采样技术课件

1、重大疫病采样技术目的与意义在重大动物疫病监测与检测时，采样方法、采样数量和样品质量直接决定检测结果的准确性和结论的科学性。Company Logo采样的一般原则凡发现患畜(包括马、牛、羊及猪等)有急性死亡时，如怀疑是炭疽，则不可随意解剖，应采取患畜的血液，万不得已时局部解剖作脾脏触片的显微镜检查。只有在确定不是炭疽后，方可进行剖检。1采样时应从胸腔到腹腔，先采实质器官做到无菌，避免外源性的污染，最后采污染的组织，如胃肠组织、粪便等。2采取的病料必须有代表性，采取的组织器官应病变部位明显。采取病料时应根据不同的疫病或检验目的，采取相应样品。3Company Logo病料应在使用治疗药物前采取，内

2、脏病料的采取，如患畜已死亡，应尽快采集，最迟不超过6h。4血液样品在采集前一般禁食8h。采集血样时，应根据采样对象、检验目的及所需血量确定采血方法和采血部位。5做好个人防护，预防人畜共患病。防止污染环境，防止疫病转播，做好环境消毒和废弃物的处理。6Company Logo1.诊断采样方法3.疫情监测或流行病学调查2.免疫效果监测Company Logo采样时机病初发热期症状典型期疾病发展阶段一个免疫间期Company Logo采样数量1诊断：1-3头具有典型症状或病死动物有病变的器官组织。2免疫效果监测：符合统计学要求。3疫情监测或流行病学调查：年龄、季节、周边疫情和估算其感染率。4种群疫病监

3、测净化Company Logo器械采样记录用品保存液人员防护用具采样器械物品的准备Company Logo1.耳缘静脉采血2.前腔静脉采血：（1）站立保定、（2）仰卧保定3.股静脉4.桡头静脉4.隐静脉1.雏鸡心脏采血2.成年禽的心脏采血：（1）侧卧保定、（2）仰卧保定3.翅静脉1.牛、羊颈静脉采血2.牛尾静脉采血3.乳房静脉采血血液样品的采集方法禽猪牛、羊Company Logo血液样品的制备1.抗凝血：采血前，预先在采血容器内按每10毫升加入0.1%肝素1毫升或EDTA20毫克，采血后立即混匀。Text2.血清：室温下静置2h4h(防止曝晒)，待血液凝固，有血清析出时，然后置4冰箱过夜，取

4、出血清，必要时经低速离心（1500-2000ram5分钟）分离出血清。 3.血片Company Logo动物活体样品的采集猪家禽1.喉拭子和泄殖腔拭子：无菌棉签，插入鸡喉头内或泄殖腔转动3圈，取出，插入离心管（事先加入含有6000u双抗PBS）。2.羽毛采集：含丰富羽髓的翅羽或大羽，剪下羽根置入小试管中。1.鼻腔拭子、咽拭子：无菌棉签采集鼻咽分泌物，立即置入保存液（双抗PBS 、灭菌肉汤、30%甘油盐水、乳蛋白水解液），密封低温。2.肛拭子：无菌棉签插入肛门采集内容物或分泌物。3.扁桃体Company Logo1.牛、羊食道-咽部分泌物(O-P液)样品： 被检动物在采样前禁食(可饮水)12小时

5、，以免反刍胃内容物严重污染O-P液。采样探杯在使用前经0.2柠檬酸或2氢氧化钠浸泡5分钟，再用自来水冲洗。每采完一头动物,探杯要重复进行消毒和清洗。采样时动物站立保定，将探杯随吞咽动作送入食道上部1015cm处，轻轻来回移动23次，然后将探杯拉出。如采集的O-P液被反刍胃内容物严重污染，要用生理盐水或自来水冲洗口腔后重新采样。 将探杯采集到的35mL O-P液倒入15 mL的塑料离心管中, 容器中应事先加有35mL磷酸盐缓冲液（0.04mol/L 、pH7.4），加盖密封后充分摇匀，尽快放入装有冰块的冷藏箱内，然后转往冰箱冻存。通过病原检测，做出追溯性诊断。 2.眼睛分泌物：无菌棉签轻轻擦拭。

6、牛羊Company Logo 以发病动物(牛、羊或猪)未破裂的舌面或蹄部,鼻镜,乳头等部位的水泡皮和水泡液最好。对临床健康但怀疑带毒的动物可在扑杀后采集淋巴结、脊髓、肌肉等组织样品作为检测材料。 水泡样品采集部位可用清水清洗，切忌使用酒精、碘酒等消毒剂消毒、擦拭。 未破裂水泡中的水泡液用灭菌注射器采集至少1毫升，装入灭菌小瓶中(可加适量抗菌素)，加盖密封；尽快冷冻保存。 剪取新鲜水泡皮35克放入灭菌小瓶中,加适量（2倍体积）50甘油/磷酸盐缓冲液(pH7.4), 加盖密封；尽快冷冻保存。 在无法采集水泡皮和水泡液时，可采集淋巴结、脊髓、肌肉等组织样品35克装入洁净的小瓶内, 加盖密封；尽快冷冻

