此苹果汁的体积大小反应了果胶酶的催化分解果胶的才能；在不同的温度和pH 下,果胶酶的活性越大,苹果汁的体积就越大；5当探究温度对果胶酶活性的影响时,哪个因素是变量,哪些因素应当保持不变？提示：温度是变量,应把握果泥量,果胶酶的浓度和用量,水浴时间和混合物的

50、pH 等全部其他条件不变；只有这样才能保证只有温度一个变量对果胶酶的活性产生影响；试验变量与反应变量如表反应变量因变量试验变量自变量13 第 13 页,共 20 页含 义 实 例 联 系试验中试验者所操纵的因素或条由于试验变量转变而引起的变化和结件果温度或pH果汁量试验变量为缘由,反应变量是结果,二者是因果关系课题2 探讨加酶洗衣粉的洗涤成效1,酶绝大多数是蛋白质,少数为RNA ；酶具有生物催化作用；酶具有高效性,专一性特点,但易受温度,PH ,表面活性剂等因素的影响；（1）加酶洗衣粉是指含 酶制剂 的洗衣粉,目前常用的酶制剂有 蛋白酶,脂肪酶,淀粉酶和纤维素酶四类；一般洗衣粉中含磷,含磷的污

51、水排放可能导致 微生物和藻类大量繁殖,造成水体污染,加酶洗衣粉可以降低 对环境的污染；表面活性剂和三聚磷酸钠,使洗涤剂朝无磷的方向进展,削减（2）脂肪酶可以将脂肪分解成 甘油和脂肪酸,蛋白酶可以将蛋白质分解成 小分子肽和氨基酸,小分子肽可在 肽酶作用下分解成氨基酸；淀粉酶可以将淀粉分解成 可溶性麦芽糖,纤维素酶可以将纤维素分解成 葡萄糖,以达到去污的目的,因此,蛋白类纤维织物（羊毛,蚕丝等）不能用 加（蛋白）酶洗衣粉 来洗涤；（3）应用最广泛,成效最明显的是 碱性蛋白 酶和碱性脂肪 酶；碱性蛋白酶能将血渍,奶渍等含有大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污迹简洁从衣物上脱落；（4）衣

52、物的洗涤,不仅要考虑到洗涤成效,仍要考虑衣物的承担才能,洗涤成本等因素；（5）加酶洗衣粉可以降低表面活性剂和三聚磷酸钠的用量,使洗衣粉朝低磷无磷的方向进展,减少对环境的污染；2,试验设计遵循原就：是单一变量原就,对比原就和等量原就,比如探究一般洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤成效有何不同时,用把握使用不同种类洗衣粉为变量,其他条件完全一样；同时一般洗衣粉处理污渍物与加酶洗衣粉处理污渍物形成 对比试验；3不同种类的酶洗衣粉对同一污渍的洗涤成效（1）试验原理：不同种类的加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有专一性,所以对不同污渍的洗涤成效不同；4,比较一般洗衣粉和加酶洗衣粉去污原理的异同一般洗衣粉 加

53、酶洗衣粉相同点 表面活性剂可以产生泡沫,将油脂分子分散开,水软化剂可以分散污垢,等酶可以将大分子有机物分解为小分子有机物,小分不同点 子有机物易溶于水,从而与纤维分开专题五和蛋白质技术课题一 的粗提取与鉴定提取 DNA 的溶解性原理包括哪些方面？DNA 在不同浓 NaCl 溶液中溶解度不同；DNA 不溶于酒度 精；NaCl 溶液中溶解度有何特点？要使 DNA 溶解,需要使 DNA 在不同浓度 用什么浓度？要使 DNA 析出,又需要使用什么浓度？14 第 14 页,共 20 页在0.14mol/L 时溶解度最小；较高浓度可使 DNA 溶解；0.14mol/L 可使DNA 析出；在溶解细胞中的 D

54、NA 时,人们通常选 2mol/LNaCl 溶液；将DNA 分子析出的方法是向溶 DNA 用 有的NaCl 溶液中缓慢注入蒸馏水,以稀释 NaCl 溶液；酒精是一种常用有机溶剂,但DNA 却不能溶于酒精（特殊是 95冷却酒精）,但细胞中蛋白质可溶于酒精；从理论上分析,预冷的乙醇溶液具有以下优点；一是抑制核酸水解酶活性,防止 DNA 降解；二是降低分子运动,易于形成沉淀析出；三是低温有利于增加DNA 分子柔韧性,削减断裂；接受 DNA 不溶于酒精的原理,可以达到什么目的？将DNA 和蛋白质进一步分别；提取 DNA 仍可以利 DNA 对酶,高温存洗涤剂的耐受性原理；利用该原理时,应选用怎样的酶用

