选修一-第34讲-微生物的培养与应用ppt

1、第34讲微生物的培养 与应用 最新考纲近三年考情1.微生物的分离和培养2.培养基对微生物的选择作用3.某种微生物数量的测定4.微生物在其他方面的应用2018全国卷(37)、2018全国卷(37)、2018全国卷(37)、2017全国卷(37)、2016全国卷(39)、2016全国卷(39)1.培养 基(1)不雅 点 ：人们依照微生物对_的差别 需要 ，配制出供其_的营养基质。(2)营养构成 ：普通都含有_跟 无机盐。其余 ，还需要 满意 微生物成长 对_、氧气以及_的请求 。考点一微生物的试验 室培养 营养物质 成长 繁殖 水、碳源、氮源pH专门 营养物质 (3)种类依照物理性质 可分为_培养

2、 基、固体培养 基、半固体培养 基。依照因素 的起源 可分为天然 培养 基跟 _培养 基。依照功能 用处可分为抉择 培养 基、 _培养 基等。2.无菌技巧 (1)含意 ：在培养 微生物的操纵 中，所有 避免_的办法。液体剖析 鉴不杂菌污染(2)常用办法化学药剂消毒法干热灭菌高压蒸汽灭菌外来杂菌3.大年夜 肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白 胨固体培养 基(2)纯化大年夜 肠杆菌的办法纯化培养 道理 ：想方想法 在培养 基上掉 掉 落 _的肉眼可见的_，即可取得较纯的菌种。纯化大年夜 肠杆菌的要害 步调 ：_。称量灭菌倒平板由一个细胞繁殖 而来菌落接种常用的微生物接种办法有两种a.平板划线法

3、：是经过_在琼脂固体培养 基表面_的操纵 ，将聚拢 的菌种逐渐稀释分散 到培养 基的表面。如下图：接种环延续划线1b._法：是将菌液停顿一系列的_，而后 将_的菌液分不涂布到琼脂固体培养 基的表面，停顿培养 。(3)菌种的保存 办法对于 频繁 应用 的菌种，能够 采用_的办法。对于 需要 临时保存 的菌种，能够 采用_的办法。稀释涂布平板梯度稀释差别 稀释度暂时收藏 甘油管藏1人教版选修一P16“旁栏考虑 题拓展请你揣摸 以下资料或用具是否 需要 消毒或灭菌。假如需要 ，请抉择 适合的办法。培养 细菌用的培养 基与培养 皿玻棒、试管、烧瓶跟 吸管试验 操纵 者的双手提醒 需要 灭菌；需要 消毒

4、。2人教版选修一P17“倒平板操纵 什么原因 需要 使锥形瓶的瓶口经过分 焰？平板冷凝后，什么原因 要将平板倒置 ？提醒 经过灼烧灭菌，避免瓶口的微生物污染培养 基。平板冷凝后，皿盖上会凝集 水珠，凝结后的培养 基表面的湿度也比较高，将平板倒置 ，既能够 使培养 基表面的水分更好地挥发，又能够 避免皿盖上的水珠落入培养 基，形成污染。人教版选修一P18“旁栏微生物的接种办法除了平板划线法跟 稀释涂布平板法外，还包含 歪 面接种、穿刺接种等办法。微生物接种的核心 基本上 要避免杂菌的污染，保障 培养 物的纯度。1.(2018世界 卷，37)生物选修1：生物技巧 实际在花费 、生活 跟 科研实际中

5、，经常经过消毒跟 灭菌来避免杂菌的污染。回答以下咨询 题：(1)在试验 室中，玻璃跟 金属材质的试验 用具(填“能够 或“不克不及 够 )放入干热灭菌箱中停顿干热灭菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温刹时 消毒法，与煮沸消毒法比拟 ，这两种办法的长处 是_。(3)密闭空间内的氛围 可采用紫外线照射 消毒，其缘故是紫外线能。在照射 前，适量 喷洒，可强化消毒后果 。(4)水厂供给的自来水平日 是经过(填“氯气“乙醇或“高锰酸钾)消毒的。(5)某同学 在应用 高压蒸汽灭菌锅时，假设 压力到达 设定请求 ，而锅内并不 到达 响应 温度，最能够的缘故是。剖析 (1)在试验 室中，能耐高温的、需要

