通冠胶囊对颈动脉球囊损伤后大鼠血清基质细胞衍生因子1和血管内皮生长因子表达的影响

1、通冠胶囊对颈动脉球囊损伤后大鼠血清基质细胞衍生因子1和血管内皮生长因子表达的影响作者：訾勇，张敏州，王磊，郭力恒，张军，温春瑜，杨澄【摘要】【目的】观察通冠胶囊对颈动脉球囊损伤模型大鼠基质细胞衍生因子1(SDF1)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。【方法】复制大鼠左颈总动脉球囊损伤模型，将54只造模成功的SD大鼠随机分为通冠胶囊组(剂量为600mgkg-1d-1)、模型组和辛伐他汀组(剂量为2mgkg-1d-1);于术后第4、8、12周处死动物，采用苏木素伊红(HE)染色及弹力纤维染色法观察血管壁增生情况，采用计算机图像分析内、中膜面积比值(Ai/Am)观察通冠胶囊对新生内膜形成的影响

2、，采用酶联免疫吸附法检测SDF1、VEGF水平。【结果】通冠胶囊组、辛伐他汀组与模型组比较，VEGF、SDF1水平在颈动脉球囊损伤后不同时段大鼠的血清中表达显著增高(均P001)，8周时通冠胶囊组SDF1表达较辛伐他汀组显著升高(P005)，12周通冠胶囊组VEGF表达与辛伐他汀组比较，差异有显著性意义(P005)。球囊损伤后4周内膜增生明显，8周形成的增生内膜有少量减少，12周时形成的新生内膜减少明显。通冠胶囊可使损伤后4、8、12周形成的新生内膜较模型组显著减少，Ai/Am较模型组显著降低(均P001)。【结论】通冠胶囊可以促进大鼠颈总动脉球囊损伤后血清中SDF1及VEGF的表达，并减少新

3、生内膜的形成。【关键词】通冠胶囊/药理学;冠状动脉疾病/中药疗法;血管内膜/病理学;疾病模型，动物;大鼠目前普遍认为血管内膜增生在粥样斑块以及血管成形术后再狭窄的形成过程中都起到了关键性的作用。内皮细胞结构和功能损伤是动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)、冠心病介入治疗后再狭窄(restenosis，RS)共有的始动病理机制1-2。血管内皮生长因子(VEGF)是内皮细胞唯一的特异性促有丝分裂原,具有促进内皮细胞增殖、增加微血管通透性、诱导血管生成等多种功能3。基质细胞衍生因子1(SDF1)与其特异性受体细胞因子受体4(CXCR4)相互作用，构成SDF1/CXCR4反应轴，对抑制

4、动脉粥样硬化的发生发展起着重要的作用。VEGF和SDF1在动脉粥样硬化及冠心病介入治疗后再狭窄过程中的作用正越来越受到重视。本研究采用颈动脉球囊损伤大鼠模型观察通冠胶囊对SDF1、VEGF表达的影响，探讨通冠胶囊保护血管内皮、防治冠心病介入治疗后再狭窄及促进血管新生的作用机制。现报道如下。1材料与方法11主要试剂、仪器及药物VEGF和SDF1酶联免疫检测试剂盒购自北京博奥森生物技术有限公司(一抗)、上海西唐科技有限公司(二抗);PowerwaveHT型酶标仪(美国Biotek公司);CHA213W型显微镜(日本OLYMPUS公司);ImageProPlus60图像分析系统;JD801型数码医学

5、显微图像分析系统(江苏省捷达科技发展有限公司)、通冠胶囊由广东省中医院制剂科提供(生产批号：07110504);舒降之片由默沙东制药有限公司提供(辛伐他汀，生产批号：08023)。12模型复制及实验分组采用内膜剥脱法制备大鼠颈动脉狭窄模型4。用100mg/L水合氯醛溶液，按400mg/kg腹腔麻醉大鼠，取仰卧位固定，常规消毒大鼠颈前皮肤,取颈部正中切口，从颈外静脉注射肝素钠100U/kg，寻找到左颈总动脉和颈外、颈内动脉分叉处，在左颈总动脉近心端暂时阻断血流，靠近分叉处用血管分离棒轻轻分离颈外动脉，其近心端和远心端各穿一4号丝线待用。从颈外动脉处将15FForgaty导管插入至颈总动脉约15cm，在直视下观察球囊的插入深度，肝素生理盐水充盈球囊，缓慢回抽球囊至动脉分叉处，反复3次剥脱内膜。将导管撤出后，结扎颈外动脉近段，去除血管夹，恢复血流，查看颈总动脉和颈内动脉搏动是否良好。缝合伤口，送回动物观察室，腹腔注射青霉素预