药业公司洁净区房间沉降菌静态测试方案

1、药业公司洁净区房间沉降菌静态测试方案1测试方法本测试方法利用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，以平板培养皿中的菌落数来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净区的洁净度。2使用的仪器和设备高压消毒锅：使用时应严格按照操作规程进行。恒温培养箱：必须定期对培养箱的温度计进行检定。3培养皿一般采用90mm15mm硼硅酸玻璃培养皿。使用前将培养皿置于121湿热灭菌30min。4培养基：大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）。将培养基加热熔化，冷却至约45在无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。待琼脂培养基凝固后，将培

2、养基平皿放入3035恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用，制备好的培养基平皿应在28的环境中存放。5测试步骤采样方法：将已制备好的培养皿放置在预先确定取样点，打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上盖后倒置。培养全部采样结束，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。在3035培养，时间不少于2天。每批培养基应有对照试验，可每区域选定3只培养皿作对照试验，与采样皿同时操作但不需暴露采样，然后与采样后的培养皿一起放入培养箱内培养，结果应无菌落生长。菌落计数用肉眼直接计数，然后用510倍放大镜检查，是否有遗漏。若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，可分辨时仍以2个

3、或2个以上的菌落计数。注意事项测试用具要做灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。采取一切措施防止人为对样本的污染。对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，必要时用显微镜鉴别。采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。6测试规则测试状态静态测试，室内测试人员不得多于2人。沉降菌测试前，被测试洁净区的温湿度须达到规定的要求，静压差必须控制在规定值内。沉降菌测试前，被测试洁净区已经过消毒。测试时间测试宜在操作人员撤离现场并经过20min自净后开始。7沉降菌计数采样点数目最

4、少采样点数目：沉降菌的最少采样点数可按下表确定。在满足最少测点数的同时，不宜满足最少培养皿数，见下表。最少采样点数目：面积（）洁净度级别A 、B级C级D级102-32210-2042220-4082240-1001642100-20040103注：表中的面积，对于单向流洁净室，指的是送风面积，对于非单向流洁净室，指的是房间面积。采样点的布置工作区测试点位置离地0.81.5m左右（略高于工作面）。 可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点，采样点的布置应力求均匀，避免采样点在某局部区域过于集中，某局部区域过于稀疏（如图3）。8 记录：测试报告中应记录测试者的名称和地址测试日期，测试依据，被测洁净室的平面位置，有关测试仪器及其测试方法描述，测试结果。9结果计算单个沉降碟的暴露时间可以少于4 小时，同一位置可使用多个沉降碟连续进行监测并累积计数。 10 结果评定用平均菌落数判断洁净室的空气中的微生物。洁净区内的平均菌落数必须符合所选定的评定标准。若某洁净区的菌落数超过评定标准，则必须对此区域先行消毒，然后重新测试两次，测试结果必须合格。 测定结果见附件。附件 洁净区沉降菌测试记录 验证记录样张