6、 保持 枯燥 的物品，如玻璃器皿跟 金属材质的试验 用具等能够 放入干热灭菌箱中停顿干热灭菌。(2)巴氏消毒法或高温刹时 消毒法与煮沸消毒法比拟 ，其长处 表示 为在到达 消毒目标 的同时，营养物质 丧掉 较少。(3)紫外线照射 能消毒的缘故是其能够 破坏微生物细胞中的DNA分子。在应用紫外线照射 前，适量 喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可强化消毒后果 。(4)自来水平日 采用氯气消毒。(5)采用高压蒸汽灭菌时，假设 压力到达 设定请求 ，而温度未到达 响应 请求 ，最能够的缘故是不 排尽高压蒸汽灭菌锅内的冷氛围 。答案 (1)能够 (2)在到达 消毒目标 的同时，营养物质 丧掉 较少(3)

7、破坏DNA结构消毒液(4)氯气(5)未将锅内冷氛围 排尽2.2018河北衡水中学七调以下表格是某公司研发的一种培养 大年夜 肠杆菌的培养 基配方，请联合 所学常识 ，回答以下相干 咨询 题。成分含量蛋白胨10.0 g乳糖5.0 g蔗糖5.0 gK2HPO42.0 g显色剂（伊红美蓝）0.2 g琼脂12.0 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL1依照用处分别 ，该培养 基属于培养 基，假设 要不离能剖析 尿素的细菌，需对培养 基做出的最要害 的调剂 是，假设 还需判定 剖析 尿素的细菌.需做出的调剂 是。2从培养 基的因素 上看，大年夜 肠杆菌的异化范例 为。该培养 基是否 用于不

8、离抉择 出大年夜 肠杆菌？什么原因 ？_。3在试验 室培养 微生物时，取得纯真 培养 物的要害 是，紫外线可对氛围 停顿灭菌的缘故是_。4某同学 实验 纯化大年夜 肠杆菌，其中 一个平板的菌落散布如上图，推测该同学 接种时能够的操纵 掉 误是_。剖析 1伊红美蓝是判定 大年夜 肠杆菌的试剂，因而该培养 基从用处上分属于鉴不培养 基；假设 要不离能剖析 尿素的细菌，那么需要 保障 培养 基中以尿素为唯一 氮源，马上蛋白 胨换成尿素；判定 剖析 尿素的细菌，需要 应用 酚红唆使 剂。2大年夜 肠杆菌需要 从培养 基中取得碳源，因而其异化感化 范例 是异养型；因为 表格中的培养 基中的碳源种类非常多

9、，可供多种微生物生活 ，因而该培养 基不克不及 用于不离抉择 出大年夜 肠杆菌。3微生物培养 时，要害 是避免外来杂菌的感染 ；氛围 中的细菌可用紫外线杀灭，其缘故是紫外线能让蛋白 质变性，同时还能破坏DNA的结构。4由题图可知，接种时该同学 采用的是稀释涂布平板法，但菌落比较会合 ，不 非常好地分散 开来，能够是涂布不平均导致 的。答案 1鉴不将蛋白 胨换成尿素将伊红美蓝换成酚红唆使 剂2异养型不克不及 ，缘故是培养 基中的碳源种类非常多，可供多种微生物生活 3避免外来杂菌的感染 紫外线能使蛋白 质变性，还能破坏DNA的结构4涂布不平均走出微生物培养 的5个误区1不是所有 微生物培养 基中均

