同济医院检验科ISO15189体系文件29.氯化醋酸AS-D萘酚酯酶（AS-DCE）染色_第1页
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1、同济大学附属同济医院检验科血液组项目操作指导书TJYYJYKMY/XMZ129第2版标题氯化醋酸AS-D萘酚酯酶（AS-DCE）染色第1章 第29节第 PAGE 4 页 共 NUMPAGES 4 页 目的：保证氯化醋酸AS-D萘酚酯酶 适用范围：氯化醋酸AS-D萘酚酯酶染色 项目名称：氯化醋酸AS-D萘酚酯酶染色 检测方法：化学染色 原理：血细胞内的氯化醋酸AS-D萘酚酯酶将基质液中的氯化醋酸AS-D萘酚水解，产 生AS-D萘酚，后者与坚牢紫酱偶联形成不溶性红色沉淀，定位与胞浆内。 试剂；6.1 品牌； 丙酮 上海试剂三厂 37%甲醛 上海试剂三厂磷酸氢二钠 上海新华化工厂 磷酸二氢钾 上海试

2、剂二厂氯化醋酸AS-D萘酚 SIGMANN-二甲基甲酰胺溶液 上海华工试剂厂盐酸 上海试剂三厂付品红 上海试剂二厂亚硝酸钠 上海振兴试剂厂6.2 货号： 丙酮 13-20102365II 37%甲醛 13-20102569II磷酸氢二钠 磷酸二氢钾 13-001-0802-113II氯化醋酸AS-D萘酚 208-439NN-二甲基甲酰胺溶液 盐酸 13-001-0806-003II付品红 亚硝酸钠 13-0010801220II6.3 包装规格： 丙酮 500ml 37%甲醛 500ml磷酸氢二钠 500g 磷酸二氢钾 500g氯化醋酸AS-D萘酚 1gNN-二甲基甲酰胺溶液 500ml 盐酸

3、 500ml付品红 25g亚硝酸钠 25g6.4 内含物：6.4.1 固定液：甲醛-丙酮溶液6.4.2 六偶氮付品红溶液 甲液：40g/L盐酸付品红溶液 付品红 4g 2N盐酸 100ml 乙液：40g/L亚硝酸钠溶液 亚硝酸钠 4g 蒸馏水 100ml应用液： 甲液1份、乙液1份混合，褪至无色即可使用6.4.3 0.067mol/L磷酸盐缓冲液PH7.66.4.4 基质液：6.4.4.1称取4mg氯化醋酸AS-D萘酚，加入0.3mlNN-二甲基甲酰胺溶解6.4.4.2加入9.6ml缓冲液（PH7.4）混匀，再加入六偶氮付品红应用液 仪器：显微镜 操作步骤：8.1 新鲜涂片冷固定液固定30秒8

4、.2 水洗待干8.3 浸入基质液，在37水温箱内孵育1小时8.4 流水冲洗干净8.5 用苏木素复染1-2分钟 线性范围：无10 参考范围：油镜观察，细胞浆内橘红色颗粒为阳性11 临床意义：正常血细胞染色反应11.1 粒细胞系统：原粒细胞为阴性反应或阳性反应，自早幼粒细胞至中性分叶核粒细胞均为阳性反应，酶活性并不随细胞的成熟而增强。嗜酸性粒细胞为阴性反应或弱阳性反应。嗜碱性粒细胞为阳性反应。11.2 单核细胞系统：为阴性反应，个别单核细胞可呈弱阳性反应。11.3 其他细胞：幼红细胞，淋巴细胞，浆细胞均呈阴性反应。12 病人准备标本要求：采取病人骨髓液涂片13 注意事项：13.1 标本新鲜13.2 染色时间要充分。13.3 冲洗

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