55、和怎样的温度值？蛋白酶,由于酶具有专一性,蛋白酶只水解蛋白质而不会对由于该温度值蛋白质变性沉淀,而 DNA 不会变 性；补充：DNA 的变性是 DNA 分子在高温下解螺旋,其温度 指 在性温度在95；洗涤剂在提取 DNA 中有何作 用？洗涤剂瓦解细胞膜；DNA 产生影响；温度值 为6075 ,80以上,如在PCR 技术中DNA 变当鉴定提取出的物质是否是 DNA 时,需要使用什么指示剂进行鉴定？在沸水浴条件下,DNA 遇二苯胺显现蓝；色原理总结：通过利用不同浓度 NaCl 溶液溶解或析出 DNA,可以从细胞中提取和提纯 DNA；再利用酒精进一步将 DNA 与蛋白质分别开来,达到提纯的目的；最终

56、利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是DNA；试验材料的选取不同生物的组织中DNA 含量不同；在选取材料时,应本 着DNA 含量高,材料易得,便于提取 的原就；本试验用鸡血细胞做试验材料有两个缘由；一是由于鸡血细胞核的DNA 含量丰富,材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破,而用动物肝脏细胞作试验材料常常需要匀浆和离心,对设备要求较高,操作繁琐,历时较长；鸡血细胞破裂以后释放出的DNA ,简洁被玻璃容器吸附,所以在提取过程中为了削减DNA 的缺失,最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液；破裂细胞,猎取含 DNA 的滤 液如选用鸡血和洋葱作试验材料,就怎样猎取含 DNA 的滤 液？在鸡血细胞液中加入确定

57、量蒸馏水并用玻棒搅拌,过滤后收集滤液；切碎洋葱,加入确定量洗涤剂和食盐,搅拌研磨,过滤后收集滤液；为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？答：蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以 大量进入血细胞内,使血细胞胀裂,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的破裂细胞膜和核膜的破裂,从而释放出DNA ；在以上试验中,加入蒸馏水,洗涤剂和食盐的作用分别是什么？过滤时应当选用（滤纸,尼龙布）；血细胞在蒸馏水中大量吸水而张裂；洗涤剂瓦解细胞膜；食盐溶解 行过滤；DNA 物质；选用尼龙布 进15 第 15 页,共 20 页在处理植物组织时需要进行研磨,其目的是什么？研磨不充分产生什么结果？破裂细胞壁,使核

58、物质简洁溶解在 NaCl 溶液中；研磨不充分会使果,导致看不到丝状沉淀物,用二苯胺鉴定不显示蓝色等；DNA 的提取量削减,影响试验 结；具体做法；10mL 鸡血20mL 蒸馏水同方向搅拌 3 层尼龙布过滤滤液 去除滤液中的杂质为什么反复地溶解与析出DNA ,能够去除杂质？DNA析出,用高盐浓度的溶液溶解DNA ,能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使能除去溶解在低盐溶液中的杂质；因此,通过反复溶解与析出DNA ,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质；最初获得的DNA 滤液含有蛋白质,脂质等杂质,需要进一步提 DNA；纯 方案一的原理是 DNA 在不同浓 NaCl 溶液中溶解度不同；方案二

59、的原理是蛋白酶分解蛋白质,度 不分解DNA；方案三的原理是蛋白质和 DNA 的变性温度不同；方案二与方案三的原理有什么不同？答：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA 与蛋白质分开；方案三利用的是DNA 和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与DNA 分别；析出与鉴定在滤液中仍然含有一些杂质,怎样除去这些杂质呢？得到的 DNA 呈何颜 色？滤液与等体积的冷却酒精混合均匀,静置 23 分钟,析出的白色丝状物就是DNA；DNA呈白色；怎样鉴定析出的白色丝状物就是 DNA 呢？具体做法；试管 2 支,编号甲乙各加等量 5mLNaCl 溶液甲中 放 4mL 二苯胺,混合均匀沸水 入

60、少量白色丝状物,使之溶解各加 浴 5min 观看颜色变化试验操作制备鸡血细胞液 加柠檬酸钠,静置或离心 破裂细胞,释放DNA 加蒸馏水,同一方向快速通方向搅拌过滤,除去细胞壁,细胞膜等；溶解核内DNA 加入NaCl 至2mol/L ,同一方向缓慢搅拌 DNA 析 加蒸馏水至0.14mol/L ,过滤,在溶解到出除去细胞质中的大部分物质；2mol/L 溶液中DNA 初步纯化与等体积95冷却酒精混合,析出白色丝状物除去核蛋白,RNA,多糖等；DNA 鉴定二苯胺,沸水浴,显现蓝色16 第 16 页,共 20 页留意事项：在鸡血中加入柠檬酸钠防止凝固；鸡血静置或离心以提高细胞悬液浓度；使用塑料烧杯；使