7、保存。 水泡样品 Company Logo其他 粪便1.用于病毒检验2.细菌学检验3.寄生虫学检验 生殖道样品1.流产胎儿及胎盘2.精液3.阴道、阴茎包皮分泌物皮肤、浓汁、尿液、乳汁 关节及胸腔腹腔积液样品1.皮下水肿、关节囊渗出液2.胸腔积液3.腹腔积液Company Logo病死畜禽组织样品的采集一、小家畜或家禽致死后，装入密封袋中，低温送检六：肠1.肠管2.肠内容物二、实质器官：小的器官（脾、肾、淋巴结）完整采取，大的器官（心、肝、肺）采集病变部分，要采集病变与健康组织交界处。1.病理组织学2.病原学三、骨五、脑：采样勺采集法：采集后，浸入30%甘油盐水液中 或冰冻保存。全脑采集：分两部

8、分。四、皮肤Company Logo样品登记表与样品信息1.采样同时，填写采样单2.每头动物的不同部位的组织样品应单独包装3.采样单随样品同时送到、部分要附病史资料。家禽采样单家畜采样单Company Logo1.容器的选择：完整、密封、清洁样品包装要求2.容器外的标示：样品编号、样品名、日期等。Company Logo样品的保存1血清学检验材料：1.避免高温、阳光2.防漏、防破损2微生物学检验材料：1.液体病料：灭菌瓶内，密封，装入大容器；棉拭子蘸取，投入灭菌试管。2.实质脏器：短时间内送到。30%、50 %甘油生理盐水毒物检验材料：无菌采集可合装一清洁容器内。污染性的装一起。3病理组织学1

9、.10%福尔马林、2.90%酒精Company Logo防泄漏：具有坚实的大容器，具有足够的垫料样品的运送详细标签，低温保存，避免反复冻融时间：立即送到，如距离远，24h内，4左右。24h外，冰冻。Company Logo1234各地州根据全年监测任务合理安排上下年送检任务，在规定的时间范围内送检。集中监测送样时间：上半年5月份，下半年10月份。地州疾控中心收到各县样品后，应应先汇总整理，不要以县市为单位送检样品。送检样品需航空运输，或专人送检。各种疫病在采样单的填写上都应严格地去填所有需要填的内容，不能空格不填。没有的项可画斜线表示或写无。送检单必须加盖单位公章。送检单及样品不合格，退回。

10、实验室部分送检要求Company Logo5定点、定期、定量、定性监测工作机制自治区定点到县，地州（市）定点到乡，按2011年监测计划要求采集样品，原则上种畜场、规模场、活畜交易市场要相对固定，散养户根据实际情况采集样品，监测采样要有连续性，便于数据分析。采样数量按监测计划要求制定，采样要合理布局。实验室部分送检要求Company Logo1.2011年猪瘟、高致病性蓝耳病病原学集中监测任务 中，所采样品为同一样品，不必重复采样，在采样 单上注明猪瘟、高致病性蓝耳病免疫状况。实验室部分送检要求2.2011年禽流感、新城疫病原学集中监测任务中， 所采样品为同一样品，不必重复采样，在采样单 上注明

11、禽流感、新城疫免疫状况。3.喉头拭子与泄殖腔拭子要放入同一试管（1.5ml离 心管）内，喉头拭子采集的为喉头气 管内的黏液（分泌物）。4.野禽（小珍禽）必须为新鲜粪便。5.活畜与屠宰场采样比例失调，采集屠宰场样品 多，采集活畜样品少，动物疫病在活畜存在的风 险大，采样比例应大。Company Logo附录 1不同动物采血部位猪前腔静脉马、牛、山羊、绵羊颈静脉狗、猫心脏狗、猫股动脉大量血牛尾静脉鸡、鸭、鹅翼下静脉狗、猫颈静脉狗、猫前肢内侧皮下头静脉狗、猫后肢外侧皮下小隐静脉中量血鸡、鸭、鹅冠、脚蹼皮下静脉狗、猫、猪、山羊、绵羊耳静脉少量血动物种类采血部位采血量Company Logo病名样品口蹄

12、疫 水疱皮、水疱液、食道-咽分泌物、扁桃体非洲猪瘟全血、脾脏、扁桃体 猪瘟全血、扁桃体、淋巴结、肾、脾、肾脏小反刍兽疫 全血、眼鼻分泌物、淋巴、脾、肺、扁桃体蓝舌病全血、脾、肝痒病脑牛海绵状脑病脑禽流感、新城疫鼻、咽、气管分泌物、泄殖腔拭子、肝、脾、肾、肠管、粪便猪流感鼻、气管或支气管拭子、肝、脾等狂犬病唾液、脑附录 2 部分动物疫病病原检验取样样品参考表 Company Logo牛肺疫肺、胸腹积液炭疽 全血（涂片）、脾、耳部皮肤伪狂犬病脑、脊髓液、扁桃体、淋巴结、流产胎儿、胎盘（猪）巴氏杆菌病全血（涂片）、肝、肾、脾、肺布氏杆菌病流产胎儿、胎盘、乳汁、精液结核病乳汁、痰液、粪便、尿、病灶分泌物、病变组织细小病毒病牛：肠粘膜、局部淋巴结猪：流产胎儿、胎盘、鼻咽气管分泌物、气管粘膜犬：小肠及内容物、粪便、水泡皮（液）、食道咽分泌物、扁桃体 高致病