10、需参加 专门 营养物质 。碳源、氮源、水分、无机盐是微生物成长 必须 的四大年夜 营养因素 ，有些微生物可自行剖析 专门 营养物质 ，而对那些剖析 才干有限或不克不及 剖析 专门 营养物质 的微生物如乳酸菌，那么需在培养 基中增加 诸如维生素等物质 。2平板划线法纯化大年夜 肠杆菌时差别 阶段灼烧接种环的目标 差别 第一次操纵 ：杀逝世 接种环上原有的微生物。每次划线之前：杀逝世 上次 划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种开门见山 起源 于上次 划线的最后 。划线终了后：杀逝世 接种环上残存的菌种，避免细菌污染情况 跟 感染 操纵 者。3倒平板的温度普通在50 阁下 适合，温度过 高会烫

11、手，温度过 低培养 基又会凝结。平板冷却凝结后需倒置 ，如此 既可使培养 基表面的水分更好地挥发，又避免皿盖上的水珠落入培养 基，形成培养 基污染。1.泥土 中剖析 尿素的细菌的不离与计数(1)道理 与流程考点二微生物的抉择 跟 计数脲酶尿素开门见山 计数法稀释涂布平板法系列稀释计数(2)统计菌落数量 时，培养 基表面熟长的1个菌落，起源 于样品稀释液中_个活菌。为了保障 结果精确，普通抉择 菌落数在_的平板停顿计数。(3)从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的打算 办法是(平均菌落数C涂布的稀释液体积V)稀释倍数M点悟 应用稀释涂布平板法胜利 统计菌落数量 标 要害 是恰当 的稀释度13

12、0300 (4)试验 结果剖析与评估 2.剖析 纤维素的微生物的不离(1)纤维素酶及纤维素剖析 菌抉择 道理 、办法复合酶C1酶、Cx酶跟 葡萄糖苷酶纤维二糖葡萄糖白色复合物透明圈刚果红透明圈纤维素(2)试验 流程纤维素抉择 培养 基鉴不纤维素剖析 菌(3)不离纤维素剖析 菌所用的两种培养 基比较不离纤维素剖析 菌的试验 中先用_培养 基，再用_培养 基。抉择 培养 基为_培养 基，以纤维素作为碳源跟 能源 的微生物能够 畸形 成长 ，而其余 绝大年夜 少数微生物不克不及 畸形 成长 。鉴不培养 基含琼脂，为_培养 基，细菌可在培养 基上形成 肉眼可见的菌落。刚果红染色法应用 于_(抉择 、鉴

13、不)培养 基。抉择 鉴不液体固体鉴不2019河南天一大年夜 联考“互联网餐饮为大年夜 众 生活 带来了诸多修改 ，动入手指导 外卖曾经成为普通大年夜 众 的生活 方法 。为检测外卖糕点中微生物目标，食品 监禁 人员 经过无菌操纵 ，将25 g样品以及225 mL磷酸盐缓冲液一起 置于均质器中以8 00010 000 r/min的速度 处理 1 min，取得平均稀释液待用。请回答以下咨询 题：1配制牛肉膏蛋白 胨培养 基时，在各因素 都消溶 后跟 倒平板前，要停顿的操纵 是、分装跟 灭菌。对培养 基停顿灭菌的常用东西 是_。倒平板时，普通需冷却至50 阁下 ，并在酒精灯火焰旁停顿操纵 。接种之行

14、停顿的一系列稀释操纵 ，目标 是在培养 基表面形成 ，这种接种办法是_。2假设 培养 基上平均有40个菌落，那么1 g样品中大年夜 抵 的活菌数量 是个。该结果每每 较实践值偏小，缘故是_。有人认为 ，此处统计的菌落总数实践上仅为糕点样品中总细菌数的一部分，来由 是_。答案 1调pH高压蒸汽灭菌锅单个菌落稀释涂布平板法24106少数菌落能够是由两个或多个细菌形成 的每种细菌需要 的营养物质 跟 成长 前提 差别 ，培养 时需满意 其营养、温度、pH、需氧性等前提 ，因而实践只能取得糕点样品细菌中的一部分答案 公道 即可廓清易错易混强化迷信思维 易错易混易错点1混淆 两种“对比 组与“重复组点拨

