DB1301-T235-2017苦楝组培快繁育苗技术规程

1、ICS65.020.01B 61DB1301石家庄市地方标准DB 1301/T 2352017苦楝组培快繁育苗技术规程2017-08-20 发布2017-10-20 实施石家庄市质量技术监督局发 布DB 1301/T 2352017前言本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。本标准由石家庄市农业局提出。本标准起草单位：石家庄市农林科学研究院，石家庄市神州花卉研究所有限公司。本标准起草人：蒋淑磊、李振勤、李志斌、徐秋良、胡建敏、白霄霞、李国松、边光亚、刘雅、吴然、张晓英。DB 1301/T 2352017苦楝组培快繁育苗技术规程范围本标准规定了苦楝组培快繁育苗生产过程中培养基的制

2、备、培养材料的处理、初代培养、继代培养、增殖和生根培养、炼苗移栽、移栽后管理和出圃。本标准适用于苦楝通过组织培养快繁育苗的全过程。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T2306-2013 花卉种苗组培快繁技术规程DB13/T2422-2016高山杜鹃工厂化育苗技术规程术语和定义下列术语和定义适用于本文件。苦楝(Melia azedarach L.) 为楝科(Meliaceae) 楝亚科（Melioideae）楝属(Melia)，高大的落叶乔木，易成型成材，

3、速生树种；树干笔直、冠形优美，孤植、丛植皆宜，是行道树的优选树种。注：花序较大、颜色鲜艳，花开时节，芳香四溢，金黄色的果实越冬不落；耐寒、耐干旱、耐盐碱、耐烟尘，既能吸收二氧化硫、氟化氢等有毒有害气体。果实可以提取防治线虫、蛾类、蚧壳虫、白蚁、臭虫、螨虫、钻蛀虫、蟑螂等多种农林害虫的杀虫成分-苦楝素，尤其是对美国白蛾有非常显著的防御作用，花、叶、果实、根皮均可入药，是具有观赏、绿化及药用多重价值的优异乡土树种。母本材料选择健壮植株为母本材料，加强栽培管理，预防病虫害。培养基选择与母液配制培养基选择以WPM和1/2 WPM为基本培养基。母液的配制和保存培养基母液配制和保存按照DB13/T 242

4、2-2016条款5.2.2执行。植物生长物质的母液配制及保存按照 DB 13/T 2422-2016 条款 5.3 执行。1DB 1301/T 2352017培养基制作培养基制作按照DB 13/T 2422-2016 条款5.4执行，pH值为6.56.8。外植体预处理与消毒从健康母本材料上切取顶芽2 cm为外植体放入烧杯。将外植体用0.2%0.3%的洗涤剂溶液浸泡并振荡5 min10 min，自来水冲洗30 min。在超净环境中，用75%酒精浸泡外植体30 s，用无菌水冲洗外植体35次。用0.1%的HgCl2溶液浸泡5 min8 min，用无菌水冲洗35次，备用。接种准备与外植体接种操作接种准

5、备及外植体接种操作按照NY/T 2306-2013 条款10执行。组织培养过程概述组织培养过程分为初代培养、继代培养、不定芽及生根培养等过程。培养温度为25 2 ，光照强度3000 lux3500 lux，每日连续光照12 h13 h。初代培养将外植体接种在初代培养基上，至幼芽萌发生长到1 cm2 cm。初代培养的培养基配方为: WPM+ NAA0.25 mg/L+ 6-BA2.0 mg/L +白砂糖30 g/L+琼脂6.5 g/L，pH 值调至6.56.8。继代培养将初代培养基上长出的幼嫩组织转接到继代培养基上长出丛生芽。继代培养基配方为：WPM+NAA0.25 mg/L+ KT2.0 mg

6、/L+白砂糖30 g/L+琼脂6.5 g/L。增殖培养将丛生芽分切成0.5 cm1 cm组织块,转接在增殖培养基上培养。增殖培养基配方为: WPM+NAA0.1 mg/L+KT2.0 mg/L +白砂糖30 g/L+琼脂6.5 g/L，pH值调至6.5 6.8。生根培养将高度为2 cm3 cm的增殖苗转接在生根培养基中，生根培养30 d，幼苗基部长出47条新根，根长3 cm4 cm时，进行炼苗移栽。诱导生根的培养基配方为: 1/2WPM+ IBA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L+白砂糖15 g/L+琼脂6.5 g/L，pH 值调至6.56.8。炼苗与移栽2DB 1301/T 23520

7、17炼苗将生根苗从培养室中取出，置于温度控制在(202) ，经彻底消毒的温室中，炼苗驯化3 d4 d， 再开口炼苗3 d4 d，进入移栽阶段。移栽从瓶中取出组培苗，放在盛有20 左右的温水中，将附着在根上的培养基清洗掉，洗时注意不伤根，用50%多菌灵WP 1500倍液浸泡5 min，清洗灭菌。选用1 mm3 mm的珍珠岩与草炭1:3配比制成基质，装入穴盘中。将基质喷湿至含水量达到60%左右。清洗灭菌后的苗移栽到穴盘中。用雾化良好的喷雾器冲洗叶片，并使根系和基质紧密接触。移栽后管理光照与温湿度控制移栽后用薄膜小拱棚保温保湿10 d，相对湿度保持在80%左右，温度保持在18 22 ，每天通风0.5 h1 h，用遮阳网控制光照强度在5000 lux10000 lux之间。当移栽苗再生新根后可逐步打开薄膜小拱棚，继续培育。施肥打开小拱