苏拉明联合槲皮素抑制肺腺癌小鼠移植瘤 的转移

1、苏拉明结合槲皮素抑制肺腺癌小鼠移植瘤 的转移张平，贺兼斌，王小华，欧立文【摘要】目的研究苏拉明结合槲皮素对小鼠肺腺癌转移的抑制作用。方法将40只接种高转移性的LA795肺腺癌细胞T739小鼠随机分成5组：对照组、顺铂DDP组、槲皮素组、苏拉明组、苏拉明+槲皮素组。实验3周后，处死全部小鼠，取出双肺和剥离皮下肿瘤，计算肺转移发生率，计数各组小鼠肺外表转移结节数及算出肺外表结节转移抑制率，测量各组小鼠肺湿重。免疫组化和图像分析系统检测皮下移植瘤中微血管密度irvesseldensity，VD，血管内皮生长因子vasularendthelialgrthfatr，VEGF的表达并定量分析。结果苏拉明组

2、、槲皮素组与对照组相比肺外表转移结节数明显下降，同时苏拉明组中肺转移发生率、皮下肿瘤内VD、VEGF的表达与对照组相比也明显下降，相反顺铂组对此那么无明显影响。结合用药组那么显著抑制肺外表转移结节数且具有协同作用。结论苏拉明和槲皮素对LA795肺腺癌的肺结节转移具有协同抑制作用，苏拉明抑制LA795肺腺癌转移与其抑制其肿瘤内VEGF表达相关。【关键词】苏拉明；槲皮素；血管生成抑制剂；肺腺癌；转移基金工程：湖南省卫生厅科研基金资助工程(2022033)InhibitryEffetfSurainbinatinithQueretinntheetastasisfLungAdenarinainie目前肺

3、癌发病率和死亡率都有明显增高趋势，腺癌为其一主要组织学类型，癌瘤内血管丰富，部分侵润和血行转移发生较早。转移是恶性肿瘤的重要特征，也是主要死因。自Flka1首先提出实体瘤生长需要血管生成理论后，抗血管治疗肿瘤转移也成为了当前肿瘤生物治疗的研究热点之一。本实验利用LA795肺腺癌细胞形成高转移T739小鼠皮下肿瘤转挪动物复制模型2，应用具有血管生成抑制作用的苏拉明及槲皮素，以顺铂为对照，观察单独及结合用药对LA795肺腺癌肺转移的抑制作用，并讨论其作用机制。1材料和方法1.1实验动物、细胞株、药品及试剂1.2动物模型的建立处死两只荷瘤鼠，剥离瘤块，研磨成匀浆液，过360目钢网，生成肿瘤细胞悬液，

4、镜下调节细胞浓度为2106个/l，于每只小鼠右后腿根部外侧皮下注射0.2l瘤液，形成小鼠高转移性动物肿瘤模型。1.3分组及用药小鼠皮下移植处均成瘤，接种4d后随机分成5组，每组8只。(1)对照组:丙二醇0.2l+生理盐水0.2l/只腹腔注射iq，每天一次；(2)顺铂组:顺铂2g/(kgd)溶于生理盐水0.2l中iq，于接种后第4、11、18d各一次，并予丙二醇0.2l/只每天腹腔注射一次；(3)槲皮素组:槲皮素50g/(kgd)溶于丙二醇0.2l中iq，每天一次；(4)苏拉明组:苏拉明10g/(kgd)溶于生理盐水0.2l中iq，每天一次；(5)槲皮素+苏拉明组:槲皮素及苏拉明按3、4组用药。

5、1.4方法与观察指标141药物对肿瘤转移的影响142移植瘤内VEGF、VD的表达15统计处理根据数据类型分别使用组间t检验，2检验和相关分析，用SPSS10.0软件进展统计学处理。2结果2.1移植瘤的肺转移情况各组小鼠移植瘤的肺转移发生率、肺转移结节数、肺湿重等情况,见表1。表1各组小鼠移植瘤的肺转移情况3讨论已发生转移的中、晚期肺癌疗效差。肿瘤侵袭和转移是肿瘤治疗的一大难题。本文用有血管抑制作用的苏拉明结合槲皮素对肺腺癌的转移进展研究。结果显示，结合组肺外表转移结节数比其他组明显减少，有差异显著性(P0.05)，说明苏拉明和槲皮素结合应用有协同抑制转移作用。槲皮素组、DDP组及对照组小鼠均发

6、生肺转移，差异无显著性P0.05；苏拉明组6/8小鼠发生肺转移，低于对照组，而结合组5/8小鼠发生肺转移与对照组比差异有显著性(P0.05)，进一步显示结合用药协同作用。本实验苏拉明组及槲皮素组与对照组转移率相比无显著性差异，可能是本研究样本偏少，扩大样本可能会得出阳性结果，5组肺湿重无差异显著性，可能与肺外表转移结节部分未明显生长有关，延长喂养时间，随着转移灶部分生长估计会导致各组肺湿重的差异性。亦可能系转移瘤所占肺比重较小，如测转移瘤重，亦可能出现差异性，但本研究中肺脏体积小，癌结节难以剥离。体外实验证明，缺乏血管生成，肿瘤只能长到123，不发生转移，血管形成是肿瘤生长、侵袭、转移的根底，

7、新生血管提供肿瘤生长所需营养，排泄代谢产物，促进血管渗漏，大量癌细胞进入血液循环，是癌细胞播散的途径。肿瘤生长和转移需要新血管持续生长4。血管形成过程的核心是血管内皮细胞增殖，VEGF是最重要的血管生长因子，是血管内皮细胞的特异性致裂原，能选择性地作用于血管内皮细胞膜上的两种络氨酸激酶受体，促进内皮细胞分裂，增殖和血管构建，诱导微血管生成，增加血管通透性，它还能降解血管内皮细胞基质，削弱血管的屏障作用，使新生血管基底膜缺损加重，促进肿瘤的侵袭及转移5,6。本实验证实苏拉明组、槲皮素组和结合组中VEGF的表达较对照组及DDP组低，有显著性差异P0.01，VEGF的表达在肿瘤侵润的边缘尤为增强，且和肿瘤内VD有一致性，说明苏拉明和槲皮素可抑制肿瘤内血管生成，切断肿瘤营养供给和肿瘤转移通道，抑制肿瘤的转移。我们同时观察到苏拉明与槲皮素结合能增强血管抑制作用，可能与槲皮素亦有抑制血管增殖的活性有关7，两者具有协同作用。结合VEGF表达灰度值和肺外表转移结节数呈负相关(r=-0.88,P0.01)，提示VEGF是监测肿瘤转移的较好指标。苏拉明和槲皮素可通过下调这些蛋白质表达而抑