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1、高二生物选修专题课题微生物的实验室培养第1页,共12页,2022年,5月20日,19点12分,星期四培养基的分类和成分自养异养微生物碳源的区别比较消毒和灭菌举例说明消毒和灭菌制备培养基的程序溶化操作中搅拌的作用为什么将平板倒置第2页,共12页,2022年,5月20日,19点12分,星期四专题2 :微生物的培养与应用第3页,共12页,2022年,5月20日,19点12分,星期四 了解有关培养基的基础知识,进行无菌技术的操作,进行微生物的培养。 一、课题目标: 掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术,熟练、规范地进行无菌操作,成功地培养微生物。无菌技术的操作。二、课题重点和难点:
2、三、技能目标:第4页,共12页,2022年,5月20日,19点12分,星期四课前预习一、平板划线法 稀释涂布平板法 1. 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线 接种环 烧红 菌液中沾取一环菌液 迅速伸入平板内划35条平行线 第一区域划线的末端开始往第二区域内 最后一区域的划线与第一区相连 2.稀释 不同稀释度的菌液分别涂布在琼脂固体培养基的表面 稀释度足够高时 9 试管灭菌 1 1 酒精 0.1 810s 均匀 转动培养面 分布均匀 二、临时 40c 甘油 -200c预习自测: C D D D B 第5页,共12页,2022年,5月20日,19点12分,星期四接种方法有:平板划线法和稀释涂布
3、平板法 平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作,将聚集的菌钟逐步稀释分散到培养基的表面.在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落.微生物的接种技术(二)、纯化大肠杆菌第6页,共12页,2022年,5月20日,19点12分,星期四菌落:单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。一个菌落就是一个种群第7页,共12页,2022年,5月20日,19点12分,星期四菌落细菌的菌落特征因种而异 第8页,共12页,2022年,5月20日,19点12分,星期四(1)为什
4、么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么? 操作的第一步灼烧接种环是每次划线前灼烧接种环是划线结束后灼烧接种环是消灭接种环上的微生物 ;消灭接种环上残留菌种 (使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。)是防止细菌污染环境和感染操作者。第9页,共12页,2022年,5月20日,19点12分,星期四(2)在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?答:以免接种环温度太高,杀死菌种。(3)在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。第10页,共12页,2022年,5月20日,19点12分,星期四 (2)应从操作的各个细节保证“无菌”。例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。(1)要注意防止杂菌污染,比如试管、移液管要经过灭菌,操作在酒精灯附近进行(移液管和试管口应在离火焰1-2cm处)。第11页,共12页,2022年,5月20日,19点12分,星期四问题探讨2(1)培养未接种的培养
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