15、1两种对比 组感化 比较揣摸 培养 基中“是否 有杂菌污染，需将未接种的培养 基同时停顿培养 。揣摸 抉择 培养 基“是否 存在 抉择 感化 ，需设置牛肉膏蛋白 胨培养 基停顿接种后培养 ，不雅 看 两种培养 基上菌落数量 ，停顿对比得出论断 。2重复组的设置及感化 为打扫 偶尔因素 对试验 结果的搅扰，在每一稀释度下宜设置3个平板作重复组，抉择 菌落数均在30300且数量 相差不大年夜 的三个平板，用“平均值代入计数公式予以打算 菌落数。易错点2不清晰 什么原因 测定活菌的数量 不克不及 用平板划线法？点拨因为 在所划的线中，普通只要最后一次划线的最后 才会形成 只由一个细菌形成 的菌落，而

16、其余 一些菌落每每 由两个细菌或多个细菌繁殖 而成，而在计数时一个菌落对应着一个细菌，如此 在划线所得的平板中，菌落数量 远低于活菌的实践数值，因而 不克不及 用平板划线法测定活菌数量 。易错点3易混淆 抉择 培养 基与鉴不培养 基点拨1抉择 培养 基赞成 特定的微生物成长 ，同时克制 或禁止 其余 种类微生物成长 。泥土 中剖析 尿素的细菌的不离应用的是抉择 培养 基。2鉴不培养 基是在培养 基中参加 某种专门 的化学物质 ，某种微生物在培养 基中成长 后能发生某种代谢产品 ，而这种代谢产品 能够 与培养 基中的专门 化学物质 发生 特定的化学反应 ，发生分明的特点 性变更 ，依照这种特点

17、性变更 ，可将该种微生物与其余 微生物区离开 来的培养 基。用于抉择 纤维素剖析 菌的培养 基的确是鉴不培养 基。2018湖北长望浏宁四县一模农业花费 上有一种广泛 应用 的除草剂在泥土 中不易被落解，临时应用 会污染泥土 。为修复被污染的泥土 ，可按图示次序 选育出能落解该除草剂的细菌。曾经清楚 该除草剂含氮无机物在水中消融 度低，含必定 量该除草剂的培养 基不透明。请剖析回答：深度纠错1微生物接种是微生物学研究 中最常用的全然 操纵 技巧 ，该技巧 的核心 是。2在选育过程 中，应将泥土 浸出液接种于以该除草剂为唯一 的培养 基上。经过比较单菌落周围的大小 ，可抉择 出高效的目标 菌。试验

18、 结果如上图表现 的AE五种菌株中，是最幻想 菌株。3设想 象对开端 抉择 掉 掉 落 的目标 菌停顿纯化并计数，可采用的接种办法是。将1 mL泥土 溶液分不稀释10倍跟 100倍，每种稀释度各在3个平板上分不接入0.1 mL稀释液，经过恰当 培养 后，6个平板上的菌落数分不为59、57、58跟 2、7、5，空白 对比 组的平板上不 菌落，那么每升泥土 溶液中活菌数的实际值为个。实践上每升泥土 溶液中的活菌数比经过统计所得的这一数值要大年夜 ，因为 _。4科研人员 用喷射 线处理 该细菌，取得突变株A跟 B，而后 对突变株A跟 B停顿试验 ，结果如下表所示：接种的菌种一般培养基实验处理及结果A不生长添加营养物质甲，能生长B不生长添加营养物质乙，能生长AB能生长不添加营养物质甲、乙，能生长请剖析突变株A跟 B混淆 在一起 接种于普通营养基中能成长 的最能够缘故。_。剖析 1微生物接种技巧 的核心 是避免杂菌污染。2曾经清楚 该除草剂为含氮无机物，在水中消融 度低，含必定 量该除草剂的培养 基不透明；落解该除草剂的细菌能剖析 培养 基中的该除草剂，使培养 基中出现透明圈。可见，在选育能落解该除草剂的细菌的过程 中，应将泥土 浸出液接种于以