血清甘油三酯酶试剂法测定法

1、血清甘油三酯酶试剂法测定法实验原理脂蛋白酯酶（LPL）、甘油激酶（GK）、甘油-3-磷酸氧化酶（GPO）、过氧化物酶(POD)、Trinder反应偶联比色终点法。反应式如下： LPL甘油三酯 + H2O 甘油 + 脂肪酸GK甘油 + ATP 甘油-3-磷酸 + ADP GPO甘油-3-磷酸 + O2 二羟丙酮磷酸 + H2O2 POD2H2O2 + 4-氨基安替比林 + 4-氯酚 醌亚胺 + HCl + 4H2O2. 标本：2.1 病人准备：12小时禁食。2.2 类型：血清，肝素或EDTA抗凝血浆。3. 标本存放：血清稳定性：2025保存可稳定2天；48保存可稳定1周；-20保存至少可稳定1年

2、。4. 标本运输：常温条件下保存运输。5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。6. 实验材料6.1 试剂 威特曼甘油三脂试剂盒 试剂1 试剂2 6.1.1试剂准备：试剂为即用式。6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。6.1.4 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95 g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂6.2 校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SO

3、P文件。6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤：参见AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。11. 计算方法：以TruCal U复合校准品甘油三脂校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果

4、。12. 参考值范围（单位：mmol/L）合适范围： 2.3mmol/L高度危险临界值： 2.34.5mmol/L高度危险范围： 4.5mmol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13. 临床意义：甘油三酯是甘油与3个脂肪酸形成的酯，是天然脂肪中含量最多的。在血液中，甘油三酯和载脂蛋白结合形成极低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微粒，运送到全身。甘油三酯的检测用于对脂肪状态的过筛，以检出致动脉粥样硬化的危险；监视降脂治疗的效果。近期的研究说明，甘油三酯的增高同时伴有低密度脂蛋白（LDL）的升高，特别对发生冠心病（CHD）具有高度危险

5、。甘油三酯的升高也和肝、肾以及胰腺疾病有关。流行病学研究观察到，若同时出现血清甘油三酯2mmol/L、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）2.3mmol/L）的临床应用需结合CHD的其他危险因子。14. 操作性能14.1 线性范围：0.0111.3mmol/L。14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU2700批内精密度小于3%，总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)天间精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)样品10.910.0141.53样品11.130.

6、0181.60样品21.200.0221.82样品22.000.0211.04样品32.400.0351.47样品32.290.0241.0614.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对77个样品进行TG检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=0.98x+0.014mmol/L；r=0.993。14.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.01mmol/L。14.5 病人结果可报告范围：0.0111.3mmol/L。15. 超出范围结果处理：本法对甘油三酯的检测范围为0.0111.3mmol/L。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+4稀释，重

7、新测定，结果乘以5。16. 病危报警值的处理：当甘油三脂测定值4.5mmol/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。17. 方法局限性17.1 本法对甘油三酯的检测范围为0.0111.3mmol/L。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+4稀释，重新测定，结果乘以5。17.2 干扰物质：当样品中胆红素浓度684mol/L时没有观察到干扰。当抗坏血酸浓度341mol/L、血红蛋白浓度2.50g/L时有干扰。18. 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19. 参考文献Rifai N, Bachorik PS, Albers JJ. Lipi

8、ds, lipoproteins and apolipoproteins. In: Burtis CA, Ashwood ER. editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1999. P.809-61.Cole TG, Klotzsch SG, McNamara J. Measurement of triglyceride concentration. In: Rifai N, Warnick GR, Dominiczak MH, eds. Handbook of lipoprotein testing. Washington: AACC Press, 1997.p.115-26.3.Recommendation of the Second Joint Task Force of European and other Societies on Coronary Prevent